
sk-mel-2细胞(人皮肤黑色素瘤细胞)
- 来源:皮肤;大腿部位的转移病灶
- 细胞特征:贴壁细胞 , 多边形
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:抗原表达:A型血、Rh阳性
SK-MEL-2细胞系是一种源自60岁白人男性的多边形形态细胞系。sk-mel-2细胞最初是从患者恶性黑色素瘤的皮肤转移组织中分离,尤其是大腿部位的转移病灶。
SK-MEL-2细胞系从亚二倍体到超四倍体不等,并具有一些遗传异常,例如双着丝粒、次生缩窄和显著的端粒标记。
sk-mel-2细胞相关特性特征
细胞遗传不稳定性:文献报道sk-mel-2细胞存在一定程度的不稳定性
致瘤性:sk-mel-2细胞在裸小鼠中可形成恶性黑色素瘤
转移性:源自皮肤转移灶,具有转移潜能
抗原表达:A型血、Rh阳性
同工酶表达:AK-1,1;ES-D,1;G6PD,B;GLO-I,2;PGM1,1;PGM3,1
基因突变:可能携带黑色素瘤相关的基因突变(如BRAF、NRAS等)
基因表达:可能表达黑色素瘤相关基因(如MITF、TYR等)
特殊变种:SK-MEL-2+luc:通过慢病毒转染方式获得,携带荧光素酶(Luc)基因
sk-mel-2人皮肤黑色素瘤细胞参数表
细胞名称 | sk-mel-2细胞(人皮肤黑色素瘤细胞) |
细胞别称 | SK-Mel-2; SK-Mel 2; SK-mel-2; SK-MEL2; SK.MEL.2; SKMEL-2; SKMEL2; SKmel2; SK-ML2; SKml2 |
种属 | 人 |
来源患者 | 60岁白人男性 |
组织来源 | 皮肤(大腿皮肤转移部位) |
形态 | 多边形,上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞代数 | 10代以内 |
细胞规格 | 1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管 |
培养基 | MEM+10%FBS+P/S(MEM含EBSS,NEAA) |
培养条件 | 95%空气+5%二氧化碳,37℃ |
传代密度 | 细胞密度达80%-90% |
传代比例 | 首次传代1:2 |
冻存条件 | 无血清冻存液,液氮储存 |
遗传不稳定性 | 存在一定程度的不稳定性 |
致瘤性 | 在裸小鼠中可形成恶性黑色素瘤 |
转移性 | 源自皮肤转移灶,具有转移潜能 |
抗原表达 | A型血;Rh+ |
同工酶 | AK-1, 1; ES-D, 1; G6PD, B; GLO-I, 2; PGM1, 1; PGM3, 1 |
支原体检测 | 阴性 |
细菌/真菌 | 阴性 |
病毒检测 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎均阴性 |
生物安全 | 二级(BSL-2) |
特殊变种 | SK-MEL-2+luc(携带荧光素酶基因) |
供应限制 | 仅限科学研究,不可用于临床治疗 |
保存方法 | 液氮储存 |
培养教程
sk-mel-2人皮肤黑色素瘤细胞培养教程
SK-MEL-2细胞复苏
将冻存管置于37℃水浴中快速解冻。
解冻后立即加入4mL预热的完全培养基,并轻轻混合。
以1000rpm离心3分钟,弃去上清。
用1-2mL新鲜培养基重悬SK-MEL-2细胞。
将SK-MEL-2细胞悬液转移到10cm培养皿或T25培养瓶中。
加入适量的完全培养基,置于培养箱中培养。
SK-MEL-2细胞传代
当SK-MEL-2细胞密度达到80%-90%时进行传代。
用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
加入1mL 0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化液,确保覆盖SK-MEL-2细胞。
在37℃下消化1-3分钟,直至大部分SK-MEL-2细胞变圆并脱落。
加入2-3mL完全培养基终止消化,轻轻混匀后转入无菌离心管中。
以1000rpm离心5分钟,弃去上清。
用1-2mL新鲜培养基重悬SK-MEL-2细胞,确保细胞均匀分布。
按1:2或1:3的比例将SK-MEL-2细胞悬液分到新的培养瓶或培养皿中。
加入适量培养基,继续在培养箱中培养。
第三天换液并检查SK-MEL-2细胞密度。
定期拍照记录SK-MEL-2细胞生长状态,确保细胞健康。
SK-MEL-2细胞冻存
使用无血清冻存液。
将SK-MEL-2细胞悬液分装到冻存管中。
置于液氮中长期保存。
注意事项
无菌操作:所有步骤需在无菌条件下进行。
传代比例:首次传代建议1:2的比例,后续根据实验需求调整。
细胞观察:定期观察SK-MEL-2细胞状态,确保无支原体、细菌、真菌等污染。
培养条件控制:严格控制SK-MEL-2细胞培养条件,包括温度、CO2浓度和培养基pH值。
显微镜观察:建议使用低倍镜(4X或5X物镜)观察传代密度,使用10X和20X物镜观察SK-MEL-2细胞形态。
运输细胞:收到SK-MEL-2细胞后需立即转入液氮冻存或直接复苏。若因运输振动导致SK-MEL-2细胞脱落,需要离心回收。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,12 |
D2S1338 | 21,24 |
D3S1358 | 14,16 |
D5S818 | 11,12,13 (ATCC=HTB-68) |
12,13 (Cosmic-CLP=905955; PubMed=19372543; PubMed=25877200) | |
D7S820 | 11,12 |
D8S1179 | 11,12,13 (ATCC=HTB-68) |
12,13 (PubMed=19372543) | |
D13S317 | 11 |
D16S539 | 8,9 |
D18S51 | 15,16 |
D19S433 | 12,13,15 (ATCC=HTB-68) |
12,15 (PubMed=19372543) | |
D21S11 | 29,30 |
FGA | 19,25 |
Penta D | 10,15 |
Penta E | 7,16 |
TH01 | 9 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 16,17 (ATCC=HTB-68) |
17 (Cosmic-CLP=905955; PubMed=19372543; PubMed=25877200) |
参考文献
上一篇:MET5A细胞(人间皮细胞)