Fu97细胞（人胃癌细胞系）

FU-97细胞是一种来源于人类胃癌的上皮样细胞系，最初分离自一名 66 岁日本女性胃癌患者，其术前血清中甲胎蛋白（AFP）水平高达 2266 ng/mL，并伴有淋巴结及胰腺转移。Fu97细胞贴壁生长，具有稳定的微卫星状态（MSS），可高水平分泌 AFP，并已进行外显子测序、蛋白质组学、DNA 甲基化分析、SNP 阵列、转录组分析（微阵列及 RNA-Seq）及反向蛋白质阵列等多组学研究。

FU-97 细胞推荐培养于高葡萄糖（4.5 g/L）杜尔贝科改良伊格尔培养基（DMEM），并需补充 10% 胎牛血清（FBS）及 10 mg/L 胰岛素，倍增时间通常在 72 小时左右，不同批次可能在 30-34 小时范围内波动。

Fu97细胞常用于胃癌发病机制研究、药物筛选及抗癌治疗探索，例如三氧化二砷对其增殖抑制及凋亡诱导的研究。FU-97 细胞在基因靶向治疗研究中也具有重要应用，例如构建针对 STAT3 基因的 siRNA 表达载体，可在该细胞中实现高效沉默，探索其在胃癌治疗中的潜在作用。

Fu97细胞由 ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell 及 PromoCell 等多个国际生物资源库提供，并广泛用于胃癌相关的基础及转化研究。

Fu97细胞特性特征

• 细胞形态和生长方式：FU97细胞是上皮样细胞，贴壁生长。

• AFP表达：产生高水平的AFP（甲胎蛋白）。棕黄色颗粒沉着代表甲胎蛋白表达阳性.

• 微卫星稳定性: 稳定 (MSS)

• 对药物的反应：三氧化二砷(As2O3) 对FU97细胞有体外抑制增殖和诱导凋亡的作用。

• 侵袭能力：表达DKK1的AFP阳性胃癌细胞，FU97细胞的侵袭能力会增强，伤口愈合试验证实。

• 可用于基因治疗研究：针对AFP基因的siRNAs表达质粒是可用于AFP相关胃癌的治疗物质，能显著抑制肿瘤细胞生长并能诱导其凋亡，可进一步研究AFP基因的功能及在实验动物体内进行基因治疗研究。

• 多组学分析：已进行多组学分析，包括深度外显子分析、深度定量蛋白质组分析、DNA甲基化分析、SNP阵列分析、转录组分析（通过微阵列和RNAseq）以及反向蛋白质阵列的蛋白质表达分析。

• STAT3抑制：靶向STAT3基因的siRNA表达载体，在胃癌细胞系FU97中表达STAT3特异性siRNA分子，可特异性抑制STAT3基因的表达。

• 凋亡：转染后48h，Annexin V/PI双染色法检测FU97凋亡结果显示，pDonor Vector-AFP1/2/3的％Gated分别为46.69％、42.79％、38.48％，而空白对照为23.31％，说明排除坏死细胞外，有相当一部分为晚期凋亡细胞，且pDonor Vector-AFP1作用后诱导的晚期凋亡细胞最多

Fu97人胃癌细胞系参数表

Fu97人胃癌细胞系培养教程

细胞复苏

• 预热37℃水浴锅。
  

• 在超净工作台内准备好完全培养基。

• 取出FU97细胞冻存管，75%酒精消毒后迅速放入37℃水浴锅解冻。

• 轻轻摇晃冻存管，使FU97细胞迅速解冻（约1-2分钟）。
  

• 立即用1mL移液枪吸取细胞悬液，转移至含9mL完全培养基的15mL离心管。

• 1200 rpm离心5分钟，弃去上清。

• 重新加入10mL新鲜培养基，轻轻重悬FU97细胞。

• 将细胞转移至培养瓶中，置于37℃、5% CO₂培养箱中培养。

细胞传代

• 每2~3天更换一次新鲜培养基，确保FU97细胞正常生长。
  

• 观察细胞生长状态，FU97细胞达80-90%汇合时进行传代。
  

• 吸去旧培养基，PBS洗涤2次。

• 加入适量0.25%胰酶（含EDTA），室温消化约1-2分钟，轻敲瓶壁助细胞脱落。

• 加入完全培养基终止消化，轻轻吹打混匀FU97细胞。

• 1200 rpm离心5分钟，弃去上清，重悬细胞。

• 1:3~1:5比例进行传代，重新加入新鲜培养基，置于培养箱中继续培养。

细胞冻存

• FU97细胞生长状态良好时（对数生长期），可进行冻存。
  

• 收集细胞，1200 rpm离心5分钟。

• 弃去上清，加入冻存液（90% FBS+10% DMSO），混匀FU97细胞。

• 4℃放置10分钟。
  

• -20℃放置1小时。

• -80℃保存24小时后转移至液氮长期储存。

• 按照1×10⁶~5×10⁶个细胞/mL的浓度分装至冻存管。

• 逐步降温

注意事项

• 操作时保持无菌，避免FU97细胞污染。

• 胰酶消化时间不宜过长，以免损伤FU97细胞。

• 冻存液需现配现用，确保FU97细胞存活率。

• 定期监测FU97细胞状态，确保细胞形态及增殖能力正常。