SK-MEL-1细胞（人皮肤黑色素瘤细胞）

SK-MEL-1细胞系由Herbert F. Oettgen及其同事于1966年从一名29岁的白人男性恶性黑色素瘤患者的胸导管中分离。
SK-MEL-1细胞系代表了已发生转移的黑色素瘤细胞，具有显著的恶性特性，且SK-MEL-1细胞系具有淋巴系统转移的能力。SK-MEL-1细胞系表现出黑色素基因的表达。

SK-MEL-1人皮肤黑色素瘤细胞特性特征

• 黑色素生产：SK-MEL-1细胞能够产生黑色素。电子显微镜检测显示，细胞中的色素颗粒与自身合成和吞噬作用相关。
  

• 抗原性：在63%的恶性黑色素瘤患者和10%其他疾病患者体内发现了针对SK-MEL-1细胞的抗体，具有特定的抗原表达模式。

• 血型：A型，Rh阳性。

• 生长特性：SK-MEL-1细胞呈悬浮生长，细胞形态为球形。
  

• 致瘤性：在裸鼠中可形成色素沉着的恶性黑色素瘤，在皮质酮处理的仓鼠颊囊中也可形成肿瘤。
  

• 转移性：通过淋巴系统进行转移。

• 染色体：SK-MEL-1细胞的染色体数目为53~73，性染色体为XY。

• 同工酶：AK-1，1；ES-D，1；G6PD，B；GLO-I，1-2；PGM1，1；PGM3，1

SK-MEL-1细胞参数表

SK-MEL-1人皮肤黑色素瘤细胞培养教程

SK-MEL-1细胞复苏

• 将含有1 mL SK-MEL-1细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速解冻，注意避免水进入冻存管。
  

• 解冻后立即用75%酒精擦拭管外表面，置于无菌操作台中。

• 将解冻的SK-MEL-1细胞悬液转移至含有4-6 mL预热完全培养基的离心管中。
  

• 以1000 RPM离心3-5分钟，弃去上清液。

• 加入1-2 mL预热完全培养基重悬SK-MEL-1细胞，轻轻吹打混匀。
  

• 将细胞悬液转移至含有5-6 mL预热完全培养基的T25培养瓶中。

• 将培养瓶置于37℃、5% CO2的培养箱中培养过夜。
  

SK-MEL-1细胞培养

• 培养基：使用90% MEM（含NEAA）+ 10% FBS + 1% PS，或DMEM-H + 10% FBS + 1% P/S。

• 培养条件：气相：95%空气 + 5% CO2。温度：37℃。

• 换液频率：每2-3天换液一次。

SK-MEL-1细胞传代

• 当SK-MEL-1细胞密度达到80%-90%时进行传代，传代比例为1:2-1:4。

• 弃去培养上清，用PBS润洗SK-MEL-1细胞1-2次。
  

• 加入1 mL 0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA消化液，置于37℃培养箱中消化1-2分钟。

• 轻敲培养瓶后加入少量培养基终止消化，离心后按1:2-1:4比例分到新的培养瓶中。

• 传代周期：24-48小时。

SK-MEL-1细胞冻存

• 待SK-MEL-1细胞生长状态良好时进行冻存。
  

• 将SK-MEL-1细胞悬液按比例分装到冻存管中。

• 逐步降温至-80℃，然后转移至液氮中长期保存。

其他注意事项

• 质量检测：SK-MEL-1细胞的细菌、真菌、支原体检测均为阴性。

• 倍增时间：SK-MEL-1细胞的倍增时间约为100小时。

• 致瘤性：SK-MEL-1细胞在裸鼠中形成色素性恶性黑色素瘤；可的松处理的仓鼠颊囊也会形成肿瘤。

• 抗原表达：SK-MEL-1细胞表达A型血抗原和Rh+抗原。

SK-MEL-1细胞在长时间培养中的常见变异

• SK-MEL-1细胞形态变化：SK-MEL-1细胞通常呈球形悬浮生长，长期培养可能导致细胞形态发生变化，如细胞聚集或形态不均一。

• 生长速率变化：SK-MEL-1细胞的倍增时间约为100小时，长期培养可能导致生长速度减慢，出现细胞衰老或生长停滞现象。

• 染色体不稳定性：SK-MEL-1细胞的染色体数目为53-73，长期培养可能加剧染色体的不稳定性，导致染色体数目和结构的进一步变异。

• 黑色素生产变化：SK-MEL-1细胞能够产生黑色素，但在长期培养中，黑色素的生产量可能会发生变化，出现减少或不均匀的情况。

• 基因表达变化：长期培养可能导致SK-MEL-1细胞的基因表达谱改变，影响细胞功能和特性。

• 支原体污染：尽管SK-MEL-1细胞经过支原体检测，但长期培养中仍有可能出现支原体污染，影响正常生长和实验结果。

SK-MEL-1细胞的抗体反应情况

• 恶性黑色素瘤患者：在63%的恶性黑色素瘤患者体内发现了针对SK-MEL-1细胞的抗体，表明这些细胞在黑色素瘤患者中具有较强的免疫原性。

• 其他疾病患者：在10%的其他疾病患者体内发现了针对SK-MEL-1细胞的抗体，显示出一定的交叉免疫反应性。

• 抗原表达：SK-MEL-1细胞表达A型血抗原和Rh阳性抗原，这些抗原可能在免疫反应中发挥作用。