
SNU-5细胞(人胃癌细胞) (暂不提供)
- 来源:转移部位、腹水
- 细胞特征:悬浮细胞 ,悬浮液,多细胞聚集体
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:表达癌胚抗原(CEA)和肿瘤相关抗原TAG-72,同时对左旋多巴脱羧酶(DDC)呈阳性反应,但对胃泌素受体呈阴性
SNU-5细胞系来源于一名33岁的亚洲女性患者,该患者被诊断为低分化胃癌,于1987年从患者的腹水样本中分离建立。患者在接受化疗治疗后,包括使用了5-氟尿嘧啶、阿霉素以及丝裂霉素C等药物,细胞仍表现出较强的生长能力。SNU-5细胞具备典型的亚四倍体染色体数,其模态染色体范围在87到88之间,并且在大多数细胞中检测到了18条以上的标记染色体。常见的异常染色体包括1号、7号、6号等多个结构重排标记,是研究胃癌的分子机制提供了重要模型。
SNU-5细胞特性特征
癌症基因:表达c-myc和erb-B2基因,但不表达N-myc、L-myc和EGF受体基因。
抗原表达:SNU-5细胞表面表达癌胚抗原(CEA)和肿瘤相关抗原TAG-72。抗原表达:O型血;Rh+
酶活性:SNU-5细胞对左旋多巴脱羧酶(DDC)呈阳性反应,但胃泌素受体呈阴性。
表达标记:乙酰胆碱,毒蕈碱,表达;血管活性肠肽(VIP),表达;血管活性肠肽;毒蕈碱乙酰胆碱
致瘤性:SNU-5细胞在半固体培养基中的集落形成效率为27%,显示出其致瘤潜力。
转移特性:SNU-5细胞具备较强的转移能力,常用于无胸腺裸鼠模型中进行腹膜腔转移的研究。
SNU-5细胞广泛应用于胃癌的基础研究、药物筛选以及病理机制研究,尤其是在探索新型抗癌药物及其作用机制方面
SNU-5细胞参数表
细胞名称 | SNU-5细胞(人胃癌细胞) |
别称 | SNU5; NCI-SNU-5 |
细胞系编号 | ATCC CRL-5973 |
组织来源 | 胃;转移部位:腹水 |
疾病特征 | 低分化胃癌 |
细胞形态 | 上皮样 |
生长特性 | 悬浮细胞 |
倍性 | 次四倍体(模态染色体数:87-88) |
表面标志 | 癌胚抗原(CEA)、TAG-72、左旋多巴脱羧酶(DDC) |
基因表达 | c-myc、erb-B2阳性;N-myc、L-myc、EGF受体阴性 |
无菌检测 | 细菌、真菌、支原体检测均为阴性 |
病原体检查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎检查均为阴性 |
致瘤性 | 在半固体培养基中的集落形成效率为27% |
培养基 | IMDM+10% FBS+1% P/S |
传代比例 | 1:2 - 1:4 |
传代周期 | 每36-48小时传代一次 |
换液频率 | 每2-3天更换培养基 |
培养温度 | 37℃ |
气相组成 | 95%空气 + 5%二氧化碳 |
冻存液组成 | 60%基础培养基 + 30% 胎牛血清 + 10% DMSO |
保存条件 | 液氮储存 |
运输方式 | 冻存或干冰运输 |
安全性说明 | 所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在生物危害性,需在二级生物安全台内操作。 |
培养教程
SNU-5人胃癌细胞培养教程
收到SNU-5细胞后的初步处理
检查SNU5细胞状态:收到SNU5细胞后,首先检查细胞运输瓶的外观是否完好,确保没有破损、漏液或污染。如果培养液出现浑浊或其他异常现象,应立即联系供应商。
显微镜观察:使用显微镜观察SNU5细胞生长状态。打开运输瓶的封口膜后,将T25培养瓶放置在37℃培养箱中静置2-3小时,使SNU5细胞逐步适应环境。
SNU5细胞复苏
解冻SNU5细胞:将冻存管从液氮中取出,立即置于37℃水浴中快速解冻,解冻过程中轻轻摇动冻存管,确保SNU5细胞均匀解冻。此过程应尽可能快,以防细胞受损。
离心:将解冻后的1 mL SNU5细胞悬液转移至含有4 mL预热的培养基的离心管中,在1000 RPM下离心4分钟,去除上清液。
SNU5细胞重悬:弃去上清后,加入1-2 mL新鲜的培养基并轻轻吹打,使SNU5细胞均匀分布。
培养SNU5细胞:将细胞悬液转移到预先铺有8 mL培养基的T25培养瓶或10 cm培养皿中,静置过夜以便SNU5细胞适应并贴壁。
SNU5细胞传代
传代条件:当SNU5细胞生长密度达到80%-90%时应进行传代,以避免细胞过度密集影响生长。
细胞洗涤:弃去培养基,用不含钙镁的PBS洗涤SNU5细胞1-2次,去除代谢废物和残留培养液。
细胞消化:加入1 mL 0.25%胰酶-EDTA消化液,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,观察SNU5细胞是否开始变圆并逐渐脱离瓶壁。
终止消化:当SNU5细胞大部分脱落后,加入适量培养基终止消化,轻轻敲打瓶壁确保细胞完全脱离。
离心与重悬:将SNU5细胞悬液离心,1000 RPM下离心4分钟,弃去上清液后重新悬浮在1-2 mL培养基中。
SNU5细胞分配:将重悬的SNU5细胞按照1:2的比例转移至新的培养瓶或培养皿中,加入8 mL培养基,继续培养。
SNU5细胞冻存
SNU5细胞收集与计数:SNU5细胞达到合适的密度时,弃去培养基,用PBS清洗细胞一次,加入胰酶消化SNU5细胞,待细胞变圆脱落后加入培养基终止消化。
离心:在1000 RPM下离心4分钟,弃去上清液。
SNU5细胞重悬与冻存液准备:将SNU5细胞重新悬浮于含10% DMSO和90%胎牛血清的冻存液中,确保每支冻存管中SNU5细胞密度至少为1 x 10^6/mL,每支冻存管分装1 mL细胞悬液,标注好相关信息。
冷冻步骤:将SNU5细胞冻存管放入程序降温盒中,置于-80℃冰箱2小时后,再转入液氮罐中长期保存。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12 |
D2S1338 | 17 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 10 |
D7S820 | 8,12 |
D8S1179 | 14,15 |
D13S317 | 8 (KCLB=00005) |
8,9 (ATCC=CRL-5973; Cosmic-CLP=908445; PubMed=25877200) | |
D16S539 | 13 |
D18S51 | 13 |
D19S433 | 13.2,15 |
D21S11 | 29 |
FGA | 21 |
Penta D | 9,13 |
Penta E | 18,19 |
TH01 | 9 |
TPOX | 11 |
vWA | 15,16 |
参考文献
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