
AGS细胞(人胃腺癌细胞)
- 来源:胃;胃癌
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:Ham's F-12+10% FBS+1% P/S
- 其他:AGS细胞的植板率为34%
AGS人胃腺癌细胞是1979年从一名54岁未经治疗的白人女性胃腺癌患者的胃组织中分离。
AGS细胞是一种超二倍体人类细胞系,模式染色体数为49,约60%的细胞显示此特征。多倍体率为3.6%。细胞核型分析显示,AGS细胞中存在特定的染色体异常,包括der(8)t(1;8)(q12;p23)、der(19)t(19;?)(q13.6;?),以及无法确定来源的微小染色体M3和M12。N20染色体通常有三个副本,而X染色体、N8和N18染色体各有一个副本,N14染色体偶尔会出现三份副本。
AGS细胞不仅适用于常规的二维培养,还能够用于三维细胞培养,是进行转染实验的理想宿主。AGS细胞广泛应用于胃癌、癌症生物学和药物开发领域。
AGS细胞(人胃腺癌细胞)特性特征
植板率:AGS细胞的植板率为34%。
致瘤性:在无胸腺BALB/c小鼠中,AGS细胞具有成瘤能力。
支原体污染:AGS细胞曾经受到支原体污染,但已被ATCC清除。
病毒感染:后续检测发现AGS细胞感染了5型副流感病毒(PIV5,前称SV5)。
AGS细胞(人胃腺癌细胞)参数表
细胞名称 | AGS细胞(人胃腺癌细胞) |
来源 | 人;女性,54岁;胃,胃腺癌 |
生长特性 | 贴壁生长;上皮细胞样 |
细胞代数 | 10代以内;植板率34% |
背景介绍 | AGS细胞源自一个未经治疗的切除肿瘤碎块。 |
生物安全等级 | BSL-2 |
致瘤性 | 是,在无胸腺BALB/c小鼠中致瘤 |
细胞保藏中心 | ATCC; CRL-1739; BCRC; 60102; BCRJ; 0311 |
培养基 | Ham's F-12 + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 气相:95%空气 + 5%二氧化碳;温度:37℃ |
冻存条件 | 55%基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮储存 |
倍增时间 | ~20-24小时 |
消化时间 | 2-3分钟 |
传代比例 | 1:3 - 1:4 |
换液频次 | 2-3次/周 |
支原体污染 | 无(已清除) |
病毒感染 | 感染了5型副流感病毒(PIV5,前称SV5) |
研究领域 | 胃癌生物学、药物开发、3D细胞培养、转染实验 |
培养教程
AGS人胃腺癌细胞培养教程
AGS细胞复苏
从液氮罐中取出冻存的AGS细胞,迅速转移至-80℃冰箱内,放置几分钟以挥发残留的液氮。
在超净工作台中,将冻存的AGS细胞迅速放入37℃水浴中,轻轻摇动,直到AGS细胞完全解冻(通常需1-2分钟)。
解冻后,迅速将AGS细胞悬液转移到15 mL离心管中,并加入5-10 mL预热的完全培养基,轻轻混匀。
以1000 rpm离心5分钟,去除上清液。
将AGS细胞重悬于2-5 mL完全培养基中,并将其转移至已预温的培养瓶中,轻轻摇匀以确保AGS细胞均匀分布。
AGS细胞培养条件
培养基:Ham's F-12,补充10% FBS和1% P/S
培养环境:AGS细胞应置于37℃、5% CO₂和95%空气的孵育器中培养。
换液频次:每2-3天更换一次培养基,以保证AGS细胞获得充足的营养和维持适宜的pH值。
AGS细胞传代
胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25% Trypsin-EDTA)
预热的完全培养基
在超净工作台中,吸弃培养瓶中的旧培养基,用预热的PBS轻轻洗涤AGS细胞一次以去除残留的培养基和死细胞。
加入2-3 mL 0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,均匀覆盖AGS细胞层,轻轻摇晃培养瓶,促进AGS细胞与培养基质分离。
观察AGS细胞是否开始脱离培养瓶底部,通常需要2-3分钟。AGS细胞完全脱落后,加入等体积的完全培养基终止消化。
将AGS细胞悬液转移至15 mL离心管中,以1000 rpm离心5分钟。
去除上清液,将AGS细胞重悬于适量的完全培养基中。按照1:3至1:4的比例将AGS细胞接种到新的培养瓶中,并补充足量培养基。
AGS细胞冻存
在AGS细胞传代后,将AGS细胞培养至对数生长期,收集AGS细胞并以1000 rpm离心5分钟。
去除上清液,将AGS细胞重悬于冻存液中,确保AGS细胞密度约为1×10^6 cells/mL。
将AGS细胞悬液分装至冻存管中,标记清楚。
将冻存管置于-80℃冰箱中慢速降温(通常24小时),随后转移至液氮罐中进行长期保存。
注意事项
在整个操作过程中,应保持无菌环境,避免AGS细胞污染。
定期检查AGS细胞的生长状态,观察AGS细胞形态,确保AGS细胞健康。
若发现任何异常情况(如AGS细胞形态改变、细胞增殖减缓等),应及时采取措施处理。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D1S1656 | 14,16 |
D2S441 | 10,14 |
D2S1338 | 20,22 |
D3S1358 | 15.2 (KCLB=21739) |
16 (ATCC=CRL-1739; CCRID; CLS=300408; Technion Genomics Center BCF) | |
D5S818 | 9,12 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 13 |
D10S1248 | 15 |
D12S391 | 19,20 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 11,13 |
D18S51 | 13 |
D19S433 | 13.2,16 |
D21S11 | 29 |
D22S1045 | 15 |
FGA | 23,24 |
Penta D | 9,10 |
Penta E | 13,16 |
TH01 | 6,7 |
TPOX | 11,12 |
vWA | 16,17 |
参考文献
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