
HC11细胞(小鼠乳腺上皮细胞)
- 来源:乳腺
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1%P/S
- 其他:蛋白质生产: HC11细胞能够生产牛乳蛋白,如β-酪蛋白
HC11小鼠乳腺上皮细胞系是通过转染从其亲本细胞系COMMA-1D中分离得到的催乳素反应型克隆。HC11细胞无需额外添加复杂的细胞外基质或与其他细胞类型共培养即可在培养过程中实现分化。HC11细胞系能够自主产生如层粘连蛋白等细胞外基质蛋白。
HC11细胞源于中期妊娠BALB/c小鼠乳腺的COMMA-1D细胞,经转染后筛选出HC11克隆。
HC11细胞特性特征
HC11细胞能够自主产生细胞外基质蛋白,如层粘连蛋白,这对其结构和功能至关重要。
激素响应:HC11细胞对泌乳激素(如催乳素、胰岛素和地塞米松)具有良好的响应能力,能够诱导产生乳蛋白,如β-酪蛋白。
基因表达特征
未分化状态: 表达Lgals1、Ran、Jam-A、Bmpr1a、Nfkbiz、Trib 1、Rps21和ler3等基因。
分化状态: 表达Id1,显示出与乳腺上皮细胞分化相关的基因表达的动态变化
HC11小鼠乳腺上皮细胞参数表
细胞名称 | HC11细胞(小鼠乳腺上皮细胞) |
细胞别称 | HC-11; HC11 Mammary Epithelium |
来源及类型 | 中期妊娠BALB/c小鼠乳腺,乳腺上皮细胞系 |
细胞形态 | 上皮样,贴壁细胞 |
培养基及体系 | RPMI-1640或DMEM;90% RPMI + 10% FBS |
培养条件 | 37°C,5% CO₂ |
传代及密度 | 比例1:2-1:3;密度约1×10^5细胞/mL |
贴壁及周期 | 贴壁时间24小时;传代周期2-3天 |
细胞代数 | 通常使用10代以内 |
基质及激素 | 产生层粘连蛋白;对催乳素、胰岛素、地塞米松有反应 |
蛋白产物 | β-酪蛋白 |
保存及复苏 | 液氮保存;37°C水浴快速解冻 |
质量控制 | 支原体检测 |
研究用途 | 乳腺生物学、细胞信号转导、乳腺上皮细胞分化研究 |
培养教程
HC11小鼠乳腺上皮细胞培养教程
复苏步骤
从液氮中取出HC11细胞冻存管,迅速放入37°C水浴中,轻轻摇动,快速解冻(约1-2分钟)。
解冻后,立即将HC11细胞转移至含有10 mL培养基的离心管中,轻轻混匀。
以1000 rpm离心5分钟,去除上清液。
加入适量新鲜培养基(约5 mL),轻轻重悬HC11细胞。
将HC11细胞转移至T25培养瓶中,放入37°C、5% CO₂的培养箱中培养。
HC11细胞传代
传代时机:当HC11细胞密度达到80%-90%时进行传代。
弃去HC11细胞的培养上清,使用PBS洗涤细胞。
加入适量胰酶(0.25%)消化HC11细胞,通常消化时间为2-5分钟,观察细胞是否脱落。
加入培养基中和胰酶,轻轻吹打混匀HC11细胞。
以1000 rpm离心5分钟,去除上清液。
重悬HC11细胞,按1:2的比例接种到新的培养瓶中(如1个T25瓶接种到2个T25瓶或2个6cm皿)。
换液:每3天更换一次HC11细胞培养基,以保持细胞的良好生长状态。
HC11细胞注意事项
细胞观察:定期观察HC11细胞形态和生长状态,确保无污染。
支原体检测:定期进行支原体检测,以确保HC11细胞的纯净性。
冻存:HC11细胞传代后可进行冻存,使用无血清冻存液,液氮储存。
提高HC11细胞生长的建议
基础培养基:使用RPMI-1640或DMEM作为HC11细胞的基础培养基,确保其质量。
胎牛血清 (FBS):增加FBS的浓度至15%或20%,以提供更多的生长因子和营养物质,促进HC11细胞生长。
添加物:丙酮酸钠 (Sodium Pyruvate): 增加至1%或2%,以促进HC11细胞的能量代谢。
谷氨酰胺 (GlutaMAX): 维持在1%或增加至2%,以支持HC11细胞的增殖。
抗生素: 适量添加青霉素-链霉素(PS),以防止细菌污染。
生长因子:考虑添加生长因子(如EGF或FGF),以促进HC11细胞的增殖和分化。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
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