C3H/10T1/2细胞 clone8细胞（小鼠胚胎成纤维细胞） （暂不提供）

C3H/10T1/2, Clone 8细胞系是一种来源于C3H小鼠胚胎的成纤维细胞，最早由C. Reznikoff等人在1972年从C3H小鼠胚胎细胞中分离。C3H/10T1/2, Clone 8细胞系属于小鼠成纤维细胞系，具有典型的成纤维细胞形态，并且具备80条染色体。

C3H/10T1/2细胞 clone8细胞特性特征

• 致瘤性：c3h10t1/2细胞在免疫抑制小鼠中不致瘤，且在同源小鼠中不产生肿瘤，显示出良好的安全性。

• 接触抑制：c3h10t1/2细胞对过度生长的抑制非常敏感，表现出明显的接触抑制特性。
  

• 转化敏感性：c3h10t1/2细胞系极易被化学试剂转化，尽管没有可检测到的背景自发转变。

• 病毒检测：经检测，鼠痘病毒呈阴性，表明c3h10t1/2细胞系未被病毒感染。

• 基因表达：C3H/10T1/2 Clone 8细胞系的基因表达特征尚未详细列出，但一般情况下，成纤维细胞会表达特定的细胞外基质成分，如胶原蛋白和纤维连接蛋白。

C3H/10T1/2细胞 clone8细胞参数表

C3H/10T1/2 clone8细胞 小鼠胚胎成纤维细胞培养教程

细胞复苏

• 从液氮罐中取出clone8细胞的冻存管后，迅速将其置于37℃的水浴中进行解冻。轻轻摇晃冻存管以加速解冻过程，注意避免细胞因过热而受损。
  

• clone8细胞完全解冻后，立即将细胞悬液转移至含有4 mL完全培养基的离心管中，混匀。

• 以1000 RPM的速度离心4分钟，弃去上清液，以去除冷冻保护剂。
  

• 用1-2 mL完全培养基重悬沉淀后的clone8细胞，轻轻吹打以确保细胞分散均匀。
  

• 将重悬的clone8细胞悬液转移至一个T25培养瓶中，或者将其加入10 cm的培养皿中，加入8 mL培养基，进行过夜培养。
  

• 次日，弃去旧的培养基，加入新鲜的完全培养基，并检查clone8细胞的密度与生长状态。
  

细胞传代

• 当clone8细胞覆盖率达到80%-90%时，准备进行传代。
  

• 弃去培养基，用不含钙和镁的PBS洗涤clone8细胞1-2次，以去除残留的血清和代谢物。
  

• 加入1 mL 0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA消化液，并将培养瓶置于37℃培养箱中，消化1-2分钟，观察clone8细胞变圆并逐渐脱落。
  

• 当大多数clone8细胞脱落时，轻轻敲击培养瓶的侧面，并加入少量培养基终止消化。

• 加入6-8 mL培养基将clone8细胞悬浮液打匀后，在1000 RPM下离心4分钟，弃去上清液。
  

• 用1-2 mL完全培养基重悬clone8细胞，轻轻混匀。
  

• 按1:2比例将clone8细胞悬液分装至新的培养瓶中，并加入8 mL新鲜培养基，继续培养。
  

细胞冻存

• 在clone8细胞生长状态良好时，进行细胞冻存准备。
  

• 按传代步骤离心clone8细胞，并弃去上清液。
  

• 用含10% DMSO的冻存液重悬clone8细胞。
  

• 将重悬后的clone8细胞悬液分装至冻存管中，每管约1 mL。
  

• 将clone8细胞冻存管放入-80℃冰箱中进行过夜冷冻，然后转移至液氮罐中长期保存。
  

注意事项

• 在clone8细胞操作过程中，始终保持无菌操作，以防止污染。

• 不同批次的血清可能会影响clone8细胞的形态和实验结果，因此建议使用相同批次的培养基和血清进行实验。

• 定期观察clone8细胞状态，若发现污染，需立即采取措施处理。