
3T6-Swiss albino 小鼠胚胎成纤维细胞
- 来源:胚胎
- 细胞特征:贴壁细胞 , 成纤维细胞
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:基因表达:溶血磷脂酰胆碱(lyso-PC)通过蛋白激酶c-非依赖性途径诱导AP-1活性和c-jun N-末端激酶活性(JNK1);角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性
3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纤维细胞最初于1962年从小鼠胚胎中分离出来。3T6细胞具有超三倍体的细胞系,其中30%的细胞具有68条染色体,中倍性较高的细胞比例为2.4%。
3T6细胞具有接触抑制特性,在融合的单层培养条件下可以达到40000个细胞/cm²。3T6细胞适合在塑料培养瓶中生长,但在某些类型的玻璃表面上生长效果不佳。3T6细胞饱和密度约为50000个细胞/cm²。
3T6细胞特性特征
分泌能力:3T6细胞能分泌胶原质和透明质酸。
基因表达:溶血磷脂酰胆碱(lyso-PC)通过蛋白激酶c-非依赖性途径诱导AP-1活性和c-jun N-末端激酶活性(JNK1)、角蛋白免疫过氧化物酶染色呈阳性
病毒易感性:对多瘤病毒敏感;对SV40病毒敏感
检测结果:经检测,3T6细胞鼠痘呈阴性
3T6小鼠胚胎成纤维细胞参数表
细胞名称 | 3T6-Swiss albino 小鼠胚胎成纤维细胞 |
别名 | 3T6 cells, Swiss 3T6 cells |
物种 | 小鼠 (Mus musculus) |
组织来源 | 胚胎组织 |
建立时间 | 1963年 |
细胞类型 | 成纤维细胞 |
基因表达 | lyso-PC诱导AP-1活性和JNK1活性;角蛋白免疫过氧化物酶阳性 |
生长方式 | 贴壁生长 |
接触抑制 | 是 |
融合密度 | 40,000个细胞/cm² |
饱和密度 | 50,000个细胞/cm² |
细胞形态 | 成纤维细胞形态,长梭形 |
培养基 | 90% DMEM + 10%胎牛血清 |
培养环境 | 培养温度 37°C;CO₂浓度 5% |
培养容器 | 塑料瓶(在某些玻璃表面上生长不佳) |
传代方法 | PBS洗涤,0.25%胰酶-0.53mM EDTA消化 |
传代比例 | 1:3至1:6 |
基础更换频率 | 每2-3天 |
分泌物 | 胶原质、透明质酸 |
易感病毒 | 多瘤病毒、SV40病毒 |
检测结果 | 鼠痘阴性 |
冻存 | 10% DMSO + 90%胎牛血清;-196°C(液氮) |
存活率 | 80-90% |
研究用途 | 细胞生物学、药物筛选、细胞外基质研究、组织工程、染色体不稳定性研究、癌症研究 |
计数方法 | 台盼蓝染色计数法 |
培养教程
3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纤维细胞培养教程
细胞复苏
将含有1mL3T6细胞悬液的冻存管在37°C水浴中快速解冻(约1-2分钟)。
解冻后,将3T6细胞悬液转移到含有4mL预热培养基的离心管中。
在1000RPM条件下离心4分钟。
弃去上清液,用1-2mL新鲜培养基重悬3T6细胞。
将3T6细胞悬液转移到准备好的培养瓶中,加入适量培养基。
传代方法
当3T6细胞融合度达到80-90%时进行传代。
用PBS轻轻冲洗细胞层1-2次。
加入0.25%胰酶-0.53mM EDTA溶液,在37°C孵育2-3分钟。
轻轻拍打培养瓶,观察3T6细胞脱落情况。
加入含血清的培养基终止消化。
收集3T6细胞悬液,1000RPM离心4分钟。
弃去上清液,用新鲜培养基重悬3T6细胞。
按1:3到1:6的比例接种到新的培养瓶中。
细胞密度控制
融合密度:约40,000个3T6细胞/cm²。
饱和密度:约50,000个3T6细胞/cm²。
接种密度可根据实验需求调整,但不要过低,以免影响3T6细胞生长。
细胞冻存
使用10% DMSO + 90%胎牛血清的冻存介质。
缓慢降温至-80°C,然后转移至-196°C液氮中长期保存。
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参考文献
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