
SNU-719细胞(人胃癌细胞)
- 来源:胃癌
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:SNU-719细胞株存在p53和c-Ki-ras基因突变
SNU-719细胞株源自一名53岁男性胃癌患者的原发性腺癌组织,该患者有100包/年的吸烟史,细胞株于1984年建立。经过光学和电子显微镜的形态学分析,确认SNU-719为中等分化的胃腺癌细胞,具有典型的上皮样形态,并通过贴壁形式生长。
SNU-719细胞的增殖能力较强,在适宜的培养条件下生长迅速。主要以弥漫性单层生长,表现出上皮细胞样的特征。
SNU-719细胞特性特征
基因突变:SNU-719细胞株存在p53和c-Ki-ras基因突变,这些突变与肿瘤的发展密切相关。
表达特征:在SNU-719细胞上清液和裂解物中,通过放射免疫测定法检测到肿瘤标志物,如癌胚抗原(CEA)、α-胎蛋白(α-FP)、糖类抗原19-9(CA 19-9)和组织多肽抗原(TPA)的表达。
信号通路:SNU-719细胞株在Notch信号通路相关配体和受体的表达上表现出高水平,这使其成为研究胃癌干细胞特性的一个重要模型。
应用领域:SNU-719细胞株广泛应用于基础研究、药物筛选以及治疗策略的发展,为胃癌的研究提供了重要实验模型
SNU-719细胞参数表
细胞名称 | SNU-719细胞(人胃癌细胞) |
细胞别称 | SNU719; NCI-SNU-719 |
种属来源 | 人 |
年龄/性别 | 53岁;男性 |
组织来源 | 胃 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生物安全等级 | 1 |
规格 | 1×10^6 cells/T25培养瓶或1mL冻存管包装 |
支原体检测 | 无 |
培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% 抗生素 |
气相组成 | 95%空气 + 5%二氧化碳 |
培养温度 | 37℃ |
倍增时间 | ~24-30小时 |
基因突变 | p53和c-Ki-ras基因突变 |
肿瘤标志物 | CEA, α-FP, CA 19-9, TPA |
信号通路 | Notch信号通路相关配体和受体高表达 |
冻存液成分 | 无血清冻存液,含10% DMSO |
储存方式 | 液氮储存或-80℃冰箱 |
背景简介 | SNU-719细胞来自一名53岁男性原发性腺癌患者的胃组织,经过光学和电子显微镜的形态学研究确认其为中等分化的肿瘤细胞,具有高浓度的TPA。 |
应用领域 | 广泛用于基础研究、药物筛选及治疗策略开发,为胃癌研究提供重要模型。 |
培养教程
SNU-719人胃癌细胞培养教程
SNU719细胞接收后的处理
收到SNU719细胞后,首先检查运输培养瓶是否完好,观察是否有漏液或培养液浑浊的现象。
使用显微镜检查SNU719细胞的生长状态,确保细胞在运输过程中未受损。
移除封口膜,将SNU719细胞的培养瓶放置于37℃的培养箱中孵育2-3小时,使细胞适应培养条件。
轻轻弃去运输培养基,添加6mL预热的完全培养基(RPMI-1640培养基,补充10%胎牛血清和1%抗生素)。
SNU719细胞复苏步骤
配置完全培养基:RPMI-1640基础培养基中添加10%胎牛血清(FBS)和1%抗生素(双抗)。
从液氮中取出1mL冻存的SNU719细胞,将其迅速置于37℃水浴中摇晃解冻,时间约为1分钟。注意避免过度摇晃以防细胞损伤。
解冻后,将SNU719细胞转移至4mL预热的完全培养基中,轻轻混匀。
以1000rpm离心4分钟,去除上清液,保留SNU719细胞沉淀。
用1-2mL新鲜的完全培养基轻轻重悬SNU719细胞。
将细胞悬液转移至T25培养瓶,置于37℃、5% CO₂的培养箱中培养。
在培养24小时后检查SNU719细胞的贴壁情况。若未贴壁,可能为细胞存活率低,可更换新鲜培养基并继续培养。
SNU719细胞传代步骤
当SNU719细胞覆盖80%-90%的培养瓶面积时,即可进行传代。
弃去旧培养基,使用无钙镁的PBS(磷酸盐缓冲液)轻轻冲洗SNU719细胞1-2次,以去除培养基残留。
加入1mL 0.25%胰酶溶液,放入37℃培养箱中消化约1-2分钟,观察SNU719细胞在显微镜下的脱落情况。
当大多数SNU719细胞变圆并开始脱落时,立即加入完全培养基终止消化过程。
将细胞悬液收集于无菌离心管中,在1000rpm下离心4分钟,弃去上清液。
用新鲜的完全培养基重悬SNU719细胞,将其按比例分配到新培养瓶中(通常加入8mL培养基至T25瓶中),继续在37℃、5% CO₂环境下培养。
SNU719细胞冻存步骤
在SNU719细胞生长状况良好且传代前进行冻存准备。先用PBS轻轻冲洗细胞一次,然后加入1mL胰酶消化。
消化后,用血球计数板对SNU719细胞进行计数。根据细胞数量加入适量的培养基,并添加二甲基亚砜(DMSO),使最终浓度达到10%。
每支冻存管中加入1mL SNU719细胞悬液,并做好标识。
将冻存管置于程序降温盒中,首先在-80℃下预冻2小时,然后转移至液氮中长期储存。
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Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 12 |
D3S1358 | 15 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 12 |
D13S317 | 10,11 |
D16S539 | 9,10 |
D18S51 | 13,15 |
D21S11 | 29,30 |
FGA | 21,23 |
Penta D | 10,11 |
Penta E | 11,16 |
TH01 | 7,9 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 16,18 |
参考文献
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