3T3 Swiss albino 小鼠胚胎成纤维细胞

3T3-Swiss albino小鼠胚胎成纤维细胞系于1962年由George J. Todaro和Howard Green从瑞士小鼠胚胎中分离建立。3t3 swiss albino细胞系具有超三倍体特性，其模式染色体数为68，大约30%的细胞中能检测到这一染色体数目，同时有2.4%的细胞显示出更高的倍性。

3T3 Swiss albino细胞特性特征

• 病毒易感性：3t3 swiss albino细胞对多瘤病毒和SV40病毒易感，检测结果显示鼠痘病毒呈阴性。

• 基因表达：3T3-Swiss albino细胞能够表达溶血磷脂酰胆碱（lyso-PC），并通过蛋白激酶C非依赖性途径诱导AP-1活性和c-jun N-末端激酶活性（JNK1）。

• 免疫表型：在角蛋白免疫过氧化物酶染色中呈阳性，表明3t3 swiss albino细胞具有成纤维细胞的特征

• 3T3-Swiss albino细胞具有接触抑制特性，当形成单层时，其生长密度可达到约40000个细胞/cm²。尽管3T3-Swiss albino细胞在某些玻璃表面上生长不佳，但在塑料培养瓶中能够良好生长，并且饱和密度可达到约50000个细胞/cm²。

• 3T3-Swiss albino细胞系经过检测，确认不含鼠痘病毒。
  

3T3 Swiss albino细胞参数表

3T3 Swiss albino小鼠胚胎成纤维细胞培养教程

swiss3t3细胞复苏

• 从液氮罐中取出冻存的swiss3t3细胞管，立即将其放入37°C的水浴中，轻轻摇动以加速复苏过程。
  

• 同时，准备好预热至37°C的培养基：DMEM（高糖）+ 10% FBS + 1% P/S。

• swiss3t3细胞完全融化后，迅速将细胞悬液转移至15 mL离心管，加入5 mL预热的培养基。
  

• 轻轻混匀后，以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液。

• 用5 mL新鲜培养基重悬swiss3t3细胞，并将其转移至T25培养瓶中。
  

• 将swiss3t3细胞培养瓶置于37°C、5% CO2的培养箱中培养。复苏后24小时更换新鲜培养基，以去除残余的DMSO和死亡细胞。
  

swiss3t3细胞培养

• 采用DMEM（高糖）+ 10% FBS + 1% P/S作为swiss3t3细胞的培养基，需预热至37°C。
  

• 将swiss3t3细胞维持在37°C、95%空气和5% CO2的培养环境中。
  

• 每2-3天更换一次swiss3t3细胞的培养基，以确保其健康生长。
  

• 通过显微镜定期检查swiss3t3细胞的形态，确保其正常生长并无污染。swiss3t3细胞应呈纤维状且具有接触抑制特性，当细胞覆盖培养瓶表面时应达到约40000个细胞/cm²。
  

swiss3t3细胞传代

• 当swiss3t3细胞达到80-90%的汇合度时，应进行传代操作。
  

• 首先，用PBS洗涤swiss3t3细胞，去除残留的培养基。
  

• 加入0.25%胰酶，放入37°C培养箱中消化2-5分钟，直到swiss3t3细胞开始脱落。

• 加入预热的培养基中止胰酶消化，并轻轻吹打混匀swiss3t3细胞。

• 以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液。
  

• 用新鲜培养基重悬swiss3t3细胞，按照1:2至1:4的比例分配至新的培养瓶中继续培养。

swiss3t3细胞冻存

• 配制swiss3t3细胞的冻存液：60% DMEM培养基 + 30% FBS + 10% DMSO。
  

• 将swiss3t3细胞以1000 rpm离心5分钟，去除上清液。
  

• 用冻存液重悬swiss3t3细胞，并分装至冻存管中。

• 将swiss3t3细胞冻存管置于-80°C的冷冻箱中，缓慢降温至约1°C/分钟。
  

• 24小时后，将swiss3t3细胞冻存管转移至液氮罐中储存（-196°C）。

注意事项

• 细胞状态监测：定期检查swiss3t3细胞的形态，确保无污染和细胞健康。

• 无菌操作：在生物安全柜中进行所有swiss3t3细胞的操作，确保无菌条件。

• 运输要求：复苏swiss3t3细胞应在常温下运输，而冻存swiss3t3细胞需使用干冰进行运输，以保持低温环境。