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15P1细胞(小鼠睾丸上皮细胞)货号:STM-CL-6151 规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

15P1细胞(小鼠睾丸上皮细胞) (暂不提供)

  • 来源:睾丸
  • 细胞特征:贴壁细胞,上皮细胞样
  • 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
  • 其他:15P1细胞表现出支持细胞(Sertoli细胞)和精原细胞的特性,可用于研究睾丸上皮细胞的生物学过程
价格:¥ 1,600.00

15P-1小鼠睾丸上皮细胞系是从一种在生精上皮中表达多瘤病毒大T蛋白(PyLT)的转基因小鼠的睾丸细胞中建立。15P1细胞表现出塞尔托利细胞的特征,包括威尔姆斯瘤(WT1)和斯蒂尔基因的转录。

在与二倍体前生殖细胞共培养时,15P1细胞能够支持这些细胞的减数分裂及其后续分化,最终形成表达精蛋白(Prm-1)基因的单倍体精子细胞。在首次减数分裂开始之前,从9天大的未成熟小鼠中提取的睾丸细胞通过与15P-1细胞共培养,能够形成具有圆形精子细胞形态的单倍体细胞四分体,并启动精蛋白基因的转录。

15P1细胞特性特征

  • 15P1细胞系表现出支持细胞(Sertoli细胞)的特征,能够支持生殖细胞的发育。

  • 15P1细胞表达Wilms肿瘤(WT1)基因和Steel基因,这些基因与生殖细胞的发育和支持功能相关。

  • 15P1细胞系展示出吞噬活性,能够吞噬乳胶颗粒和清除死亡细胞。与生殖细胞的相互作用可以增强其吞噬能力。

  • 15P1细胞分泌具有广谱抗菌活性的蛋白酶敏感物质。在富含圆形精子细胞和神经生长因子的培养基中,其抗菌活性可提高10倍至50倍。

  • 15P1细胞表达KL蛋白(Kit受体的配体),这一蛋白在支持细胞和15P1细胞中均有表达,确认了其Sertoli细胞的特性。

  • 15P1细胞能够支持二倍体减数分裂前生殖细胞的减数分裂及其后续分化,形成表达精蛋白(Prm-1)基因的单倍体精子细胞。

15P1细胞参数表

细胞名称15P1细胞(小鼠睾丸上皮细胞)
别称15p-1;
来源雄性C57BL/6与DBA/2杂交转基因小鼠的睾丸细胞
供体信息雄性,6月龄;睾丸组织
细胞类型Sertoli细胞
细胞形态上皮细胞样
生物安全等级2
细胞状态贴壁生长,适用于3D细胞培养
培养基类型DMEM + 10% FBS + 1% P/S
培养基pH值7.2 - 7.4
培养条件37℃,5% CO₂,饱和湿度
换液周期每2-3天
传代比例1:2 - 1:4(视细胞生长速度及密度决定)
传代方法胰酶消化法
倍增时间24-48小时(视培养条件和细胞状态而定)
抗菌活性具有广谱抗菌活性,培养基活性可提高10-50倍
吞噬活性能够吞噬乳胶颗粒和清除死亡细胞
KL蛋白表达表达Kit受体的配体
细胞增殖能力在适宜条件下可持续增殖
细胞凋亡特性可用于研究细胞凋亡机制
细胞迁移能力具备一定的迁移能力,可用于相关研究
生殖细胞支持能够支持二倍体减数分裂前生殖细胞的减数分裂及其后续分化
精子发生支持支持精原细胞分化为表达精蛋白(Prm-1)基因的单倍体精子细胞
细胞间相互作用与生殖细胞的相互作用增强吞噬活性
研究领域生殖生物学、细胞生物学、发育生物学
实验模型用于研究睾丸上皮细胞的生物学过程及其在生殖细胞发育中的作用

培养教程

15P1小鼠睾丸上皮细胞培养教程

细胞复苏

  • 配制好复苏所需的完全培养基:DMEM-H(高糖) + 10% FBS + 1% P/S(青霉素-链霉素)。

  • 将冻存的15P1细胞管迅速转移至37℃水浴中解冻,避免长时间暴露在常温下。

  • 解冻完成后,立即将15P1细胞悬液(约1 mL)加入到含有4 mL预热培养基的离心管中,轻轻混匀。

  • 在1000 RPM下离心4分钟,去除上清液以清除DMSO和其他冻存保护剂。

  • 向沉淀中加入1-2 mL新鲜培养基,轻柔吹打以均匀分散15P1细胞,然后将细胞转移至适当大小的培养瓶中进行培养。

细胞传代

  • 传代时,先吸干培养瓶中的培养基。

  • 向培养瓶中加入3-4 mL PBS(常温),轻轻摇动以润洗15P1细胞,随后吸走PBS。

  • 加入1 mL胰酶覆盖细胞层,轻轻晃动培养瓶以均匀分布胰酶。将培养瓶放入37℃培养箱中,观察细胞间隙变大但未完全脱落时,立即停止消化。

  • 添加2-3 mL完全培养基终止消化过程,并轻轻混匀细胞。

  • 在900 RPM下离心3-5分钟,弃去上清液。加入新鲜培养基重悬15P1细胞,然后按所需比例分装到新的培养瓶中。

  • 加入适量的完全培养基,置于培养箱中继续培养15P1细胞。

注意事项

  • 无菌操作:始终保持无菌操作,避免15P1细胞受到污染。

  • 消化时间:严格控制胰酶消化时间,不同品牌的胰酶效果可能不同,需根据经验进行调整。

  • 细胞状态监测:定期检查15P1细胞的形态和生长状况,确保其健康生长。

细胞冻存

  • 冻存液制备:使用55%基础培养基、40% FBS和5% DMSO的冻存液来保存15P1细胞。

  • 冻存步骤:将15P1细胞重悬于冻存液中,并分装至冻存管中。在-80℃冷冻过夜后,转移至液氮中长期保存。

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参考文献

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