
hsf细胞(人皮肤成纤维细胞)SV40永生化
- 来源:皮肤
- 细胞特征:贴壁细胞 , 成纤维细胞样
- 培养基:生长培养基:DMEM+ 澳洲血清FBS 15% +P/S 1% 或 成纤维细胞专用培养基
- 其他:细胞提供免疫荧光鉴定。hsf细胞通过慢病毒转染SV40基因,使其成为永生化细胞系
HSF人皮肤成纤维细胞系源自一名男性的皮肤组织,于2009年由中科院昆明细胞库建立。
hsf细胞通过慢病毒转染SV40基因,使其成为永生化细胞系,具备稳定的连续增殖能力。
hsf细胞系用于构建3D皮肤模型,研究皮肤老化、伤口愈合、基因传递及硬皮病等。其特别强大的胶原蛋白和弹力蛋白合成能力,不仅有助于修复受损皮肤组织、促进伤口愈合,还能保持皮肤的弹性和紧致度。同时,hsf细胞通过增殖和免疫调节功能,释放生物活性物质如细胞因子和生长因子,调节免疫反应并促进组织修复,对皮肤组织的抗炎、抗感染等方面具有重要意义。
hsf细胞特性
hsf细胞通过慢病毒转染SV40基因建系,实现永生化,比原代细胞具有稳定的连续增殖能力。
hsf细胞可用于构建3D皮肤模型,适合体外测试皮肤功能和安全性,应用于皮肤老化、伤口愈合、基因传递、硬皮病等研究。
hsf细胞具有强大的胶原蛋白和弹力蛋白合成和分泌能力,通过增殖和组织修复作用促进伤口愈合和皮肤弹性。
hsf细胞具有免疫调节功能,释放细胞因子和生长因子促进组织修复。
hsf细胞参数表
细胞名称 | HSF人皮肤成纤维细胞 |
种属 | 人 |
组织来源 | 真皮组织 |
细胞来源 | 一名男性的皮肤组织,由中科院昆明细胞库建立(2009年) |
建系方式 | 慢病毒转染SV40基因 |
细胞类型 | 永生化人皮肤成纤维细胞 |
细胞形态 | 典型的成纤维细胞形态,长条状或梭形 |
生长条件 | 温度:37°C;CO2浓度:5%;湿度:70%-80%; |
培养基成分 | DMEM+ FBS 15% +P/S 1% |
增殖能力 | 稳定的连续增殖能力 |
主要分泌物质 | 大量胶原蛋白、弹力蛋白等结构蛋白质 |
功能特点 | 促进皮肤组织修复,增强皮肤弹性和紧致度,具有免疫调节功能 |
特殊特性 | 可以在组织工程技术中与其他细胞构建3D皮肤模型 |
检测结果 | 细菌检测:阴性;真菌检测:阴性;支原体检测:阴性;内毒素含量(EU/mL):≤3 |
倍增时间 | 每周2至3次 |
换液频率 | 2-3天换液一次 |
冻存条件 | 冻存液:90%FBS,DMSO 10% |
传代比例 | 1:2传代 |
传代方法 | 建议1:2-1:3 两天换液一次 |
代次 | P3 |
生物安全级别 | 2 |
细胞活力 | 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion) |
主要应用 | 构建3D皮肤模型,体外测试皮肤功能和安全性,研究皮肤老化、伤口愈合、基因传递 、硬皮病等 |
培养教程
hsf人皮肤成纤维细胞培养
HSF细胞复苏方法
将含有1 mL 细胞悬液的冻存管在37°C水浴中迅速摇晃解冻。
加入10mL 培养基混合均匀后,在1000rpm条件下离心4 min,弃去上清液。
补加培养基后吹匀,将所有细胞悬液加入培养瓶或10cm皿中,培养过夜。
第二天换液并检查细胞密度,确保细胞粘附和生长状态良好。
HSF细胞传代方法
当细胞密度达到80%-90%时,进行传代培养。
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
加入1 mL 消化液,置于37°C培养箱中消化1-2 min,观察细胞消化情况。
迅速停止消化,轻敲几下培养瓶后加入少量培养基。
补加6-8 mL/瓶培养基,轻轻打匀后离心5 min,弃去上清液,补加培养基后吹匀。
将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿或瓶中,继续培养。
HSF细胞冻存方法
在细胞生长状态良好时进行冻存。
弃去培养基后,用PBS清洗细胞,加入1 mL 胰酶消化。
细胞脱落后加入1 -4mL 含血清的培养基终止消化,计数细胞。
离心5 min(1000rpm),去掉上清液后加入培养基重悬细胞。
根据细胞数量加入适量无血清细胞冻存液混匀后,每支冻存管冻存1 mL 细胞悬液。
冻存管放入程序降温盒,置于-80°C冰箱冷冻4小时以上后转入液氮气相储存,记录位置以便下次使用。
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