B16F0细胞（小鼠黑色素瘤细胞） （暂不提供）

B16-F0小鼠黑色素瘤细胞系来源于C57BL/6J小鼠皮肤肿瘤，最早于1954年由美国科学家在缅因州杰克逊实验室建立。B16F0细胞系衍生自B16小鼠黑色素瘤细胞，具有高度黑色素生成的特性。B16-F0细胞可在体外进行常规传代培养，适合用于黑色素基因表达研究及其他分子生物学实验。B16F0细胞支持3D细胞培养，是进行细胞转染的优良宿主。

B16F0细胞特性特征

• 基因表达：B16F0细胞在黑色素合成相关基因（如酪氨酸酶TYR、微黑色素细胞转录因子MITF等）的表达上具有显著特征。

• 黑色素产生：B16F0细胞能够产生高浓度的黑色素，使其成为研究黑色素相关疾病（如黑色素瘤）的理想模型。

• 转染能力：B16F0细胞适合用于转染实验，能够有效表达外源基因。

• B16-F0细胞广泛用于分子生物学研究，特别是在黑色素基因表达、细胞信号传导、癌症生物学等领域。

• 由于其良好的培养特性和黑色素生成能力，B16-F0细胞常用于药物筛选和抗肿瘤治疗的研究。

• B16-F0细胞适合用于3D细胞培养，能够更好地模拟体内肿瘤微环境，为肿瘤生物学研究提供更真实的实验条件。

B16F0细胞参数表

B16F0小鼠黑色素瘤细胞培养教程

细胞复苏

• 将冻存管置于37℃水浴中，迅速解冻（约1-2分钟）并轻轻摇动，以保证B16F0细胞的活性。
  

• 向解冻后的B16F0细胞悬液中加入4 mL完全培养基，轻轻混匀。

• 将悬液转移至15 mL离心管中，以1000 rpm离心3分钟，弃去上清液，保留B16F0细胞沉淀。

• 加入1-2 mL完全培养基，轻轻吹打以重悬B16F0细胞。

• 将B16F0细胞悬液转移至培养瓶中，加入适量完全培养基，培养过夜。

• 在第三天更换培养基，并在显微镜下检查B16F0细胞的生长状态。

细胞传代

• 当B16F0细胞生长至80%-90%汇合时，准备进行传代。

• 弃去培养基，用PBS缓冲液清洗B16F0细胞。

• 加入约1 mL 0.25%胰蛋白酶消化液，观察B16F0细胞回缩变圆。

• 当B16F0细胞大部分回缩后，加入完全培养基终止消化并吹打使细胞脱落。

• 将B16F0细胞悬液转移至15 mL离心管中，1000 rpm离心5分钟，弃去上清液。

• 用12 mL完全培养基重悬B16F0细胞，并按1:2比例进行分瓶传代。

• 将培养瓶放入37℃、5% CO₂培养箱中培养，观察B16F0细胞贴壁和生长情况。

细胞冻存

• 将完全培养基与8% DMSO和20% FBS混合均匀，以制备B16F0细胞冻存液。
  

• 当B16F0细胞生长至80%汇合时，弃去培养基，用PBS缓冲液清洗B16F0细胞。

• 加入0.25%胰蛋白酶消化液，B16F0细胞回缩后加入完全培养基终止消化。

• 将B16F0细胞悬液转移至离心管中，1000 rpm离心5分钟，弃去上清液。

• 用冻存液重悬B16F0细胞，轻轻混合均匀。

• 将B16F0细胞悬液分装至冻存管中并做好标记。

• 将B16F0细胞冻存管放入-80℃冰箱中冷冻24小时，然后转移至液氮中长期保存。

注意事项

• B16F0细胞操作需在无菌条件下进行，确保所有材料和设备的无菌性。

• B16F0细胞培养过程中需密切观察生长情况，若发现异常应及时处理。

• B16F0细胞仅供科研使用，禁止用于临床或其他非科研用途。

B16F0细胞培养基配方

• 标准培养基
  DMEM高糖 + 10% FBS + 1% P/S，是最常用的配方，适用于多数B16F0细胞的实验。

• 替代培养基
  RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S，适用于某些特殊实验条件下的B16F0细胞培养。

• 添加剂变异
  根据实验需求，可添加L-谷氨酰胺、非必需氨基酸、维生素等，以优化B16F0细胞的生长和黑色素合成。

• 无血清培养基
  对于需减少血清影响的实验，建议使用无血清培养基，结合特定生长因子以维持B16F0细胞生长。