
PaTu 8988t人胰腺癌细胞
- 来源:胰腺
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:DMEM+5% FBS+5% HS+1% P/S
- 其他:遗传特征:微卫星稳定型(MSS), KRAS和TP53基因突变
PaTu 8988t细胞系是由1985年从一名64岁女性患者的胰腺癌肝转移病灶中建立。PaTu 8988t细胞系与PaTu 8988S同样起源于该患者,属于胰腺癌细胞系。
PaTu 8988t人胰腺癌细胞特性特征
微卫星稳定性:PaTu 8988t细胞系属于微卫星稳定型(MSS)。
基因突变:KRAS基因:存在突变;TP53基因:存在突变
基因表达特征:表达上皮细胞标志物,如E-cadherin;表达胰腺癌相关标志物,如CA19-9和CEA
信号通路激活:MAPK信号通路激活,与KRAS突变相关;PI3K/AKT信号通路可能被激活,促进细胞生存和增殖
代谢特征:可能表现出Warburg效应,即即使在有氧条件下也倾向于进行糖酵解
药物敏感性:对某些化疗药物如吉西他滨可能表现出一定的敏感性;可能对EGFR抑制剂有抗性,这与KRAS突变状态相关
PaTu 8988t人胰腺癌细胞参数表
细胞名称 | PaTu 8988t人胰腺癌细胞 |
细胞别称 | PaTu 8988t (PA-TU-8988T, PaTu8988t, PaTu8988T, PATU8988T, PaTu 8988 T, PaTu-8988t, PATU-8988T, PATU-T, PA-TU T, 8988T, PaCL4) |
患者信息 | 人源, 64岁, 女性 |
组织来源 | 胰腺癌的肝转移瘤 |
生长特性/形态 | 贴壁生长, 上皮细胞样 |
保藏信息 | DSMZ; ACC-162 |
培养基/血清 | DMEM(高糖)+ 5%胎牛血清 + 5%马血清+2mM L-谷氨酰胺 + 1% 青霉素-链霉素 |
培养条件 | 37℃,5% CO2,湿度70-80% |
传代信息 | 密度80%-90%, 比例1:2至1:3, 每周2-3次 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA溶液 |
细胞规格/冻存 | 1x10^6 cells/T25或1mL冻存管, 无血清冻存液, 液氮储存 |
质控检测 | 支原体阴性, STR鉴定通过 |
遗传特征 | 微卫星稳定型(MSS), KRAS和TP53基因突变 |
表达标志物 | E-cadherin, CA19-9, CEA |
活化通路 | MAPK, PI3K/AKT |
药物敏感性 | 吉西他滨敏感, EGFR抑制剂可能有抗性 |
生长特性 | 倍增时间22-30小时, 建议使用10代以内 |
培养教程
PaTu 8988t人胰腺癌细胞培养教程
PaTu 8988t细胞接收与初步处理
收到PaTu 8988t细胞后,检查细胞瓶是否完好,确认培养液是否存在漏液或浑浊现象。如有异常,请及时联系供应商。
使用显微镜观察PaTu 8988t细胞的生长状态。去除封口膜,将T25培养瓶放入37℃培养箱中稳定细胞2-4小时。
弃去T25瓶中的运输培养基,加入6 mL完全培养基(DMEM,含5%胎牛血清、5%马血清、2 mM L-谷氨酰胺和1%青霉素-链霉素)。
第二天,检查PaTu 8988t细胞的密度和污染情况。如发现异常,及时联系供应商。
PaTu 8988t细胞复苏
在37℃水浴中快速解冻含有1 mL PaTu 8988t细胞悬液的冻存管。
将细胞悬液转入4 mL培养基中混合均匀,1000 rpm离心4分钟,弃去上清液后补加1-2 mL培养基并轻轻吹打。
将PaTu 8988t细胞悬液加入培养瓶中过夜培养,或转移至10 cm培养皿,加入约8 mL培养基,进行过夜培养
第二天换液,并检查PaTu 8988t细胞的密度和生长情况。
PaTu 8988t细胞传代
当PaTu 8988t细胞密度达到80%-90%时进行传代。
推荐的传代比例为1:2,即将一个T25瓶的PaTu 8988t细胞分至两个T25瓶或两个6 cm培养皿。
弃去培养上清液,用不含钙、镁离子的PBS润洗PaTu 8988t细胞1-2次。
加入1 mL消化液(0.25%胰蛋白酶-0.53 mM EDTA),确保消化液覆盖所有细胞。弃去消化液,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2分钟。
在显微镜下观察PaTu 8988t细胞的消化情况。若细胞大部分变圆并脱落,立即终止消化,轻敲培养瓶后加入少量培养基。
补加6-8 mL培养基至离心管中,轻轻混匀后,以1000 rpm离心4分钟,弃去上清液,补加1-2 mL培养基并吹打均匀。
将PaTu 8988t细胞悬液按1:2比例分装至新培养皿或培养瓶中,并加入8 mL培养基。
PaTu 8988t细胞冻存
当PaTu 8988t细胞生长状态良好时,进行冻存操作。
按照传代步骤处理PaTu 8988t细胞。
离心后弃去上清液,加入冻存液(10% DMSO + 90%胎牛血清),以1x10^6 cells/mL的浓度分装至冻存管。
逐步降温至-80°C(降温速度为每分钟1°C),然后转移至液氮中长期保存。
确保冻存管上标记清晰,包括PaTu 8988t细胞的名称、日期和代次等信息。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,13 |
D2S1338 | 23 |
D3S1358 | 15,17 |
D5S818 | 11,13 |
D7S820 | 7,8 |
D8S1179 | 13,16 |
D13S317 | 12,13 |
D16S539 | 11,12 |
D18S51 | 12 |
D19S433 | 14,15 |
D21S11 | 26 |
FGA | 23 |
Penta D | 8 |
Penta E | 14 |
TH01 | 6 |
TPOX | 8,11 |
vWA | 16 |
参考文献
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