
CCD-1095Sk细胞(人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞)
- 来源:乳腺皮肤
- 细胞特征:贴壁细胞 , 成纤维细胞样
- 培养基:生长培养基:MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S
- 其他:CCD-1095Sk细胞在大约36次群体倍增后衰老
CCD-1095Sk人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞是从左乳房活检时取的正常皮肤上建立,患者患有浸润性导管癌并伴有乳头佩吉特病。
CCD-1095Sk细胞在大约36次群体倍增后衰老。
CCD-1095Sk细胞特性
CCD-1095Sk细胞大约36次群体倍增后衰老。
CCD-1095Sk细胞已经过多次传代,最多可再进行10次传代。
CCD-1095Sk细胞可以用于3D细胞培养。
这一代次的CCD-1095Sk细胞已经过两次数目倍增,约可再进行10次数目倍增。
在本库通过STR鉴定无误。
CCD-1095Sk细胞参数表
细胞名称 | CCD-1095Sk (人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞) |
别称 | CCD1095Sk |
来源 | 皮肤;37岁女性;有限细胞系 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
生长特性 | 贴壁细胞 |
生物安全等级 | 1 |
培养基 | - DMEM + 10% FBS + 1% P/S - MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S + 1 mM NaP |
培养环境 | 37℃;5% CO2;饱和湿度 |
细胞简介 | - CCD-1095Sk细胞从左乳房的活体组织切片的正常皮肤建立,病人患有乳腺浸润性导管癌 并患有乳头湿疹样癌本病。 - 这一代次的细胞已经过两次数目倍增,约可再进行10次数目倍增。 - CCD-1095Sk细胞是有限细胞系,在大约36个代后衰老,目前保存的CCD-1095Sk细胞 已经过多次传代,最多可再进行10次传代,适用于3D细胞培养。 |
细胞用途 | 提供用于科研的稳定细胞系,适用于3D细胞培养 |
传代比例 | 1:3 - 1:4 |
换液频率 | 2~3次/周 |
冻存条件 | 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮保存 |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5%;温度:37℃ |
支原体检测 | 阴性 |
细胞纯度 | 98% |
收录 | ATCC, 编号 CRL-2122 |
培养教程
CCD-1095Sk人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞培养
解冻过程
尽快在收到时解冻CCD-1095Sk细胞并启动培养。如需继续冻存,应存放在液氮蒸气相中,而非-70°C,后者会导致细胞失活。
在37°C水浴中轻轻摇动解冻冻管。为减少污染可能性,确保O形圈和盖子不接触水。解冻应迅速(约2分钟)完成。
解冻后立即从水浴中取出冻管,使用70%乙醇消毒。此后所有操作需在严格无菌条件下进行。
接种过程
将解冻后的CCD-1095Sk细胞悬浮液加入含9.0 mL完全培养基的离心管中,以125 x g离心5至7分钟,弃去上清液。
用推荐的完全培养基重新悬浮CCD-1095Sk细胞沉淀,并移至25 cm2或75 cm2培养瓶中。重要提示:在细胞恢复期间,避免培养基过碱性。建议在加入细胞悬液前,培养容器中的完全培养基放入孵育箱至少15分钟,使培养基达到正常pH(7.0至7.6)。
在37°C的孵育箱中培养CCD-1095Sk细胞,推荐使用5% CO2的空气气氛。
传代步骤
丢弃培养基,用1X的无钙镁-DPBS(或0.25% Trypsin-EDTA溶液)轻轻冲洗细胞单层。
加入2.0至3.0 mL的Trypsin-EDTA溶液至培养瓶中,并在倒置显微镜下观察细胞单层,直至细胞分散(通常需5至15分钟)。
为避免细胞团聚,不要在等待细胞脱离过程中撞击或摇晃培养瓶。难以分离的细胞可以放置在37°C条件下促进分散。
加入6.0至8.0 mL完全培养基,并轻轻吸取细胞悬液。
将适量的细胞悬液移至新的培养容器中。
在37°C的孵育箱中培养CCD-1095Sk细胞。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11 |
D2S1338 | 19,20 |
D3S1358 | 14,16 |
D5S818 | 10,12 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 13 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 10,11 |
D18S51 | 13,19 |
D19S433 | 12,13 |
D21S11 | 30,31 |
FGA | 23,25 |
Penta D | 9 |
Penta E | 11,13 |
TH01 | 9.3 |
TPOX | 8 |
vWA | 14,18 |
参考文献
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