
3T3-L1 小鼠胚胎成纤维细胞
- 来源:胚胎
- 细胞特征:贴壁细胞 ,成纤维细胞样
- 培养基:生长培养基:DMEM+10% NCS+1% P/S
- 其他:当细胞从快速分裂到长满且接触抑制时,3t3l1细胞经历前脂肪向脂肪样的转变
3T3-L1细胞来源小鼠胚胎成纤维细胞的连续亚株,具有成纤维细胞样的特性,喜贴壁生长。3T3-L1细胞用于研究与糖尿病、肥胖和相关疾病机制。
3T3-L1小鼠胚胎成纤维细胞在培养过程中表达胰岛素,并具备产生甘油三酯的能力。当细胞经历快速分裂到长满且接触抑制时,会发生从前脂肪向脂肪样的转变。培养液中高血清含量的存在有助于促进细胞内脂肪的积累。
3T3-L1细胞特征
3T3-L1细胞是通过克隆分离得到的3T3(Swiss小白鼠)的连续亚株,源自小鼠胚胎成纤维细胞。
细胞特性:成纤维细胞样,贴壁生长。
3T3-L1细胞表达胰岛素,并产生甘油三酯。
细胞从快速分裂到长满且接触抑制时,3T3-L1细胞会经历前脂肪向脂肪样的转变。
培养液中高血清含量可促进细胞内脂肪的积累。
3T3-L1细胞主要用于研究与糖尿病、肥胖和相关疾病相关的基本细胞机制。
3T3-L1细胞鼠痘病毒呈阴性。
3T3-L1细胞可作为转染宿主细胞。
3T3-L1细胞参数表
细胞名称 | 3T3-L1小鼠胚胎成纤维细胞 |
别称 | 3t3l1; 3T3 L1; 3T3L1; 3T3-L1 ad; NIH-3T3-L1; NIH3T3-L1; |
种属来源 | 小鼠 |
组织来源 | 胚胎 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
生物安全等级 | BSL-1 |
细胞特性 | 具有产生甘油三酯的能力;经历前脂肪向脂肪样的转变;培养液中高血清含量可促进细胞内脂肪的积累;鼠痘病毒检测结果呈阴性。 |
基因表达 | 胰岛素,表达 |
培养条件 | DMEM+10%CS(小牛血清)+1% P/S |
培养环境 | 空气,95%;二氧化碳 (CO2),5% |
冻存条件 | 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO;液氮 |
推荐传代比例 | 1:3-1:4 |
推荐换液频率 | 2-3次/周 |
特殊说明 | 1. 起始接种密度应在3000/cm2;2. 避免细胞完全融合;3. 冻存复苏后需要温和离心收集细胞悬液;4. 在DMEM(含 1.5g/LNaHCO3)培养基中生长良好。 |
应用 | 用于研究糖尿病、肥胖和相关疾病的基本细胞机制,作为转染宿主细胞。 |
研究发现,噻唑烷二酮类化合物(TZDs)如罗格列酮和吡格列酮在2μM浓度下不影响3T3-L1细胞的活性或细胞凋亡,但可以显著增加细胞内脂质积累,进而促进脂肪细胞的分化,并通过增加Pparγ和NF-κB特异性蛋白的表达来证实脂肪细胞的完全分化。此外,3T3-L1脂肪细胞衍生的外囊泡对胰岛β细胞和人胰岛的存活、增殖和功能有正负两面的影响,取决于脂肪细胞的状态和脂肪组织的来源。在健康状态下,外囊泡对胰岛β细胞有益,但在肥胖和胰岛素抵抗等病理条件下,外囊泡会加剧胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能障碍的进展。
培养教程
3T3-L1细胞培养说明
培养基和培养条件
使用DMEM培养基,含有10% FBS (新生牛血清)
培养密度控制在40-60%的汇合度,避免细胞过度汇合
细胞在快速增值阶段时,每2-3天更换一次培养基
汇合度达到70-80%时进行传代
注意事项
为避免细胞聚集,等待细胞消化时,不要通过击打或摇晃瓶子来刺激细胞,难以消化的细胞可置于37°C条件下
注意血清类型,避免使用胎牛血清,以免导致细胞分化
如果培养过程中出现空泡,优先考虑环境压力,如培养基成分、二氧化碳浓度、营养物质等是否合适
使用胎牛血清可能会造成细胞分化,因此应尽量避免使用
分化诱导过程
细胞生长至融合期,出现接触抑制
添加诱导剂,如0.5mM IBMX、1μmol/L 地塞米松和1-10μg/mL 胰岛素,培养48小时
换成只含胰岛素的培养基,培养48小时
最后换成不含诱导剂的常规培养基,每2天换液1次
用油红O染色法鉴定细胞是否诱导成功
传代方法和冻存条件
传代比例为1:2至1:6,每周2次
冻存条件为90%完全培养基 + 10% DMSO,液氮冻存
常见问答
- 哪些细胞系可以作为正常分化的模型?
- PC-12细胞系 产生轴突生长
THP-1细胞系 单核细胞转化为巨噬细胞
C2C12细胞系 成肌细胞至肌管
HUV-EC-C细胞系 内皮细胞至基底管
MC3T3-E1亚克隆4细胞系 成骨细胞前至成骨细胞
3T3-L1细胞系 前脂肪细胞转化为具有脂质积聚的脂肪细胞
HL-60细胞系 对DMSO的分化反应
Kasumi-6细胞系 对TPA的分化反应 - 我的细胞培养正在形成液泡。怎么了?
- 空泡通常是压力的表现。应激的一些原因是培养基中缺乏谷氨酰胺、添加抗真菌剂、培养基中碳酸氢钠浓度的CO2环境不当或培养基的营养耗尽。
液泡的出现对于一些细胞系来说是正常的,尤其是那些具有脂滴的细胞系(分化后的液泡对于Hep G2[HEPG2]和3T3-L1是正常的)。
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STR鉴定及相关
STR点位信息
8-3 | 17,21 |
6-7 | 12,15 |
5-5 | 13,15 |
X-1 | 26 |
1-2 | 13 |
7-1 | 25.2,29 |
8-1 | 15,16 |
1-1 | 10,15 |
19-2 | 12 |
15-3 | 20.3 |
12-1 | 19 |
6-4 | 15.3 |
4-2 | 19.3 |
3-2 | 14 |
2-1 | 9 |
13-1 | 15.1 |
11-2 | 15 |
17-2 | 12,15 |

参考文献
- 3T3-L1细胞与人骨髓间充质干细胞体外成脂及脂肪细胞功能的比较研究 《中国实验血液学杂志》 2015年06期
- 摘要:目的:探讨3T3-L1细胞与人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell...
- 中药调控3T3-L1脂肪细胞增殖、分化和糖脂代谢的研究进展 吉林大学学报(医学版) > 2020年4期
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