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货号：STM-CL-5772 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
TMK-1细胞（人胃癌细胞）
- 来源：胃
- 细胞特征：贴壁细胞, 上皮细胞样
- 培养基：DMEM 高糖培养基+10%FBS+1% P/S
- 其他：分子特征包括p53基因273位密码子的G→A突变（Arg→His），影响肿瘤抑制功能
TMK-1细胞（亦称TMK1）是人源胃癌细胞系，建立自一名21岁男性胃癌患者的肿瘤组织。TMK-1细胞呈上皮样形态，具备典型的贴壁生长特征，被广泛用于胃癌领域的研究。TMK-1细胞来探讨胃癌的发生与发展机制、肿瘤侵袭与转移过程、耐药性形成以及潜在的治疗靶点，为肿瘤学基础研究和新药开发提供实验模型。
TMK-1细胞特性特征
TMK-1细胞中发现有p15基因重排，这是一种细胞周期调控基因的异常。
TMK-1细胞系表现出细胞周期蛋白cyclins和CDKs（细胞周期依赖激酶）调控异常，促进胃癌细胞的无节制生长。
p53基因在TMK-1细胞中带有突变（273位密码子G→A突变，导致Arg→His替代），影响其肿瘤抑制功能。
TMK-1细胞表面存在高密度的EGF受体（约1×10^6个/细胞），可能促进细胞增殖和肿瘤发展。
TMK-1细胞表达乳腺癌易感基因（如p21、p27）等细胞周期相关蛋白，在不同胃癌细胞株中表达水平存在差异。
TMK-1细胞中存在多种细胞周期蛋白和抑制蛋白的表达失衡，如p15重排、p16蛋白表达缺失等，这些表征胃癌细胞的增殖和调控异常。
TMK-1细胞参数表
| 细胞名称 | TMK-1细胞（人胃癌细胞） |
| 细胞别名 | TMK1 |
| 细胞类型 | 人胃癌肿瘤细胞，肿瘤细胞，上皮细胞样 |
| 组织来源 | 胃肿瘤组织 |
| 患者信息 | 21岁男性 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 细胞纯度规格 | ≥1×10^6细胞/T25培养瓶 |
| 支原体检测 | 荧光法阴性 |
| 病毒检测 | HIV-1、HBV、HCV检测阴性 |
| 细胞污染检测 | 细菌、酵母、真菌检测阴性 |
| 培养基 | DMEM + 10%胎牛血清 + P/S（青链霉素-庆大霉素） |
| 培养温度 | 37℃ |
| 培养气体环境 | 95%空气 + 5%二氧化碳 |
| 换液频率 | 每2-3天 |
| 传代周期 | 3-5天 |
| 传代比例 | 1:2至1:7 |
| 传代方法 | 胰酶消化（0.25%胰酶-0.53mM EDTA），消化时间1-2分钟，随后终止消化，离心重悬传代 |
| 冻存液配方 | 95%培养基 + 5-10% DMSO |
| 冻存细胞密度 | 不低于1×10^6细胞/mL |
| 冻存步骤 | 程序降温盒降温后-80℃，2小时后转液氮保存 |
| 复苏步骤 | 37℃水浴快速解冻，离心去冻存液，加入培养基培养 |
| 安全等级 | BSL-1 |
| 供应限制 | 仅供科研用途，禁止商业转让 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样，贴壁，生长状态良好时细胞密度达80-90% |
| 特殊说明 | 建议收到细胞后拍照记录，复苏初期换液检查细胞状态；冻存管需完整标识 |
培养教程
TMK-1人胃癌细胞培养教程
细胞复苏
从液氮罐中取出TMK-1细胞冻存管，立即置于37℃水浴中轻轻摇晃快速解冻，控制时间在1–2分钟以内。
解冻后迅速将TMK-1细胞悬液转入含有5 mL完全培养基的离心管中，轻轻混匀以降低DMSO毒性。
以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液，去除残留冻存液。
用4–6 mL完全培养基重悬TMK-1细胞，轻轻吹打均匀。
将细胞悬液接种至培养瓶或6 cm培养皿，置于37℃、5% CO₂培养箱中培养过夜。
次日更换新鲜培养液，观察TMK-1细胞贴壁情况及形态。
细胞传代
当TMK-1细胞贴壁生长至80%–90%汇合时，开始进行传代操作。
弃去培养液，用无钙镁PBS轻轻冲洗TMK-1细胞1–2次。
加入1–2 mL 0.25%胰酶-0.53 mM EDTA溶液，于37℃消化1–2分钟。
显微镜下观察，当TMK-1细胞变圆且即将脱落时，立即加入5 mL含10% FBS的完全培养基中和胰酶。
轻轻吹打使细胞均匀分散，随后以1000 rpm离心8–10分钟。
弃去上清液，用新鲜培养基重悬TMK-1细胞。
按1:2至1:4比例分装至新的培养瓶，加入5–6 mL培养基继续培养。
细胞冻存
选择生长状态良好的对数生长期TMK-1细胞进行冻存。
收集细胞悬液，以1000 rpm离心5分钟，弃去上清液。
用冻存液（92%完全培养基 + 8% DMSO）重悬细胞，密度约1×10⁶ 个/mL。
将TMK-1细胞悬液分装入冻存管，放入程序降温盒，于4℃静置10分钟。
随后转移至-20℃保存2小时，再放入-80℃过夜。
最终将TMK-1细胞冻存管移入液氮罐中进行长期保存。
注意事项
胰酶消化时间不宜过长，避免对TMK-1细胞膜造成损伤。
传代操作需保持轻柔，防止气泡和机械性损伤。
在复苏初期，需及时更换培养液，以提高TMK-1细胞的存活率。
冻存步骤中应快速完成，以防DMSO长时间作用造成细胞死亡
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STR鉴定及相关
| Amelogenin | X |
| CSF1PO | 10,12 |
| D5S818 | 10,13 |
| D7S820 | 8,12 |
| D13S317 | 10,13 |
| D16S539 | 9 |
| TH01 | 9 |
| TPOX | 8,10 |
| vWA | 14 |
参考文献
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