HGC27胃癌细胞（人未分化胃癌细胞）

HGC27细胞系来源于一位未分化胃癌患者的淋巴结转移组织，HGC27胃癌细胞系能够分泌粘液素，体现了胃癌的病理特征。HGC-27细胞表现出上皮样形态，适合贴壁生长。

HGC27胃癌细胞特性特征

• 分泌特性: HGC27细胞能够分泌粘液素，这一特性与其来源于胃癌的特征密切相关。

• 致瘤性: 在裸鼠体内，HGC27细胞具有致瘤性。

• P53状态: HGC27细胞系的P53基因呈阴性。

HGC27胃癌细胞参数表

HGC27人未分化胃癌细胞培养教程

细胞复苏

• 复苏24小时后，观察HGC27细胞的贴壁情况。如果细胞贴壁良好，吸弃旧培养基，换上新鲜的预热完全培养基，继续培养。

• 将冻存管从液氮中取出，迅速置于37℃水浴中解冻（约1分钟），确保HGC27细胞不受热损伤。

• 解冻后，将HGC27细胞悬液迅速加入5-6 mL预热的完全培养基中，并轻轻混合。

• 以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液后，将HGC27细胞轻轻重悬于2 mL完全培养基中。

• 将HGC27细胞悬液转移至T25培养瓶中，并放入37℃、5% CO2培养箱中培养。

HGC27细胞传代

• 传代时机: 当HGC27细胞生长至80%-90%汇合度时进行传代，以保持细胞的健康状态。

• 吸弃旧培养基后，用1 mL无菌PBS清洗一次，去除残留的培养基和血清。

• 加入1 mL 0.25%胰酶，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，直到HGC27细胞皱缩变圆。

• 加入2 mL完全培养基终止消化，轻轻吹打混匀HGC27细胞悬液。

• 以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液后，将HGC27细胞重悬于新培养基中。

• 将HGC27细胞悬液分配至新的培养瓶中，标记后放入37℃、5% CO2培养箱中培养。

HGC27细胞冻存

• 冻存液配制: 使用90%胎牛血清和10% DMSO混合配制HGC27细胞冻存液（现用现配）。

• 将HGC27细胞悬液分装至冻存管中，清楚标记。

• 将HGC27细胞冻存管置于-80℃冰箱中过夜，之后转移至液氮中长期保存。

注意事项

• 换液周期: 每2-3天更换HGC27细胞的培养基，以保持培养环境的适宜状态。

• 细胞状态观察: 定期显微镜检查HGC27细胞的形态和生长情况，确保细胞健康。

• 操作安全性: 在二级生物安全柜中进行操作，以避免外界污染。

HGC27细胞死亡的判断方法

• 细胞形态观察

• 显微镜检查: 在显微镜下观察HGC27细胞形态。如果HGC27细胞皱缩、变圆、脱落，或缺乏贴壁生长，可能意味着HGC27细胞已经死亡。

• 贴壁情况: 正常情况下，HGC27细胞应平铺贴壁生长。如果大部分HGC27细胞未能贴壁或漂浮在培养基中，可能表明细胞已经死亡。

  
  

• 细胞计数

• 细胞计数法: 使用细胞计数板或自动细胞计数仪对HGC27细胞进行计数。如果HGC27细胞数量显著减少，且与预期生长曲线不符，可能意味着HGC27细胞已死亡。

  
  

• 细胞活性检测

• 台盼蓝染色: 活细胞不会被台盼蓝染色，而死HGC27细胞则会呈现蓝色染色，通过这种方法可以直观地判断HGC27细胞的存活状态。

• MTT法: 通过MTT或其他检测方法评估HGC27细胞的代谢活性。如果代谢活性明显降低，可能意味着HGC27细胞已经死亡。

  
  

• 培养基观察

• 培养基浑浊度: 如果培养基变得异常浑浊，可能是由于HGC27细胞死亡或细菌污染引起的。

• pH变化: 检查HGC27细胞培养基的pH值变化，死亡细胞可能导致培养基酸碱度发生异常。

  
  

• 其他指标

• 细胞凋亡标志物: 可通过流式细胞术检测HGC27细胞凋亡相关标志物，如Annexin V和PI染色，进一步确认HGC27细胞的存活状态。