SNU16细胞（人胃癌细胞）

SNU-16细胞系是由韩国首尔国立大学医学院的J. Park于1987年建立的。SNU16细胞来自一名33岁未接受化疗的亚裔女性患者的低分化胃癌腹水样本。由于是在患者化疗前采集的，能够较好地反映原发肿瘤的特性，在胃癌研究，特别是生物学特性和药物筛选方面具有重要应用价值。SNU16细胞形态为上皮细胞，呈圆形，主要以悬浮聚集体的形式生长。

SNU16细胞系呈现双峰染色体数目分布，主要为低四倍体。此外，9条标记染色体在所有细胞中均有发现，部分细胞中还存在额外的标记染色体和DM拷贝。

SNU16细胞特性特征

• SNU16细胞对血管活性肠肽（VIP）受体呈阳性,但缺乏胃泌素受体

• 基因表达：myc+；erb B2+；Rh+；癌胚抗原；标签72；A型血
  

• c-myc原癌基因被扩增,但表达的c-erb-B-2 RNA与其他细胞系相当。而N-myc、L-myc、myb和EGF受体基因中没有发现扩增或重排的证据

• SNU16细胞表达表面糖蛋白癌胚抗原（CEA）和TAG-72

• SNU16细胞是左旋多巴脱羧酶（DDC）阳性

• SNU16细胞有致瘤性,在半固体培养基中的集落形成效率为10%

• 基因未表达：N-myc、L-myc、c-cis、IGF-2或胃泌素释放肽。

SNU16人胃癌细胞参数表

SNU16人胃癌细胞培养教程

SNU16细胞的复苏

• 完全培养基的制备：使用RPMI-1640培养基，添加10%胎牛血清和1%双抗（青霉素-链霉素），混合均匀，确保SNU16细胞的适宜生长环境。

• 预热培养基：将5 mL完全培养基置于15 mL离心管中，并在37°C水浴锅中预热，准备SNU16细胞的复苏。

• 快速解冻SNU16细胞：从液氮或-80°C冰箱中取出冻存的SNU16细胞，立即将其置于37°C水浴锅中，轻轻摇晃使细胞快速解冻，过程应在1分钟内完成。

• 离心：将解冻后的SNU16细胞移入超净工作台，在预热的培养基中混合后，置于15 mL离心管中，以1000 rpm离心5分钟。

• 去除上清：离心后，小心吸弃上清，保留SNU16细胞沉淀，并用2 mL完全培养基轻轻重悬SNU16细胞。

• 接种SNU16细胞：将重悬后的SNU16细胞接种到T25培养瓶中，置于37°C、5% CO2培养箱中进行培养。

SNU16细胞的常规传代

• 培养基更换：每2-3天更换一次新鲜的完全培养基，以保证SNU16细胞生长所需的营养。

• 传代时机：当SNU16细胞融合度达到80-90%时，进行传代操作。

• 吸弃培养基，用PBS缓冲液洗涤SNU16细胞两次，以去除残留培养基。
  

• 加入0.25%胰酶-EDTA溶液，消化SNU16细胞5-10分钟，观察细胞从瓶壁脱落的情况。

• 加入等量的完全培养基终止消化反应，并轻轻吹打SNU16细胞，制备成单细胞悬液。

• 按1:2至1:3的比例，将SNU16细胞悬液接种到新的培养瓶中，继续培养。

SNU16细胞的冻存

• 收集SNU16细胞：在细胞处于对数生长期时进行收集，以1000 rpm离心5分钟，去除上清。

• 制备冻存液：用冻存液（10%DMSO和90%胎牛血清）重悬SNU16细胞沉淀，将SNU16细胞密度调整为1×10^6至1×10^7 cells/mL。

• 分装和初步冻存：将SNU16细胞悬液分装至冻存管中，置于-80°C冰箱中过夜。

• 长期保存：次日将冻存管转移至液氮罐中，进行SNU16细胞的长期保存。

SNU16细胞培养的注意事项

• 使用新鲜配制的培养基，不建议重复使用培养基，以确保SNU16细胞生长环境的稳定。

• 冻存的SNU16细胞收到后应立即转入液氮或-80°C冰箱中保存，以保证SNU16细胞的活力。

• 复苏后的SNU16细胞培养瓶可使用75%酒精进行表面消毒，消毒后静置2-3小时再进行操作。

• 在进行任何操作之前，培养基、血清等试剂应预热至37°C，以确保SNU16细胞不会受到温度变化的应激。