capan-1细胞（人胰腺癌细胞系）

Capan-1细胞系是源自40岁白人男性胰腺癌患者的一种上皮形态的细胞系。

capan-1细胞系表达多种特征性抗原，包括血型A、Rh+和HLA A2、A9、B13、B17，并且表达囊性纤维化跨膜电导调节因子（CFTR）以及能够分泌胃型粘蛋白。
Capan-1细胞以其高增殖率、稳定的传代能力以及肿瘤特异性而著称，适合转染宿主细胞。

Capan-1细胞系需要在培养皿底部贴附生长，形成单层上皮细胞形态。

Capan-1细胞特性

• 40岁白人男性患者的胰腺癌中分离出来，也有从肝转移中分离的例子。

• 具有上皮形态，需要贴附在培养皿底部生长，如果capan-1细胞变得太重，就会从生长表面脱落。

• 抗原表达：血型A；Rh+；HLA A2、A9、B13、B17

• 基因表达：粘蛋白；血型A；Rh+；HLA：（A2；A9；B13；B17）

• 表达式标记：孕酮受体，阳性；雌激素受体，α，阳性

• 同工酶：AK-1，1；ES-D，1；；G6PD，B；GLO-I，1-2；Me-2，1；PGM1, 1-2；PGM3，1

• Capan-1细胞表达囊性纤维化跨膜电导调节因子（CFTR）并分泌胃型粘蛋白。

Capan-1细胞参数表

capan-1人胰腺癌细胞系培养

复苏Capan-1细胞

• 将含有1 mL Capan-1细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加4 mL培养基混合均匀。

• 在1000 rpm条件下离心3分钟，弃去上清液，加1-2 mL培养基后吹匀。

• 将所有Capan-1细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜（或将Capan-1细胞悬液加入10 cm皿中，加入约8 mL培养基，培养过夜）。

• 第二天换液并检查细胞密度。

Capan-1细胞传代

• 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗Capan-1细胞1-2次。

• 加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53 mM EDTA）于培养瓶中，使消化液浸润所有Capan-1细胞，弃去消化液，将培养瓶置于37℃培养箱中消化1分钟，然后在显微镜下观察Capan-1细胞消化情况。若Capan-1细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

• 按6-8 mL/瓶补加培养基，轻轻打匀后装入无菌离心管中，1000 rpm离心4分钟，弃去上清液，补加1-2 mL培养液后吹匀。

• 将Capan-1细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中，置于培养箱中培养。

• 当Capan-1细胞密度达80%-90%时，进行传代培养。

Capan-1细胞冻存

• 收集Capan-1细胞及细胞培养液，装入无菌离心管中，1000 rpm条件下离心4分钟，弃去上清液，用PBS清洗一遍，弃尽PBS，进行Capan-1细胞计数。

• 根据Capan-1细胞数量加入无血清细胞冻存液，使Capan-1细胞密度达到5×10^6~1×10^7/mL，轻轻混匀，每支冻存管冻存1 mL Capan-1细胞悬液，注意冻存管做好标识。

• 将冻存管放入-80℃冰箱，24小时后转入液氮罐储存，记录冻存管位置以便下次拿取。

• 待Capan-1细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。

注意事项

• 传代处理后24-48小时内尽量不要移动培养瓶，Capan-1细胞易聚团成斑块状生长，生长非常缓慢。

• Capan-1细胞复苏和冻存过程中要确保操作迅速，以免Capan-1细胞受损。