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货号：STM-CL-6449 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
TM4细胞（小鼠正常睾丸Sertoli细胞）
- 来源：睾丸
- 细胞特征：贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基：DMEM/F12＋5% HS＋2.5% FBS＋1% P/S
- 其他：TM4细胞保持了Sertoli细胞的部分特性，如表达FSH受体、雄激素受体等。但与原代Sertoli细胞相比，它们对FSH的反应性有所降低
TM4细胞系是从雄性小鼠的睾丸中分离出的正常Sertoli细胞，广泛应用于生物医学研究。该细胞系来源于11至13日龄的小鼠睾丸，属于Sertoli细胞类型，呈上皮样形态，能够贴壁生长。TM4细胞对FSH刺激有反应，可增加cAMP的产生，但对黄体生成素（LH）无反应。与原代培养的支持细胞相比，TM4细胞的FSH反应性显著降低。虽然TM4细胞系产生的组成型纤溶酶原激活物较少，但在FSH和视黄酸的刺激下，其产量显著增加。
TM4细胞特性特征
TM4细胞表达FSH受体、雄激素受体和孕激素受体；表达视黄醇结合蛋白、组织纤溶酶原激活物和转铁蛋白
TM4细胞对FSH有反应，cAMP产量增加，但对LH无反应
TM4细胞组成型纤溶酶原激活物产量低，但可被FSH和维甲酸刺激增高
TM4细胞在其抗原表达谱中，包括了H-Y抗原和一种与“小肌肉”相关的蛋白质
TM4细胞在免疫抑制小鼠中未显示致瘤性，但能在半固体培养基中形成集落
TM4细胞检测鼠痘病毒呈阴性
TM4细胞参数表
| 细胞名称 | TM4细胞（小鼠正常睾丸Sertoli细胞） |
| 别称 | TM-4；TM4 |
| 来源 | 11-13日龄雄性小鼠（Mus musculus）睾丸 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样，贴壁生长 |
| 细胞代数 | 通常不超过10代 |
| 生物安全等级 | 1 |
| 培养基 | DMEM/F12 + 5% HS + 2.5% FBS + 1% P/S |
| 培养环境 | 温度37℃，气相中95%空气和5%CO2 |
| 细胞浓度 | >1×10^6细胞/mL |
| 培养时间 | 24-48小时 |
| 冻存条件 | 使用无血清冻存液，储存于液氮中（-196℃） |
| 基因表达 | 表达FSH受体、雄激素受体和孕激素受体 |
| 表达视黄醇结合蛋白、组织型纤溶酶原激活物和转铁蛋白 | |
| 反应性 | 在FSH刺激下，cAMP产量增加，但对LH无反应 |
| 组成型纤溶酶原激活物产量低，但可被FSH和维甲酸刺激增高 | |
| 致瘤性 | 在免疫抑制小鼠中未显示致瘤性，但能在半固体培养基中形成集落 |
| 病毒检测 | 检测鼠痘病毒呈阴性 |
| 污染检测 | 支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性 |
| 细胞复苏活力 | 复苏存活率>90% |
| 科研用途 | 生殖生物学、内分泌学、药物筛选、毒理学研究 |
培养教程
TM4小鼠正常睾丸Sertoli细胞培养教程
TM4细胞复苏
准备好DMEM/F12培养基，加入5%胎牛血清（FBS）和1%青霉素-链霉素（P/S）以提供基础营养和抗菌保护。
在水浴中将培养基预热至37℃，为TM4细胞复苏提供适宜的环境。
从液氮中取出冻存的TM4细胞管，迅速放入37℃的水浴中解冻，过程中轻轻摇晃冻存管，使TM4细胞快速融化，一般在1分钟内完成。
解冻后立即将TM4细胞悬液转移到含5 mL预热培养基的离心管中，轻轻混匀，以稀释DMSO并保护TM4细胞。
在1000 RPM下离心5分钟，去除上清液中的DMSO和其他可能的毒性物质。
向TM4细胞沉淀中加入4-6 mL预热的完全培养基，轻轻吹匀TM4细胞，使其均匀悬浮。
将TM4细胞悬液转移到培养瓶中，置于37℃、5% CO2的培养箱中过夜培养，使TM4细胞适应新的环境并贴壁生长。
TM4细胞传代
观察TM4细胞的形态和密度，当细胞汇合度达到80%-90%时，可以进行传代操作。
小心弃去旧的培养基，用无钙镁的PBS缓冲液洗涤TM4细胞1-2次，去除残留的血清和代谢废物。
加入1-2 mL 0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA消化液，置于37℃的培养箱中消化1-2分钟。观察TM4细胞形态，当大部分TM4细胞变圆并脱落时，轻轻敲击培养瓶的侧面以帮助TM4细胞脱离。
立即加入含10% FBS的完全培养基终止消化，并将TM4细胞悬液吹打均匀。
吸出TM4细胞悬液，在1000 RPM下离心8-10分钟，去除上清液。
加入1-2 mL完全培养基轻轻吹匀TM4细胞，将其按1:2至1:5的比例分配到新的培养瓶中，并补充5-6 mL新鲜培养基。
TM4细胞培养注意事项
若发现TM4细胞在培养瓶中漂浮，需检查培养环境是否适宜，确保培养瓶密封良好，瓶口需使用70%乙醇消毒后平稳放置。
定期检查TM4细胞是否有污染，确保支原体、细菌、酵母和真菌检测结果为阴性。
TM4细胞复苏后三天内，定期拍照记录TM4细胞状态，以便于观察TM4细胞的生长状况和追踪任何异常。
当TM4细胞生长状态良好时，可进行TM4细胞冻存，使用无血清冻存液，将TM4细胞储存于液氮中以备后续使用。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
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