
LN-18细胞(人胶质母细胞瘤)
- 来源:大脑;右颞叶
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:DMEM+5% FBS+1% P/S
- 其他:抗原表达:LN-18细胞表达HLA-A2、A9、B5、BW35和DRW3抗原。
LN-18细胞系是一种人胶质母细胞瘤细胞系,于1976年从一名65岁的白人男性胶质母细胞瘤患者的右颞叶中分离。
LN-18细胞系以其上皮样形态和贴壁生长特性著称,增殖速度较快,适合用于体外实验。LN-18细胞系因其独特的生物学特性成为研究胶质母细胞瘤的重要模型,提供了宝贵的实验材料用于相关生物医学研究。
LN-18细胞特性特征
致瘤性:LN-18细胞系在裸鼠体内能够形成肿瘤,表明其具有致瘤性。
癌症基因状态:TP53:突变型,具体为TGT(Cys)到TCT(Ser)密码子238突变;PTEN:野生型;p16/CDKN2A:已删除;p14ARF:已删除。
抗原表达:LN-18细胞表达HLA-A2、A9、B5、BW35和DRW3等抗原。
基因表达:LN-18细胞主要表达纤维连接蛋白(fibronectin)。
胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和S100蛋白:对这两种蛋白呈阴性。
在Fas配体刺激下,LN-18细胞会在16小时内发生凋亡。
嘌呤霉素以剂量依赖的方式杀死这些细胞。
Bcl-2蛋白对Fas配体诱导的细胞死亡提供保护,但对嘌呤霉素诱导的凋亡保护作用有限
LN-18细胞参数表
细胞名称 | LN-18细胞(人胶质母细胞瘤) |
细胞别称 | LN 18; LN18; LN018 |
来源 | 65岁白人男性患者的右颞叶胶质母细胞瘤 |
组织来源 | 大脑 |
疾病特征 | 胶质母细胞瘤 |
形态 | 上皮样形态 |
生长特性 | 贴壁生长 |
倍增时间 | 每周2至3次(约28.2小时) |
传代比例 | 1:2至1:6,每周2次 |
消化时间 | 2-3分钟 |
培养基 | DMEM培养基(90%) + 胎牛血清(10%) + 1%双抗 |
气相条件 | 空气95%,二氧化碳5%;37℃;70%-80%湿度 |
冻存条件 | 冻存液:90%胎牛血清 + 10% DMSO,液氮储存 |
支原体检测 | 阴性 |
安全等级 | 1 |
致瘤性 | 是,在裸鼠中形成肿瘤 |
基因状态 | TP53+(突变),PTEN+(野生型),p16-(已删除),p14ARF-(已删除) |
抗原表达 | HLA-A2, A9, B5, BW35, DRW3 |
基因表达特征 | 纤维连接蛋白(fibronectin) |
细胞凋亡特性 | Fas配体刺激下可诱导细胞在16小时内凋亡,嘌呤霉素以剂量依赖方式杀死细胞。Bcl-2对Fas诱导的凋亡有保护作用,但对嘌呤霉素诱导的凋亡保护作用有限。 |
应用领域 | 胶质母细胞瘤生物学研究、药物筛选、细胞凋亡研究 |
培养教程
LN-18人胶质母细胞瘤培养教程
细胞传代步骤
准备工作:在无菌条件下进行操作,确保所有器材和培养基已准备妥当(如T25或T75培养瓶)。
更换培养液:每2-3天更换一次培养液,即使未观察到培养基颜色变化。使用巴氏吸管轻轻吸取部分上清液,避免扰动细胞,加入等体积的新鲜培养基。
吸出原培养液后,加入约2mL的PBS(磷酸盐缓冲液),轻轻晃动以润洗细胞,然后吸出PBS。
加入约1mL的0.25%胰蛋白酶溶液(含EDTA),轻轻晃动以确保细胞完全浸润。
将培养瓶放入37℃的培养箱中进行消化,观察细胞是否开始变圆且之间出现间隙,通常消化时间为3-5分钟。
加入3mL含血清的培养基终止消化,并轻轻吹打使细胞脱壁形成悬浮液。
收集细胞悬液并以1200rpm/min离心3分钟,弃去上清。
加入新鲜培养基,轻轻重悬细胞后转移至新的培养瓶中。
传代比例:通常采用1:2至1:6的传代比例,具体可根据细胞密度进行调整。
冻存步骤
将细胞悬液调整至浓度为0.5-1.0×10^6 cells/mL。
将冻存管放入-80℃冰箱预冷24小时,然后转移至液氮储存以确保细胞的长期保存。
复苏步骤
复苏前准备:准备好含有10% FBS的完全培养基,以便于细胞复苏后的培养。
将冻存管在37℃水浴中迅速解冻,轻轻摇晃使细胞均匀分布。
加入4mL新鲜培养基与细胞悬液混合均匀。
在1000rpm下离心4分钟,弃去上清液。
补加1-2mL新鲜培养基,并将细胞转移至新的培养瓶中。
注意事项
LN-18细胞对氧气、细胞密度及营养物质非常敏感,需定期检查和更换培养液,以防细胞死亡。
建议将培养瓶平放,以增大空气交换面积,确保培养液高度不超过3mm,从而提供适宜的生长环境。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 12 |
D2S1338 | 17,20 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 11,13 |
D7S820 | 8,10 |
D8S1179 | 12,14 |
D13S317 | 12,13 |
D16S539 | 11,13 |
D18S51 | 17,19 |
D19S433 | 12,15 |
D21S11 | 28 |
FGA | 19,23 |
Penta D | 11 |
Penta E | 7,10 |
TH01 | 9 |
TPOX | 8 |
vWA | 17,18 |