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货号：STM-CL-5203 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
KHM5M细胞【人甲状腺癌细胞(未分化)】
- 来源：甲状腺未分化(间变性)癌转移部位:胸腔积液
- 细胞特征：贴壁细胞, 成纤维细胞样
- 培养基：生长培养基: RPMI-1640＋10% FBS＋1%P/S
- 其他：产生白介素8（IL-8），是中性粒细胞趋化因子
KHM-5M细胞是一种来源于日本男性患者的未分化甲状腺癌细胞系，原发于其右颈前区和锁骨上区的硬肿瘤的胸腔积液转移病灶。KHM-5M细胞表现出产生中性粒细胞趋化因子白介素8（IL-8）的能力，用于研究肿瘤免疫病理学和细胞因子在肿瘤微环境中作用等。
KHM-5M细胞在裸鼠体内移植时能引起中性粒细胞的浸润，进一步验证了趋化活性。实验中使用了改良的Boyden室技术来评估细胞的趋化能力，并通过DNA克隆技术鉴定了其产生的细胞因子，包括白介素8。
KHM5M细胞特性
KHM5M细胞为未分化甲状腺癌（ATC）细胞。
KHM5M细胞为成纤维细胞样，生长时贴壁生长。
KHM-5M细胞能够产生中性粒细胞趋化因子，即白介素8（IL-8）。
KHM5M细胞用于研究癌症免疫病理学和细胞因子在肿瘤微环境中的作用。
KHM5M细胞在裸鼠体内移植显示中性粒细胞浸润，证明其趋化活性。
KHM5M细胞使用改良的Boyden室技术证明了细胞的趋化活性。
KHM5M细胞参数表
| 细胞名称 | KHM5M细胞【人甲状腺癌细胞(未分化)】 |
| 细胞别称 | KHM/5M; KHM5M |
| 来源 | 甲状腺未分化癌转移，胸腔积液，65岁男性 |
| 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 供体年龄 | 65岁 |
| 组织来源 | 甲状腺未分化(间变性)癌转移部位：胸腔积液 |
| 相关疾病 | 未分化甲状腺癌、中性粒细胞增多症、恶性胸膜炎 |
| 生物安全等级 | BSL-1 |
| 倍增时间 | 约27小时(JCRB) |
| 生长条件 | CA、不含MG的PBS中含有0.25%胰蛋白酶和0.02%EDTA |
| 生物学功能 | 产生白介素8（IL-8），是中性粒细胞趋化因子 |
| 技术评估 | 使用改良的Boyden室技术评估细胞的趋化活性，通过DNA克隆鉴定细胞因子 |
| 实验验证 | 在裸鼠体内移植实验中观察到中性粒细胞的浸润 |
| 细胞污染检测 | HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌检测均为阴性 |
| 培养基配方 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
| 培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃；饱和湿度 |
| 冻存条件 | 基础培养基 + 10% DMSO + 20% FBS； 液氮 |
| 传代方法 | 1:2传代，消化时间约2-3分钟 |
| 传代比例 | 1:3 - 1:6 |
| 推荐换液频率 | 每周2-3次 |
| 培养保存机构 | JCRB; JCRB0148 |
| 使用限制 | 仅限于科学研究，不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |
培养教程
KHM5M人甲状腺癌细胞(未分化)培养教程
冻存细胞的复苏
将含有1mL KHM-5M细胞悬液的冻存管放置在37℃水浴中快速摇晃解冻。
将解冻的KHM-5M细胞悬液加入到含4-6mL完全培养基的离心管中，混合均匀。
在1000 RPM条件下离心3-5分钟，弃去上清液，用完全培养基重悬KHM-5M细胞。
将重悬的KHM-5M细胞悬液加入含6-8mL完全培养基的培养瓶（或皿）中，在37℃培养箱中培养过夜。
第二天使用显微镜观察KHM-5M细胞生长情况和细胞密度。
细胞传代
当KHM-5M细胞密度达到80%-90%时，可以进行传代培养。
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗KHM-5M细胞1-2次。
加入0.25%（w/v）胰蛋白酶和0.53 mM EDTA于培养瓶中（例如T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），在37℃培养箱中消化1-2分钟。
观察KHM-5M细胞消化情况，若大部分细胞变圆并脱落，迅速拿回操作台轻敲几下培养瓶后加入3-4mL含10% FBS的培养基终止消化。
轻轻打匀后吸出，在1000 RPM条件下离心3-5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
将KHM-5M细胞悬液按1:2的比例分到新的T25瓶中，添加6-8mL新鲜配置的完全培养基以保持细胞的生长活力。
后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
细胞冻存
在KHM-5M细胞培养的前3代建议冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
收集消化好的KHM-5M细胞到离心管中，根据实际需求使用血球计数板计数，确定细胞的冻存密度（一般推荐为1×10^6~1×10^7个活细胞/mL）。
在1000 RPM条件下离心3-5分钟，去掉上清液，用配制好的细胞冻存液重悬细胞。
将KHM-5M细胞按每1mL冻存液含1×10^6~1×10^7个活细胞/mL分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
将冻存的KHM-5M细胞置于程序降温盒中，过夜在-80℃冰箱冷冻，之后转移到液氮容器中长期保存。
记录冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
相关资料
STR鉴定及相关
| Amelogenin | X,Y |
| CSF1PO | 11.3,12.3 (JCRB=JCRB0148) |
| 12,13 (PubMed=25877200; PubMed=30737244) | |
| D2S1338 | 19,23 |
| D3S1358 | 15 |
| D5S818 | 12 |
| D7S820 | 10,11 |
| D8S1179 | 13 |
| D13S317 | 8,11 |
| D16S539 | 9,10 |
| D18S51 | 16,19 |
| D19S433 | 14 |
| D21S11 | 28,31 |
| FGA | 22,23 |
| Penta D | 9,11 |
| Penta E | 11,18 |
| TH01 | 7 |
| TPOX | 8 |
| vWA | 18 |