
人椎间盘髓核细胞(原代细胞)
- 来源:椎间盘组织
- 细胞特征:贴壁,梭形、多角形
- 培养基:原代细胞专用培养基
- 其他:髓核细胞合成胶原蛋白II和X,表达缺氧诱导因子-1和分泌白细胞介素
人椎间盘髓核细胞是分离自正常脊髓(椎间盘)组织,用于研究椎间盘退变等相关疾病。人椎间盘髓核细胞贴壁生长,呈现出梭形和多角形的细胞样。
人椎间盘髓核细胞特性
人椎间盘髓核细胞来源于椎间盘组织,采用胶原酶-混合消化法和软骨细胞专用培养基制备
髓核细胞在压缩载荷下分配液压,存在于血管供应有限的环境中
髓核细胞合成胶原蛋白II和X,表达缺氧诱导因子-1和分泌白细胞介素
髓核细胞的机械应力促进细胞增殖
成熟的髓核由软骨样细胞和含水球组成,位于椎间盘偏后位置
下腰痛主要由椎间盘退变引起,其中髓核细胞衰老和凋亡是主要机制之一
人椎间盘髓核细胞参数表
细胞名称 | 人椎间盘髓核细胞(原代细胞) |
组织来源 | 椎间盘组织 |
提取方法 | 胶原酶-混合消化法和软骨细胞专用培养基 |
细胞类型 | 髓核细胞 |
细胞形态 | 梭形、多角形细胞样,贴壁生长 |
特性 | 富含胶原纤维和蛋白多糖,提供体外模型研究椎间盘退变中的细胞和分子事件 |
表达物 | 胶原蛋白II、X;缺氧诱导因子-1;白细胞介素-1,-6和-10 |
机械应力 | 促进细胞增殖 |
生长环境 | 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ |
换液频率 | 每3-4天换液一次 |
传代特性 | 可传5代左右;3代以内状态最佳 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
供应限制 | 仅限于科学研究,不可作为治疗产品使用 |
检测 | 经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,纯度>90% |
无菌检测 | 无支原体、细菌、酵母和真菌污染 |
培养教程
原代人椎间盘髓核细胞培养
消毒和观察
用 75% 酒精消毒培养瓶外部。
肉眼观察培养基颜色,并在显微镜下观察细胞生长情况,拍摄不同倍数的照片。
细胞处理
当细胞生长至 80% 时,进行细胞传代前的处理,细胞应在 37°C 培养箱预温 1-2 小时后再进行操作。
严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
细胞转移
将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出,放入另一无菌容器中。
细胞消化和复苏培养
用 PBS 轻轻洗细胞表面,加入适量的 0.05% 胰酶-EDTA 消化细胞。
细胞脱落后加入终止液终止消化。
离心后重悬细胞,换新的细胞培养瓶,37°C、5% CO2 培养。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
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