
SF295细胞系(人XG恶性胶质瘤细胞)
- 来源:脑部
- 细胞特征:贴壁细胞 , 成纤维细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:不表达胶质标记物GFAP或谷氨酰胺合成酶,实阳性表达神经纤维蛋白-1
SF-295细胞系是从患者的左额叶恶性胶质瘤组织中分离并培养得到的,属于人类恶性胶质母细胞瘤细胞系。SF295细胞在培养过程中表现出超三倍体和胶质样形态。SF295细胞系常用于评估药物和分子调节剂对胶质母细胞瘤的影响。
SF295细胞特性特征
不表达: 胶质标记物GFAP(胶质纤维酸性蛋白)和谷氨酰胺合成酶
阳性表达: 神经纤维蛋白-1(Neurofibromin-1,NF1),这是多形性胶质母细胞瘤中最常见的突变因子之一
致瘤性: SF295细胞在无胸腺小鼠中不致瘤
SF295细胞系参数表
细胞名称 | SF295细胞系(人XG恶性胶质瘤细胞) |
别称 | SF-295 Cell; SF295; SF-295; SF 295 |
种属 | 人 |
组织来源 | 左额叶肿瘤(left frontal lobe tumor) |
细胞类型 | 恶性胶质瘤细胞 |
生物安全级别 | 2级 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
倍增时间 | 27-36小时 |
细胞活力 | 通常保持在95%左右(使用台盼蓝排除法测定) |
培养基 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S(青霉素/链霉素) |
培养环境 | 37°C,5% CO2 |
传代方法 | 1:2-1:3,每2-3天换液一次 |
冻存条件 | 90% FBS + 10% DMSO |
复苏条件 | 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入培养基混合均匀 |
不表达 | 胶质标记物GFAP(胶质纤维酸性蛋白)、谷氨酰胺合成酶 |
阳性表达 | 神经纤维蛋白-1(NF1) |
染色体特征 | 超三倍体 |
基因突变 | NF1(神经纤维蛋白-1)突变 |
致瘤性 | 在无胸腺小鼠中不致瘤 |
无菌检测 | 细菌、酵母、支原体检测均为阴性 |
病原体检查 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎检查均为阴性 |
研究用途 | 肿瘤生物学研究、药物筛选、抗癌药物研究、基因功能研究 |
特殊应用 | 评估药物和分子调节剂对胶质母细胞瘤的影响 |
培养教程
SF295人XG恶性胶质瘤细胞系培养教程
SF-295细胞复苏
将SF-295细胞冻存管在37°C水浴中快速解冻(约1分钟)
将SF-295细胞悬液转移到含有5mL预热培养基的离心管中
以1000 RPM离心5分钟
弃去上清,用新鲜培养基重悬SF-295细胞
将SF-295细胞转移到培养瓶中,放入培养箱中培养
日常SF-295细胞培养
每天观察SF-295细胞形态和生长状况
每2-3天换液一次
当SF-295细胞密度达到80-90%时进行传代
SF-295细胞传代方法
弃去旧培养基
用PBS轻轻冲洗SF-295细胞1-2次
加入适量胰蛋白酶-EDTA溶液,37°C消化3-5分钟
用显微镜观察SF-295细胞是否脱落
加入含血清的培养基终止消化
以1000 RPM离心5分钟
弃去上清,用新鲜培养基重悬SF-295细胞
按1:2或1:3的比例将SF-295细胞接种到新的培养瓶中
SF-295细胞冻存
使用90% FBS + 10% DMSO的冻存液
将SF-295细胞悬液分装到冻存管中
使用程序降温盒,在-80°C冰箱中存放过夜
次日转移到液氮中长期保存
SF-295细胞培养注意事项
保持无菌操作,定期进行支原体检测
SF-295细胞生长较快,建议使用较大的培养瓶
避免SF-295细胞过度生长或“抱团”现象
定期检查SF-295细胞活力,保持在95%左右
SF-295细胞的特殊处理
进行药物处理或基因转染实验时,确保SF-295细胞生长状态良好
实验前进行SF-295细胞计数,确保实验条件的一致性
SF-295细胞质量控制
定期进行SF-295细胞形态学观察
检测SF-295细胞关键蛋白表达(如神经纤维蛋白-1)
监测SF-295细胞生长曲线和倍增时间
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,13 |
D2S1338 | 15,20 |
D3S1358 | 16,18 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 9,13 |
D8S1179 | 13,14 |
D13S317 | 10 |
D16S539 | 12,13 |
D18S51 | 15,18 |
D19S433 | 12,15 |
D21S11 | 28,30 |
FGA | 22,25 |
Penta D | 13,14.4 |
Penta E | 5,7 |
TH01 | 9.3 (Cosmic-CLP=905985) |
9.3,10 (AddexBio=C0005005/415; Millipore=SCC289; PubMed=19372543) | |
TPOX | 8,11 |
vWA | 16,17 |
参考文献
上一篇:SF-763细胞(人脑瘤细胞)