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HEP-2细胞(人喉表皮样癌细胞)货号:STM-CL-5398 规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

HEP-2细胞(人喉表皮样癌细胞) (暂不提供)

  • 来源:喉癌
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
  • 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
  • 其他:同功酶分析、HeLa标记染色体和DNA指纹分析发现,HEP-2细胞已被HeLa细胞所污染
价格:¥ 1,300.00
提供STR鉴定报告

HEP-2细胞(Human Epithelioma-2)最初被认为来源于一名30岁女性的喉部鳞状细胞癌,于1952年首次建立。然而,后续研究表明,HEp-2细胞的实际来源并非最初所认为的喉癌,而是由于HeLa细胞的污染所致。

1968年,遗传学家Stanley Gartler首次通过同工酶分析、HeLa标记染色体及DNA指纹分析,发现HEp-2细胞实际上是被HeLa细胞污染的。

尽管HEP-2细胞被确认为HeLa细胞污染的产物,它仍然被广泛用于研究,尤其是在病毒学和免疫学领域。HEP-2细胞偶尔会出现多倍体,具有几个标记染色体和频繁的分钟染色体,这些特征与HeLa细胞密切相关。

尽管污染问题已得到证实,但许多研究仍然将HEP-2细胞误认为是来源于喉部鳞状细胞癌,并在相关文献中继续引用这一错误。

HEP-2细胞特性特征

  • 细胞代数:通常在10代以内使用。

  • 染色体特征:HEP-2细胞的染色体数目通常在69到73之间,偶尔出现多倍体,且观察到多个标记染色体和频繁的微小染色体。

  • HeLa标记染色体:HEP-2细胞中包含一个M2拷贝、两个M3拷贝和一个M4拷贝,这些特征通过G-带模式得到确认。

  • 基因表达:HEP-2细胞在角蛋白免疫过氧化物酶染色中呈阳性,表明其表达角蛋白,显示出上皮细胞的特性。

  • 同功酶:HEP-2细胞表达G6PD和A同功酶。

  • HEP-2细胞对多种病毒具有易感性,包括:人腺病毒3、人脊髓灰质炎病毒1、水疱性口炎病毒

HEP-2细胞参数表

细胞名称HEP-2细胞(人喉表皮样癌细胞)
细胞别称Hep-2; HEP-2; Hep2(HeLaderivative); HEp-2/HeLa; Hep2; Hep2; HEp2; HEP2; H.Ep.-2;H.Ep.#2; H.Ep.No.2; HepII;HumanEpidermoidcarcinoma#2; HumanEpithelioma-2
物种组织人,喉部
细胞类型鳞状细胞癌
形态染色体上皮细胞样,69~73
污染情况被HeLa细胞污染
培养基MEM + 10% FBS + 双抗
培养条件37℃,5% CO2,95%空气
冻存条件无血清冻存液,液氮储存
冻存细胞率24小时贴壁率可达44.56% ± 2.73%
角蛋白同工酶免疫过氧化物酶阳性,G6PD, A
基因表达角蛋白
病毒易感性人腺病毒3,人脊髓灰质炎病毒1,水疱性口炎病毒
应用领域抗核抗体检测,病毒学研究
细胞结构核大,细胞结构清晰,便于结果观察及荧光染色核型分析


培养教程

HEP-2人喉表皮样癌细胞培养教程

细胞复苏

  • 从液氮罐中取出冻存的HEP-2细胞冻存管,迅速放入37℃的水浴中,轻轻摇晃直至HEP-2细胞完全融化。

  • 将融化后的HEP-2细胞悬液迅速转移至含有10%胎牛血清的DMEM培养基中,缓慢加入培养基以稀释DMSO。

  • 以1000rpm离心5分钟,弃去上清液,加入预温的完全培养基重悬HEP-2细胞。

  • 将HEP-2细胞悬液接种于T25培养瓶中,置于37℃、5% CO₂的培养箱中培养。

细胞传代

  • 当HEP-2细胞在培养瓶中生长至70-80%融合时,弃去培养基,用PBS缓慢洗涤HEP-2细胞2次。

  • 加入适量的0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,置于37℃培养箱中消化5-10分钟,直至HEP-2细胞变圆并轻松脱离瓶壁。

  • 加入含血清的培养基终止消化过程,将HEP-2细胞悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5分钟。

  • 弃去上清液,用预温的完全培养基重悬HEP-2细胞,并轻轻吹打均匀。

  • 按1:3的比例将HEP-2细胞悬液接种至新的培养瓶中,置于培养箱中继续培养。

细胞计数

  • 取0.5ml HEp-2细胞悬液,加入等量的0.4%台盼蓝染液,混匀。

  • 吸取染色后的HEP-2细胞悬液至血球计数板中,在显微镜下计数细胞数目。

  • 分别计算未染色的活HEP-2细胞数和染色的死细胞数。

  • 计算活细胞率:活HEP-2细胞数/总细胞数×100%。

细胞冻存

  • 收集对数生长期的HEP-2细胞,以1000rpm离心5分钟收集细胞。

  • 弃去上清液,加入预冷的冻存液(10% DMSO、20% FBS、70% DMEM)重悬HEP-2细胞,将细胞密度调整为1-2×10^6/ml。

  • 将重悬后的HEP-2细胞分装入冻存管中,置于-80℃冰箱中过夜冻存。

  • 次日,将冻存管转移至液氮罐中长期保存。

相关资料

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STR鉴定及相关

AmelogeninX
CSF1PO9,10
D2S133817
D3S135815,18
D5S81811,12
D7S8208,12
D8S117912,13
D13S31712 (RCB=RCB1889)
12,13.3 (AddexBio=C0050001/4983; ATCC=CCL-23; CCRID; CLS=300397; KCLB=10023; TKG=TKG 0403)
12,14 (PubMed=17254797)
D16S5399,10
D18S5115 (PubMed=17254797)
16 (ATCC=CCL-23; CCRID; CLS=300397; PubMed=11416159)
D19S43313,14
D21S1126,27 (PubMed=17254797)
27,28 (ATCC=CCL-23; CCRID; CLS=300397; PubMed=11416159)
FGA18,21
Penta D8,15
Penta E7,17
TH017
TPOX8,12
vWA16,18

参考文献

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