
小鼠原代软骨细胞
- 来源:软骨组织
- 细胞特征:贴壁 ,梭形、多角形
- 培养基:原代细胞专用培养基
- 其他:软骨细胞能够分泌和响应多种生长因子,包括IGF-1和IL1。
小鼠软骨细胞源自小鼠的软骨组织。小鼠软骨细胞的分离一般采用胶原酶和中性蛋白酶联合消化方法。
小鼠软骨细胞再生能力较强。幼稚的软骨细胞具有椭圆形态,体积相对较小,细胞核染色较浅,细胞质呈弱碱性。而成熟的软骨细胞多呈2-8个成群分布,通过电镜可见其表面具有突起和皱褶。
小鼠原代软骨细胞特性
软骨细胞位于关节软骨中,负责分泌II型胶原和其他类型的细胞外基质大分子。
软骨细胞的增殖和分化与脊椎动物骨架的发育密切相关。
软骨细胞能够分泌和响应多种生长因子,包括IGF-1和IL1。
体外培养的软骨细胞是研究软骨修复和关节炎病理的重要模型。
小鼠软骨细胞分离自软骨组织,软骨组织再生能力强。
幼稚的软骨细胞呈椭圆形,体积较小,细胞核浅染,细胞质弱嗜碱性。
成熟的软骨细胞多为2-8个成群分布,电镜下可观察到突起和皱褶。
小鼠原代软骨细胞参数表
细胞名称 | 小鼠软骨细胞(原代细胞) |
组织来源 | 软骨组织 |
产品规格 | 5×10⁵ cells/T25 细胞培养瓶 或 1mL 冻存管 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞形态 | 长梭状,不规则形 |
细胞分离方法 | 胶原酶-中性蛋白酶联合消化 |
细胞鉴定 | II型胶原 (Collagen II) 免疫荧光染色阳性,纯度高于90%,不含 HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 |
细胞特性 | 幼稚细胞:位于软骨组织表层,椭圆形,细胞质弱嗜碱 成熟细胞:多成群分布于软骨陷窝内,细胞质内有大量粗面内质网和高尔基复合体 |
电镜特征 | 细胞表面有突起和皱褶,细胞质内有大量粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量线粒体 |
培养基 | 原代细胞专用培养基 |
培养条件 | 气相:95%空气+5%二氧化碳,37℃ |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
传代特性 | 可传2-3代左右 |
消化液 | 0.25% 胰蛋白酶 |
细胞用途 | 仅用于科研用途,未通过直接用于活体动物和人的审核,未通过用于活体诊断的审核 |
包装规格 | 1mL冻存细胞悬液或T-25培养瓶 |
运输与保存 | 干冰运输(1mL冻存细胞悬液,-80℃保存1个月)、常温运输(T-25培养瓶) |
培养教程
小鼠原代软骨细胞复苏操作要点
将基在37℃水浴锅预热,并在15mL无菌的离心管中加入8mL预热基。
将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温,轻轻晃动冻存管,使细胞能在1-2分钟内完全解冻。
使用75%酒精进行冻存管的消毒,然后将细胞转移至无菌条件下,并加入新鲜基进行细胞悬液的制备。
进行800rpm离心5分钟,弃去上清液,加入新鲜的基,制备细胞悬液。
将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,然后放入温箱内。
第二天观察细胞贴壁生长情况,进行液体更换以去除死细胞。待细胞长至80-90%汇合时进行正常传代。
小鼠原代软骨细胞传代
预热基、PBS并进行75%酒精消毒。
吸除或倒掉细胞瓶内旧液,加入少量PBS进行细胞润洗。
加入适量胰酶进行消化,37℃孵育,每隔2-3分钟进行一次显微镜下观察,待细胞贴壁间隙变大且细胞趋于圆形但尚未漂起时弃去胰酶并加入新鲜基终止消化。
用吸管轻轻吹打贴壁的细胞,制备细胞悬液。
将细胞悬液分别接种到另外2-3个细胞瓶内,加入新鲜基,置37℃温箱,隔天观察贴壁生长情况。
STR鉴定及相关
参考文献
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