
HGC-27-Luc(未分化人胃癌细胞株荧光素酶标记) 推荐
- 来源:胃,淋巴结转移
- 细胞特征:贴壁细胞,肿瘤细胞
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:人未分化胃癌细胞,带Luciferase(荧光素酶)基因稳定表达
HGC-27-Luc细胞是在HGC-27细胞系的基础上构建。HGC-27细胞分离自一位未分化型胃癌患者的淋巴结转移灶,能分泌黏液素,具备典型的胃癌生物学特征。HGC-27-Luc细胞是利用慢病毒载体将萤火虫荧光素酶(Luciferase)基因导入HGC-27细胞,并经过稳定筛选,实现持续表达荧光信号。HGC-27-Luc细胞不仅保留了原始细胞的形态学与肿瘤学特性,还具备光学成像功能,能够在体内外实验中用于实时追踪肿瘤的发生与发展。HGC-27-Luc细胞携带Luc基因。
HGC-27-Luc细胞特性特征
hgc-27-luc细胞能够分泌黏液素,体现胃癌的分泌特性。
hgc-27-luc携带慢病毒转染的Luciferase(Luc)基因,能稳定表达荧光素酶,用于体内外肿瘤成像。
P53基因表达阴性,hgc-27-luc细胞缺失P53蛋白的正常表达功能。
高表达某些癌症相关蛋白,如SPHK1(鞘氨醇激酶1),其在胃癌细胞中与肿瘤的迁移和侵袭能力相关。
hgc-27-luc能分泌黏液素,这是一种胃癌细胞常见的分泌分子,反映肿瘤黏液特性。
hgc-27-luc含有通过慢病毒载体稳定导入的Luc基因,便于进行活体光学影像分析。
癌症相关转录因子及信号通路相关分子在hgc-27-luc细胞中也得到研究,如NF-κB信号通路调控相关基因影响细胞迁移和侵袭
HGC-27-Luc细胞参数表
细胞名称 | HGC-27-Luc(未分化人胃癌细胞株荧光素酶标记) |
英文名称 | HGC-27/Luciferase (HGC-27-Luc) |
种属来源 | 人类 |
组织来源 | 胃癌患者淋巴结转移组织 |
细胞形态 | 上皮细胞样,贴壁生长 |
发育状态 | 未分化胃癌 |
荧光素酶表达 | 稳定携带Luciferase基因,用于活体肿瘤成像 |
P53表达状态 | 阴性 |
其他基因表达 | 高表达SPHK1等与迁移、侵袭相关分子 |
培养基 | DMEM + 10%胎牛血清 + 1%青链霉素 |
培养温度 | 37℃ |
培养气体环境 | 5% CO2,95%空气;湿度70%–80% |
传代比例 | 1:2 至 1:4(首次传代建议1:2) |
传代频率 | 每周传代2-3次 |
换液频率 | 每周2-3次 |
传代方法 | 胰蛋白酶消化(0.25%胰蛋白酶+0.53mM EDTA,1-2分钟) |
冻存条件 | 90%胎牛血清 + 10%DMSO,液氮中保存 |
抗药筛选 | 用嘌呤霉素1-5 μg/mL维持Luc表达,逐步筛选 |
支原体检测 | 阴性 |
STR鉴定 | 通过,与ATCC、DSMZ等细胞库匹配 |
主要用途 | 体内外实时肿瘤成像,胃癌机制研究,药物筛选,基因功能分析 |
适用模型 | 动物裸鼠肿瘤模型 |
运输处理 | 运输用培养基不用于正常培养,复苏需新配培养基 |
细胞维护 | 收到细胞后建议传代3代后检测Luc荧光强度及筛选维持表达 |
培养教程
HGC-27-Luc人胃癌细胞株培养教程
细胞复苏
从液氮罐中取出hgc-27-luc细胞冻存管,立即置于37℃水浴中轻轻摇晃,约1–2分钟直至冰晶完全融化。
将细胞悬液转移至含10 mL预热完全培养基(DMEM + 10% FBS + 1%青链霉素)的离心管中。
1000 rpm(约300 g)离心5分钟,弃去上清以去除DMSO。
将hgc-27-luc细胞轻轻重悬于5–10 mL新鲜完全培养基中。
转移至25 cm²培养瓶,置于37℃、5% CO₂培养箱中培养。
24小时后更换培养基,去除死亡细胞;待细胞贴壁及状态稳定后进入常规传代。
细胞传代
吸去旧培养液,用PBS轻轻冲洗hgc-27-luc细胞1–2次,去除残留血清。
加入0.25%胰酶-EDTA(含0.53 mM EDTA)约1–2 mL,置37℃孵育1–2分钟,直至细胞边缘变圆、开始脱落。
轻轻吹打使细胞完全悬浮。
加入2–3倍体积完全培养基终止消化。
按1:2–1:4比例分瓶接种至新培养瓶,补充适量完全培养基。
将hgc-27-luc细胞放入培养箱继续培养,每48–72小时换液一次。
细胞冻存
在对数生长期、状态良好时收集hgc-27-luc细胞。
胰酶消化并离心,弃去培养基。
配制冻存液:90% FBS + 10% DMSO。
将hgc-27-luc细胞重悬后调整密度至1×10⁶–5×10⁶ cells/mL。
分装至冻存管,每管约1 mL。
使用程序降温盒(约-1℃/min),先于-80℃保存12–24小时,再转入液氮长期保存。
注意事项
hgc-27-luc细胞在冻存和复苏过程中应快速操作,减少DMSO毒性。
复苏后应及时更换培养基,促进细胞恢复。
传代时避免过度胰酶消化,以免损伤细胞。
保持无菌操作,防止细菌、真菌或支原体污染。
hgc-27-luc细胞携带Luc基因,随传代次数增加荧光信号可能减弱,应使用嘌呤霉素筛选以维持稳定表达
相关资料
- 构建MKN-28稳转细胞株的方法与应用
- MKN-28稳转细胞株是一种持续稳定表达特定基因或干扰特定基因表达的细胞系。这种细胞系的构...
- MKN-45与MKN-28细胞的区别与特点
- MKN-45和MKN-28是两种常用的人胃癌细胞系,它们在研究中具有重要的应用价值。然而,...
- 查看完整内容 >
STR鉴定及相关
参考文献
- 强力霉素对胃癌细胞BGC-823增殖及侵袭能力影响的研究 《辽宁医学院》 2014年
- 摘要:目的 研究强力霉素对胃癌细胞BGC-823细胞的增殖及侵袭能力的影响,探讨强力霉素通过No...
- 胃癌放射抗拒细胞株BGC823/IR的建立 《蚌埠医学院》 2017年
- 摘要:目的:本项研究通过X射线反复照射胃癌BGC823细胞,筛选出在高能X线电离辐射过程中产生放...
- 热疗对人胃癌细胞MKN28的细胞周期及节律基因Bmall影响的实验研究 中华物理医学与康复杂志 > 2012年1期
- 摘要:目的 研究加热对胃癌MKN28细胞周期变化是否与节律基因Bmall表达相关,为胃癌择时热疗...
- BGC-823胃癌细胞株裸小鼠成瘤模型的建立 《局解手术学杂志》 2011年04期
- 摘要:目的建立BGC-823胃癌细胞株的裸鼠成瘤模型,为胃癌研究提供参考载体。方法体外培养BGC...
- BGC-823胃癌细胞株裸小鼠成瘤模型的建立 《局解手术学杂志》 2011年04期
- 摘要:目的建立BGC823胃癌细胞株的裸鼠成瘤模型,为胃癌研究提供参考载体
- 查看完整内容 >
上一篇:TMK-1细胞(人胃癌细胞)
下一篇:没有了