
ACT1细胞(人未分化甲状腺癌细胞)
- 来源:甲状腺癌
- 细胞特征:贴壁细胞 ,上皮细胞样生长的单层细胞
- 培养基:DMEM+10% FBS+1% P/S
- 其他:ACT-1细胞具有高度侵袭性,预后极差
ACT1细胞系起源于一例甲状腺未分化癌(Anaplastic Thyroid Carcinoma, ATC)患者的肿瘤组织,甲状腺间变性癌(NCIt:C3878),是通过酶消化法进行原代培养,并经过单细胞克隆筛选获得。ACT1细胞呈上皮样生长,常用于研究甲状腺未分化癌的生物学特性及潜在的治疗策略。
ACT1细胞特性特征
基因表达:ACT1细胞系可能表达与癌症相关的多种基因,包括促进细胞增殖和抑制凋亡的基因。这些基因的表达特征与未分化癌的恶性程度密切相关。
突变特征:ACT1细胞可能携带特定的基因突变,这些突变与甲状腺癌的发生和发展有关。
支原体检测:在细胞培养过程中,ACT1细胞经过支原体检测,结果为阴性,确保细胞的纯度和实验的可靠性。
ACT1细胞参数表
细胞名称 | ACT1细胞(人未分化甲状腺癌细胞) |
细胞名称 | ACT-1人甲状腺癌细胞 |
组织/物种 | 甲状腺;人 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
形态/生长 | 上皮细胞样,贴壁生长 |
纯度 | ≥90% |
别名/编号 | ACT-1 STR;HB-80 |
培养基/血清 | DMEM高糖/RPMI-1640;10%+1%双抗; |
气相 | 空气95%;二氧化碳5%;37°C |
传代方法 | 1:2 传代 |
冻存条件 | 无血清细胞冻存液 |
冻存液成分 | 基础培养基+5%DMSO+20%FBS |
细胞代次 | 三代内 |
细胞生长实验 | 细胞生长良好,形态正常 |
保存 | 液氮冷冻保存; |
用途范围 | 科研实验 |
微生物检测 | 支原体/细菌/真菌:阴性 |
内毒素含量 | ≤3 EU/mL |
注意事项 | 人甲状腺未分化癌细胞(anaplastic thyroid carcinoma, ATC)。 该细胞株经过STR鉴定,与国际上 ATCC、DSMZ、JCRB 和 RIKEN 公布的 STR 数据库中 8000 余种细胞均不相符,排除被常见细胞系污染的可能。 由于 ACT-1 细胞本身没有公布可比对的 STR 图谱数据,我们只能初步判断该细胞可能为 ACT-1。 |
培养教程
ACT1人未分化甲状腺癌细胞培养教程
细胞复苏
从液氮中取出ACT1细胞冻存管,并立即放入37°C水浴中,轻轻摇晃,使细胞迅速解冻。
准备DMEM高糖培养基,补充10%胎牛血清(FBS)和1%双抗(青霉素-链霉素)。
ACT1细胞完全解冻后,将悬液转移到离心管中,加入4 mL预温的培养基,轻轻混合。
在1000 RPM离心4分钟,弃去上清液。
加入1-2 mL新鲜培养基,轻轻吹打ACT1细胞沉淀,确保细胞分散均匀。
将重悬的ACT1细胞转移至T25培养瓶中,加入8 mL培养基,置于37°C、5% CO2的培养箱中培养过夜。
细胞传代
当ACT1细胞生长覆盖瓶底的80%-90%时,可以进行传代操作。
弃去旧的培养基,用无钙镁的PBS轻柔洗涤ACT1细胞1-2次,以去除残留的培养基成分。
加入1 mL胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%胰蛋白酶和0.53 mM EDTA),置于37°C培养箱中消化1-2分钟,观察ACT1细胞逐渐变圆并开始脱附。
当ACT1细胞脱附后,加入适量培养基以中和胰蛋白酶,轻轻吹打确保细胞完全悬浮。
在1000 RPM下离心4分钟,弃去上清液,加入6-8 mL培养基,轻轻混匀。
按1:2或1:3比例将ACT1细胞悬液分配到新的培养瓶中,补充新鲜培养基。
细胞冻存
冻存液通常由90%的完全培养基和10%的DMSO(二甲基亚砜)组成。
当ACT1细胞生长状况良好时,洗涤并用胰蛋白酶消化细胞。消化后将ACT1细胞重悬于冻存液中。
将ACT1细胞悬液分装到冻存管中,做好标记,确保每管含有足够数量的细胞。
将冻存管放入程序化降温盒中,置于-80°C冰箱中预冻24小时后,转移至液氮中长期保存。
注意事项
无菌操作:在整个培养过程中应保持无菌操作,避免ACT1细胞污染。
培养环境监控:定期观察ACT1细胞的形态和生长状态,确保细胞健康并及时进行传代。
培养基更换:每2-3天更换培养基,维持ACT1细胞培养环境的稳定和清洁。
常见问题
细胞密度过高:如果ACT1细胞密度过高,应及时进行传代,否则会导致细胞接触抑制,影响生长。
解冻后细胞活力下降:解冻后ACT1细胞活力可能有所下降,但通常经过1-2次传代后能恢复至正常生长状态。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,12 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 11,13 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 11,14 |
D13S317 | 10,12 |
D16S539 | 9,11 |
D18S51 | 15,16 |
D21S11 | 30,31 |
FGA | 23,24 |
TH01 | 6,9 |
TPOX | 8 |
vWA | 17,18 |