
原代小鼠尿道上皮细胞
- 来源:尿道组织
- 细胞特征:贴壁, 上皮细胞样
- 培养基:原代上皮细胞专用培养基
- 其他:高可塑性;具有多种功能特殊类型
原代小鼠尿道上皮细胞是从小鼠尿道管组织中分离。
尿道作为连接膀胱和体外的通道,在维持泌尿系统功能和保护机制中扮演着关键角色。
小鼠尿道上皮细胞也表达着雌激素和生长因子受体,这在细胞的生长、修复和免疫应答中发挥着重要作用。小鼠尿道上皮细胞能够释放多种细胞因子和免疫系统介质,参与调节局部免疫反应和细胞间通讯。
小鼠尿道上皮细胞特征
小鼠尿道上皮细胞源自尿道管组织,尿道是连接膀胱和体外的管道。
尿道上皮细胞具有多种功能,主要包括:
构成膀胱的防御系统,防止病原体粘附,保持尿液的不渗透性。
表达雌激素α、β受体、上皮生长因子受体和纤维母细胞生长因子受体,在损伤和感染时发挥重要作用。
能够释放多种细胞因子和免疫系统介质。
小鼠尿道上皮细胞参数表
细胞类型 | 小鼠尿道上皮细胞(原代细胞) |
组织来源 | 尿道管组织 |
分离方法 | 胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法 |
细胞总量 | 约5×10⁵ cells/瓶 |
细胞特性 | 高可塑性;具有多种功能特殊类型 |
功能 | 构成膀胱防御系统,防止病原体粘附; 表达雌激素和生长因子受体,参与细胞生长、修复和免疫应答; 释放多种细胞因子和免疫系统介质 |
质量检测 | PCK免疫荧光鉴定,纯度≥90%,无HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等 |
包被条件 | 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) |
培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
换液频率 | 每2-3天换液一次 |
生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
传代特性 | 可传1-2代 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
培养条件 | 气相:空气95%,CO2 5% |
培养教程
小鼠尿道上皮细胞分离与处理
从无菌条件下取出小鼠尿道组织,切割成约1mm³大小的组织块。
用PBS清洗组织块,使其干净。
将组织块加入含有酶消化液(0.1% 胰蛋白酶和0.1% 胶原酶)的培养皿中,混悬10秒,然后在37℃条件下消化10分钟。
使用滴管吹打制成单细胞悬液,沉淀并收集上清,用含有10% FBS的培养基终止消化后置于4℃。
重复消化步骤,直至组织完全被消化。
用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,离心后弃去上清,沉淀的细胞用含有10% FBS的培养基混悬。
将细胞接种于25cm²培养瓶中,放置于37℃、5% CO2培养箱中培养,贴壁培养1小时后,吸出培养基,按需接种于6孔板中继续培养。
小鼠尿道上皮细胞细胞处理
当细胞生长至适当密度时,吸出培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10分钟。
使用适量的胶原酶消化液进行细胞消化处理,具体时间和浓度根据实验需求进行调整。
对细胞进行PBS冲洗2次,每次10分钟。
选择适当的固定液(例如4%多聚甲醛)在适当条件下固定细胞。
进行适当的透膜处理、封闭和抗体孵育等步骤,具体条件和时间根据实验需要确定。
最后,用PBS冲洗细胞3次,每次10分钟,观察并拍摄细胞图像。
相关资料
STR鉴定及相关
参考文献
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