
人软骨细胞系(原代软骨细胞)
- 来源:人软骨细胞
- 细胞特征:贴壁 ,梭形、多角形
- 培养基:原代细胞专用培养基
- 其他:软骨细胞具有再生能力,从幼稚细胞逐渐分化为成熟的细胞。
人体内的软骨细胞来源于软骨组织,软骨组织由软骨细胞、基质和纤维构成。
软骨细胞具有较强的再生能力,从幼稚的细胞逐渐分化为成熟的细胞,形成软骨基质。软骨细胞是一种位于关节软骨中的特殊细胞,其主要职责是分泌II型胶原以及其他细胞外基质大分子。
人软骨细胞特性
软骨细胞存在于关节软骨中,分泌II型胶原和其他细胞外基质大分子。
软骨细胞的增殖和分化与脊椎动物骨架的发育密切相关。
软骨细胞能够分泌和响应生长因子,包括IGF-1和IL-1。
人软骨细胞分离自软骨组织,软骨组织由软骨细胞、基质及纤维构成。
软骨细胞具有再生能力,从幼稚细胞逐渐分化为成熟的细胞。
软骨组织可分为透明软骨、弹性软骨和纤维软骨三种。
骨细胞位于软骨陷窝内,形态呈椭圆形,细胞质内含有脂滴。
成熟的软骨细胞多分布于软骨陷窝内,由同一个母细胞分裂增殖而成。
人软骨细胞参数表
细胞名称 | 原代人软骨细胞 |
细胞类型 | 软骨细胞 (Chondrocyte) |
存在部位 | 人的关节组织 |
功能 | 分泌II型胶原和其它类型的胶原以及非胶原的细胞外基质大分子 |
生长因子 | 能分泌和响应包括IGF-1和IL-1在内的一系列生长因子 |
细胞鉴定 | Ⅱ型胶原(Collagen Ⅱ)免疫荧光染色为阳性 |
细胞纯度 | 高于90% |
污染检测 | 不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 |
生长方式 | 长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养 |
细胞形态 | 幼稚细胞呈椭圆形,长轴与软骨表面平行; 成熟细胞体积增大,呈圆形或卵圆形,细胞质弱嗜碱性,常见数量不一的脂滴。 |
培养条件 | 气相:空气,95%;二氧化碳,5%;温度:37℃ |
培养液 | 原代细胞专用培养基 |
传代特性 | 可传5代左右;3代以内状态最佳 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
冻存条件 | 90%FBS,DMSO 10%,或使用无血清冻存液 |
同源细胞群 | 由同一个母细胞分裂增殖而成,2-8个细胞成群分布于软骨陷窝内 |
组织再生能力 | 强 |
研究应用 | 研究软骨修复和关节炎病理的有用模型,研究细胞生理功能、药物作用及各种致病因素作用下的病理生理改变 |
染色特点 | 细胞核染色浅,细胞质弱嗜碱性 |
电镜特点 | 细胞有突起和皱褶,细胞质内含有粗面内质网和发达的高尔基复合体,少量线粒体 |
培养教程
人软骨细胞永生化复苏步骤
解冻:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4 mL培养基混合均匀。
离心:在1000 rpm条件下离心3分钟,弃去上清液,加入1-2 mL培养基后吹匀。
培养:将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜或加入6 cm皿中,培养过夜。
换液:第二天换液并检查细胞密度。
人软骨细胞永生化传代操作
消化:加入消化液(0.25% Trypsin-0.02% EDTA),37℃培养箱中消化2-5分钟。
观察:在显微镜下观察细胞消化情况。
停止消化:细胞脱落后,加入完全培养基终止消化。
传代:将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中,或者瓶中培养。
人软骨细胞永生化冻存步骤
收集细胞:收集细胞及培养液,装入无菌离心管中,离心4分钟。
清洗:用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
冻存:根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×10^6~1×10^7/mL,每支冻存管冻存1 mL细胞悬液,标识后放入-80℃冰箱,24小时后转入液氮储存。
STR鉴定及相关
参考文献
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