
OVCAR5细胞(人转移性胃肠癌细胞)
- 来源:癌症患者的腹水
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:基因表达:OVCAR-5细胞表达多种与癌症相关的基因,包括HER2、CA-125等
OVCAR5细胞系是1980年代由美国国立癌症研究所(NCI)从一名67岁未经治疗的晚期卵巢癌患者的腹水中建立。OVCAR5细胞在癌症研究和药物开发领域中广泛使用。尽管OVCAR5细胞最初被认为是源自卵巢癌,近年来的研究表明其可能来源于胃肠道组织,而非卵巢。OVCAR5细胞不仅在癌症的侵袭性生长研究中表现突出,还为探索胃肠道癌的生物学特性提供了重要的工具。
OVCAR5细胞特性特征
基因突变:OVCAR-5细胞在KRAS基因中存在纯合的Gly12Val突变,突显了其较强的迁移和侵袭能力。
生物标志物:OVCAR5细胞过度表达claudin-4,这是一种与癌症恶性程度相关的重要标记物,参与细胞间的粘附和屏障功能。
细胞增殖:OVCAR-5细胞在适宜的培养条件下(如RPMI-1640培养基、10%胎牛血清)能够快速增殖,适合用于体外实验和药物筛选。
侵袭性:OVCAR5细胞表现出高侵袭性,适合用于研究转移机制及治疗耐药性
OVCAR5细胞参数表
细胞名称 | OVCAR5细胞(人转移性胃肠癌细胞) |
别称 | OVCAR 5; NIH:OVCAR-5; OVCAR.5; OVCAR5; Ovcar5; OVCA5 |
种属来源 | 人(Homo sapiens) |
组织来源 | 腹水(来源于未经治疗的晚期卵巢癌患者) |
疾病类型 | 高级别卵巢浆液性腺癌 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞密度 | >1×10⁶ cells |
培养基 | RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 + 1% 双抗 |
培养条件 | 温度:37℃;气相:95%空气,5%二氧化碳;湿度:70%-80% |
传代方法 | 1:2至1:6,每周2次 |
冻存条件 | 90% 完全培养基 + 10% DMSO,液氮储存 |
支原体检测 | 阴性 |
基因特征 | KRAS基因纯合Gly12Val突变 |
生物标志物 | 过度表达claudin-4 |
致瘤性 | 在裸鼠实验中表现出致瘤性 |
用途 | 癌症研究、药物开发、转移机制研究 |
运输条件 | 常温运输(T25瓶),干冰运输(冻存管) |
培养教程
OVCAR5人转移性胃肠癌细胞培养教程
OVCAR5细胞培养步骤
从液氮中取出冻存的OVCAR5细胞,立即在37℃水浴中解冻,约1-2分钟,期间轻轻摇动冻存管。
解冻后迅速将OVCAR5细胞转移到含有RPMI-1640和10%胎牛血清的培养基中,以减少DMSO的毒性影响。
以1000 rpm离心5分钟,去除上清液。
加入新鲜的RPMI-1640培养基重悬OVCAR5细胞,确保细胞均匀分布。
将重悬的OVCAR5细胞按1×10⁶ cells/mL的密度接种到T25或T75培养瓶中。
将培养瓶放入37℃培养箱中孵育,确保OVCAR5细胞的正常生长。
每日通过显微镜观察OVCAR5细胞生长状态,检查是否有细菌或真菌污染。
每3-4天更换一次培养基,调整传代比例为1:2到1:6,确保OVCAR5细胞在最佳状态下继续增殖。
细胞传代
当OVCAR5细胞的汇合度达到70%-80%时,进行传代。
使用无钙镁PBS清洗OVCAR5细胞后,加入0.25%胰蛋白酶消化细胞2-3分钟。
当观察到OVCAR5细胞开始脱落时,加入含有FBS的培养基中和胰蛋白酶,轻轻吹打细胞以确保完全脱离。
通过离心去除胰蛋白酶后,将OVCAR5细胞重悬于新鲜培养基中,并接种到新的培养瓶中。
细胞冻存
在OVCAR5细胞处于对数生长期时,收集细胞并用90%胎牛血清+10% DMSO的冻存液重悬。
将OVCAR5细胞分装到冻存管中,先在-80℃冰箱中预冷24小时,随后转移至液氮中长期保存。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10 |
D2S1338 | 17,23 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 11,13 (Cosmic-CLP=905969; PubMed=19372543; PubMed=25877200; PubMed=30485824) |
12,13 (Millipore=SCC259) | |
D7S820 | 10 |
D8S1179 | 13,14 |
D13S317 | 10,13 |
D16S539 | 11 |
D18S51 | 12 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 31 |
FGA | 23 |
Penta D | 12 |
Penta E | 9,16 (PubMed=25877200) |
9,16,17 (Millipore=SCC259) | |
TH01 | 7,9.3 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 16 |
参考文献
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