
大鼠软骨细胞(原代细胞)
- 来源:软骨组织
- 细胞特征:贴壁 , 梭形、多角形
- 培养基:原代细胞专用培养基
- 其他:软骨细胞负责分泌II型胶原和其他细胞外基质大分子,与脊椎动物骨架的发育密切相关
大鼠软骨细胞来源于软骨组织。 软骨组织具备强大的再生能力。从幼稚的细胞逐步发育成成熟的软骨细胞,形成了软骨基质,其中软骨细胞在软骨陷窝内群聚分布。软骨细胞的形态特征在幼稚阶段呈现出椭圆形,体积较小,染色浅,细胞质含有脂滴,而成熟阶段则体积较大,呈圆形。通过电镜观察,软骨细胞展现出突起和皱褶,细胞质内充满了粗面内质网和高尔基复合体,同时含有少量线粒体。
软骨细胞还承担着分泌II型胶原和其他细胞外基质大分子的功能,能够分泌和响应各种生长因子,包括IGF-1和IL1。
大鼠软骨细胞特征
软骨细胞形态特征:幼稚细胞体积小,椭圆形,染色浅,细胞质弱嗜碱性,含有脂滴;成熟细胞体积大,多呈圆形,细胞核圆形或卵圆形。
软骨细胞在电镜下可见突起和皱褶,细胞质内含有大量的粗面内质网和高尔基复合体,少量线粒体。
软骨细胞负责分泌II型胶原和其他细胞外基质大分子,与脊椎动物骨架的发育密切相关。
体外培养的软骨细胞可作为软骨修复和关节炎病理研究的模型。
软骨细胞可以分泌和响应多种生长因子,包括IGF-1和IL1。
大鼠软骨细胞参数表
细胞名称 | 原代大鼠软骨细胞 |
细胞来源 | 大鼠软骨组织 |
组织成分 | 软骨细胞、基质及纤维 |
再生能力 | 强 |
分类 | 透明软骨、弹性软骨、纤维软骨 |
细胞位置 | 软骨陷窝内 |
形态特征 | 幼稚细胞:椭圆形,体积小,染色浅,细胞质弱嗜碱性,含有脂滴; 成熟细胞:圆形,体积大,细胞核圆形或卵圆形; 细胞群集:多群集分布,由同源细胞群形成; 电镜特征:突起和皱褶,大量粗面内质网和高尔基复合体,少量线粒体 |
功能 | 分泌II型胶原和其他细胞外基质大分子,参与脊椎动物骨架的发育,响应生长因子 |
应用 | 软骨修复和关节炎病理研究的模型 |
鉴定 | Ⅱ型胶原(CollagenⅡ)免疫荧光染色为阳性 |
纯度 | 高于90% |
无菌性检测 | 不含有 HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 |
生长特性 | 贴壁培养 |
传代特性 | 可传5代左右;3代以内状态最佳 |
换液频率 | 每3-4天换液一次 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% |
培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
培养教程
大鼠软骨细胞培养
培养基准备:准备原代细胞专用培养基、添加因子(10%胎牛血清,1%抗生素抗真菌剂)
细胞接种:将收集到的软骨细胞悬液接种于预先涂覆有培养基的培养皿中。
培养条件:将培养皿置于CO2孵育箱中,在37°C、5%CO2的条件下培养。
培养操作:每两天更换一次培养基,保持细胞的生长状态。
培养操作
细胞消化与传代:
吸出培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次。
添加胰蛋白酶消化液,37℃孵育,定时观察细胞状态,加入新鲜培养基终止消化。
细胞传代:
吹打混匀后,按传代比例接种到新的培养瓶中,并补充新鲜的完全培养基。
实验准备:
根据实验需要选择合适的实验器皿,并进行包被处理以增强细胞贴壁性。
注意事项
确保所有操作在无菌条件下进行,以避免细菌污染。
控制消化液的浓度和消化时间,避免对细胞造成不良影响。
定期观察细胞的生长状态,及时更换培养基,保持细胞的健康生长。
注意细胞传代的比例和频率,避免细胞老化或变异。
实验操作时,注意保持实验器皿的无菌性,以及对细胞的处理和培养条件的精准控制。
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