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货号：STM-CE-3003 规格：5×10⁵cells/T25细胞培养瓶
原代大鼠睾丸支持细胞
- 来源：大鼠睾丸组织
- 细胞特征：贴壁 , 成纤维细胞样
- 培养基：原代细胞专用培养基
大鼠睾丸支持细胞来源正常的大鼠睾丸组织；大鼠睾丸支持细胞是雄性睾丸间质中的关键细胞，其主要职责包括合成和分泌睾丸酮，及支持精子的发生、成熟和性功能的维持。
大鼠睾丸支持细胞形态特征独特，呈现出圆形、椭圆形或不规则形的胞体，核位于中央，胞质呈嗜酸性，含有1-2个核仁和管嵴状线粒体，没有分泌颗粒。
大鼠睾丸支持细胞纯度高于90%，不含有多种病原体。
大鼠睾丸支持细胞参数表
| 细胞类型 | 大鼠睾丸支持细胞（原代细胞） |
| 细胞类型 | 睾丸支持细胞 |
| 组织来源 | 大鼠正常睾丸组织 |
| 形态特征 | 圆形、椭圆形或不规则形的胞体；胞质呈嗜酸性；无分泌颗粒 |
| 细胞纯度 | 高于90% |
| 检测项目 | 3β-HSD免疫荧光染色为阳性；GATA4免疫荧光染色为阳性 |
| 病原体检测 | 不含有 HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌 |
| 生长特征 | 梭形细胞；贴壁生长 |
| 倍增时间 | 每周 2 至 3 次 |
| 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
| 培养条件 | 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，湿度70%-80% |
| 冻存条件 | 冻存液：90%FBS，DMSO 10%；或使用非程序冻存液 |
| 培养基配置 | 基础培养基500ml；生长添加剂5ml；胎牛血清50ml；双抗5ml |
| 运输方式 | 冻存细胞悬液置于冻存管中，置于干冰的泡沫保温盒中；或T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输 |
| 产品用途 | 仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用 |
培养教程
大鼠睾丸支持细胞复苏
将含有1mL细胞悬液的冻存管置于37℃水浴中迅速摇晃解冻。
加入4mL培养基混合均匀。
在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液。
补加1-2mL培养基后吹匀。
将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜。
大鼠睾丸支持细胞传代
当细胞密度达80%-90%时进行传代培养。
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
加入1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟。
观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，立即加入少量培养基终止消化。
补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
将细胞悬液按1：2比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
大鼠睾丸支持细胞冻存
待细胞生长状态良好时，进行细胞冻存。
弃去培养基后，PBS清洗一遍后加入1ml胰酶，细胞变圆脱落后，加入1ml含血清的培养基终止消化。
4 min 1000rpm离心去掉上清。
加入1ml血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和DMSO，轻轻混匀，DMSO终浓度为10%，细胞密度不低于1x106/ml。
每支冻存管冻存1ml细胞悬液，注意冻存管做好标识。
将冻存管置于程序降温盒中，放入-80度冰箱，2个小时以后转入液氮灌存。
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参考文献
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