
大鼠成纤维细胞(原代大鼠胚胎细胞)
- 来源:胚胎组织
- 细胞特征:贴壁 , 成纤维细胞样
- 培养基:原代细胞专用培养基
- 其他:用于ES细胞培养,能抑制其自主分化,促进增殖并维持未分化和多潜能性
大鼠胚胎成纤维细胞是来源于胚胎时期的间充质细胞,构成疏松结缔组织。其形态特征表现为较大的细胞,常呈现出突起的纺锤形或星形的扁平结构,核呈规则的卵圆形,且核仁显著。
大鼠胚胎成纤维细胞进行蛋白质合成和分泌,且具备与纤维细胞相互转化的潜能,对细胞修复具有重要作用。在分离和培养过程中,胚胎成纤维细胞先呈现出圆形的状态,随后开始贴壁并伸展成梭形,最终形成紧密排列、突起状的纺锤形或星形的扁平分布。
大鼠胚胎成纤维细胞特性
来源于胚胎时期的间充质细胞分化。
形态为较大的纺锤形或星形扁平结构,细胞核规则呈卵圆形。
功能包括蛋白质合成、分泌及细胞修复。
刚分离时呈圆形,30分钟内开始贴壁,6小时后完全贴壁,5-7天后融合。
用于ES细胞培养,能抑制其自主分化,促进增殖并维持未分化和多潜能性。
大鼠胚胎成纤维细胞参数表
细胞名称 | 大鼠胚胎成纤维细胞(原代细胞) |
组织来源 | 胚胎组织 |
细胞形态 | 较大的纺锤形或星形扁平结构,核呈卵圆形 |
功能 | 蛋白质合成、分泌、细胞修复 |
贴壁时间 | 30分钟内开始贴壁,6小时后完全贴壁 |
融合时间 | 5-7天 |
用途 | ES细胞培养,抑制自主分化,促进增殖并维持未分化和多潜能性 |
特点 | 常用作ES细胞培养的饲养层细胞,能产生促进ES细胞增殖的因子,分泌效果优于外源添加的一些因子 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
培养条件 | 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃ |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
传代特性 | 可传5代左右,3代以内状态最佳 |
培养基 | 成纤维细胞专用培养基 |
质量检测 | 经纤维连接蛋白特异性抗体的免疫荧光鉴定,不含支原体、细菌、酵母菌和真菌 |
培养教程
大鼠胚胎成纤维细胞培养步骤
取出怀孕14-15天的小鼠胚胎组织;
清洗子宫和胚胎组织;
剥离胚胎,去除胎膜和内脏;
消化组织并过滤细胞悬液;
接种和培养细胞。
注意事项
所有操作需在冰上进行,保持无菌操作;
使用含双抗的PBS洗涤组织,防止细胞污染;
控制好消化时间,避免细胞碎片过多。
常见问题及解决方案
细胞污染:严格无菌操作,使用含双抗的PBS冲洗组织;
细胞碎片过多:控制消化时间;
细胞悬液难以过滤:充分预热胰酶并将组织尽量减至肉糜状。
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