
Panc02细胞(小鼠胰腺癌细胞)
- 来源:胰腺导管腺癌
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:Pan02细胞系表达与胰腺癌相关的多种基因
Panc02小鼠胰腺癌细胞系由Corbett等人通过在C57BL/6小鼠胰腺内植入携带3-甲基胆蒽的棉线,诱导导管腺癌形成,并通过连续皮下移植建立。作为来源于小鼠胰腺导管腺癌的细胞系,Pan02细胞呈上皮样形态,具有贴壁生长特性,广泛应用于胰腺癌的生物学研究、药物筛选及肿瘤微环境模拟等领域。
Panc02细胞(小鼠胰腺癌细胞)参数表
细胞名称 | Panc02细胞(小鼠胰腺癌细胞) |
别称 | Panc-02; Panc 02; Pan02; PAN 02; Panc02-H0 |
种属 | 小鼠(Mus musculus) |
组织来源 | 胰腺(胰腺导管腺癌) |
性别 | 雄性 |
细胞形态 | 上皮样,多角形 |
生长特性 | 贴壁生长 |
细胞类型 | 胰腺癌细胞 |
细胞代数 | 通常在10代以内 |
培养基 | 95% DMEM(高糖) + 5%胎牛血清(FBS) + 1%青霉素/链霉素(PS) |
培养条件 | 温度:37℃;气相:95%空气,5%二氧化碳 |
换液周期 | 每2-3天更换培养基 |
传代比例 | 1:2至1:4(具体视细胞生长速度而定) |
传代密度 | 细胞密度达80%-90%时进行传代 |
培养瓶体积 | T25瓶10-12mL;10cm皿12-15mL |
冻存条件 | 使用无血清冻存液,储存于液氮中(-196℃) |
细菌检测 | 细菌、真菌、支原体检测均为阴性 |
病原体检测 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎检测均为阴性 |
复苏存活率 | 复苏后存活率>90% |
生物安全 | 所有肿瘤和病毒转染的细胞视为有潜在生物危害性,需在二级生物安全台内操作 |
研究用途 | 广泛应用于癌症研究、药物筛选、细胞信号通路研究、肿瘤微环境模拟等 |
使用限制 | 仅供科学研究,绝不可用于动物或人类疾病的治疗 |
培养教程
Panc02小鼠胰腺癌细胞培养教程
Panc02细胞复苏
将培养基(高糖DMEM + 5% 胎牛血清 + 1% 青霉素/链霉素)预热至37℃。
准备无菌的离心管和移液器,确保无菌操作环境,避免Panc02细胞污染。
从液氮中取出Panc02细胞冻存管,立即置于37℃水浴中轻轻摇动,直至Panc02细胞完全解冻(约1-2分钟),解冻后迅速取出,避免Panc02细胞暴露在水浴中超过5分钟。
将解冻后的Panc02细胞转移至15 mL离心管中,加入9 mL预热的培养基,轻轻混匀。
以1000 rpm离心5分钟,弃去上清液,保留Panc02细胞沉淀。
在5 mL培养基中轻轻重悬Panc02细胞,将其转移至T25培养瓶中,并补足培养基至10-12 mL。
将培养瓶置于37℃、5% CO₂培养箱中培养,观察Panc02细胞状态并定期更换培养基。
Panc02细胞培养
培养条件:温度37℃,5% CO₂浓度。
换液周期:每2-3天更换Panc02细胞的培养基。
Panc02细胞传代操作
当Panc02细胞汇合度达到80%-90%时,准备进行传代。
吸弃旧培养基,用3-4 mL PBS轻轻洗涤Panc02细胞,之后弃去PBS。
加入1 mL胰酶,均匀覆盖Panc02细胞后,将培养瓶置于37℃培养箱中消化2-5分钟。
观察Panc02细胞开始脱落但未完全分离时,加入2-3 mL培养基终止消化,轻轻混匀Panc02细胞。
以900 rpm离心3-5分钟,弃去上清,重悬Panc02细胞于新培养基中。
将重悬后的Panc02细胞分至新的培养瓶中,补足培养基,放回培养箱中继续培养。
Panc02细胞冻存
准备冻存液:使用含10% DMSO的冻存液(如FBS + 10% DMSO)。
将Panc02细胞重悬于冻存液中,通常每1 mL冻存液中含有约1×10^6个Panc02细胞。
将Panc02细胞分装至1.2 mL冻存管中。
将冻存管置于-80℃冷冻24小时后,转移至液氮中长期保存Panc02细胞。
Panc02细胞培养的注意事项
无菌操作:在无菌操作台内进行所有Panc02细胞操作,使用无菌的培养基、移液枪头和离心管。操作时要保持手部和工作环境清洁,缩短Panc02细胞培养瓶暴露时间以防止污染。
胰酶消化:胰酶消化时间需严格控制,避免Panc02细胞过度消化,影响Panc02细胞状态。
培养基冻融后变化:冻融后的培养基可能会出现少量絮状物析出,但不影响正常使用。培养基的pH值可能会有轻微变化,但仍在可接受范围内,不会显著影响Panc02细胞培养效果。
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参考文献
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