
原代大鼠尿道上皮细胞
- 来源:尿道组织
- 细胞特征:贴壁 , 上皮细胞样
- 培养基:原代细胞专用培养基
- 其他:表达雌激素α、β受体、上皮生长因子受体(EGFR)以及纤维母细胞生长因子受体(FGFR),在损伤和感染时,这些受体对膀胱上皮细胞起着重要作用
原代大鼠尿道上皮细胞(Rat Urethral Epithelial Cells, RUECs)来源于大鼠尿道的粘膜层,主要通过胰蛋白酶和胶原酶混合消化法结合差速贴壁法进行分离,以获得高活性和纯度的细胞。细胞形态通常为多边形或立方形,大鼠尿道上皮细胞间连接紧密,排列整齐,形成物理屏障。大鼠尿道上皮细胞不仅具有较强的增殖能力,还可在特定条件下分化为不同类型的上皮细胞以适应生理需求,是研究泌尿系统的免疫机制、病理过程以及细胞在感染和损伤中的反应提供了重要的体外模型,为泌尿系统相关疾病的治疗研究提供了潜在的基础。
原代大鼠尿道上皮细胞特性特征
分化潜能:在特定条件下,大鼠尿道上皮细胞可以分化为不同类型的上皮细胞,以适应不同的生理需求。
受体表达:大鼠尿道上皮细胞表达雌激素α和β受体、上皮生长因子受体(EGFR)以及纤维母细胞生长因子受体(FGFR),这些受体在损伤和感染时对细胞的功能和反应起着重要作用。
细胞因子释放:大鼠尿道上皮细胞能够释放多种细胞因子和免疫介质,如抗菌物质,以参与免疫防御机制,抵御外界病原体的侵入。
基因表达:大鼠尿道上皮细胞中可能涉及多种与上皮功能相关的基因表达,例如与粘附、增殖、分化及免疫反应相关的基因。
免疫荧光鉴定:通过PCK(广谱角蛋白)免疫荧光染色对这些细胞进行鉴定,确保其纯度大于90%,表明其为上皮来源的细胞
原代大鼠尿道上皮细胞参数表
细胞名称 | 原代大鼠尿道上皮细胞(Rat Urethral Epithelial Cells, RUECs) |
英文名称 | Rat urethral epithelial cells |
简称 | RUthEpiC |
种属来源 | 大鼠(Rattus norvegicus) |
组织来源 | 尿道 |
细胞简介 | 主要功能是形成保护屏障,防止有害物质和微生物侵入,参与免疫防御机制。具有高可塑性和多种功能。 |
细胞形态 | 上皮细胞样,呈扁平或立方形,具有清晰的细胞边界和细胞核 |
生长方式 | 贴壁 |
包被条件 | 鼠尾胶原Ⅰ (2-5 μg/cm²) |
传代特性 | 可传代2-3代 |
传代比例 | 1:02 |
消化液 | 0.25% 胰蛋白酶-EDTA |
培养基 | 上皮细胞专用培养基,含FBS、生长添加剂、青霉素和链霉素等 |
培养环境 | 37℃;5% CO₂;饱和湿度 |
换液频率 | 每2-3天更换一次 |
规格 | 5×10^5 cells/T25培养瓶 |
鉴定方法 | PCK免疫荧光鉴定,纯度大于90% |
质量检测 | 不含HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌等 |
储存温度 | 活细胞:37℃;冻存管:液氮罐 |
运输形式 | 活细胞:常温运输;冻存管:干冰运输 |
功能特点 | 分泌黏液以润滑尿道,参与免疫防御机制,抵御外界病原体的入侵。 |
细胞因子释放能力 | 能释放多种细胞因子和免疫介质,如IL-6、IL-8等,以参与局部免疫反应。 |
基因表达特征 | 表达雌激素受体(ERα、ERβ)、上皮生长因子受体(EGFR)和纤维母细胞生长因子受体(FGFR)。 |
形态学特征 | 在不同部位表现出不同类型的上皮,如移行上皮、复层柱状上皮和未角化的复层鳞状上皮。 |
信号转导途径 | 激活NF-kB、MAPK等信号通路以应对炎症和损伤反应。 |
代谢特征 | 能够进行糖酵解和氧化磷酸化,以支持其快速增殖和功能维持。 |
培养教程
原代大鼠尿道上皮细胞培养教程
大鼠尿道上皮细胞复苏
从冻存状态复苏大鼠尿道上皮细胞时,将冻存管从液氮罐中取出,立即放入37℃水浴中,轻轻摇动以加速复苏。待细胞完全融化后,迅速将其转移至含有预热培养基的离心管中。
以1000 rpm的速度离心5分钟,去除上清液,保留细胞沉淀。
将细胞沉淀重悬于适量的预热培养基中(通常为5-10 ml),轻轻混匀后,将重悬的细胞均匀接种到T25或T75培养瓶中。
将培养瓶置于37℃、5% CO₂培养箱中,静置24小时,确保细胞顺利附壁。
每2-3天更换一次新鲜的完全培养基。更换时,先使用PBS缓冲液清洗大鼠尿道上皮细胞表面,去除代谢废物和非附着细胞,然后加入新鲜培养基。
大鼠尿道上皮细胞传代
当大鼠尿道上皮细胞生长至80%-90%汇合时,进行传代操作。
先用PBS缓冲液清洗细胞表面,去除培养基。然后加入适量的0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,将其置于37℃培养箱中消化2-5分钟,观察细胞是否开始脱落。
加入新鲜培养基终止消化,并轻轻吹打使其完全分散。将分散的细胞转移至新的培养瓶中,加入适量的新培养基。
注意事项
无菌操作:在大鼠尿道上皮细胞的复苏、传代和培养过程中,应始终保持无菌操作环境,以防止细胞污染。
培养环境:大鼠尿道上皮细胞应在37℃、5% CO₂条件下培养,并维持饱和湿度。
监测大鼠尿道上皮细胞生长状态:定期观察细胞形态和生长状态,若发现异常如细胞脱落或形态改变,需及时检查培养条件或更换培养基。
冻存与保存:大鼠尿道上皮细胞冻存管应储存在液氮罐中,以保持细胞的长期活性。活细胞应保持在37℃、5% CO₂环境中。
相关资料
- 人子宫颈上皮细胞及培养介绍
- 人子宫颈上皮细胞是位于人体子宫颈内皮层的细胞,是子宫颈黏膜的主要构成成分。这些细胞在女性生...
- 永生化支气管上皮细胞
- 由于正常和患病原代支气管上皮细胞对数量有限、供体之间存在显著差异以及其有限的增殖能力,正常...
- Barrett永生化食管上皮细胞
- 原代Barrett食管上皮细胞在培养中的寿命有限,并且通常不含有可导致Barrett食管癌...
- 查看完整内容 >
STR鉴定及相关
参考文献
- LPS诱导大鼠肺泡上皮细胞RLE-6 TN内质网应激及凋亡研究 安徽医科大学学报 > 2016年12期
- 摘要:目的:利用脂多糖( LPS)刺激大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞株RLE-6TN建立内毒素性急性肺损伤...
- 纳米二氧化铈对大鼠肺泡巨噬NR8383细胞、大鼠肺泡上皮细胞RPAEpiC的作用研究
- 摘要:本实验以大鼠肺巨噬细胞NR8383、大鼠肺泡上皮细胞RPAEpiC为研究对象,对纳米氧化铈...
- 云锡矿粉离体诱导永生化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞RLE-6 TN细胞恶性转化 《中国职业医学》 2011年04期
- 摘要:目的建立本实验云锡矿粉(无氡)诱导永生化大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞RLE-6TN恶性转化模型,观...
- 大鼠肠上皮细胞系IEC-6的恶性转化研究 第三军医大学学报 > 2006年4期
- 摘要:目的建立N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N'-nitro-N-nit...
- 丁酸钠体外诱导大鼠肝卵圆细胞系WB-F344细胞分化为胆管上皮细胞 《第二军医大学学报》 2007年01期
- 摘要:目的:观察不同浓度丁酸钠对大鼠肝卵圆细胞系WB-F344细胞生长、分化的影响,探讨丁酸钠体...
- 查看完整内容 >
上一篇:大鼠原代肾小管上皮细胞
下一篇:原代大鼠输尿管上皮细胞