T98G细胞系（人脑胶质瘤细胞系）

T98G细胞是一种成纤维样人脑胶质瘤细胞系，在1970年代从一名61岁白人男性多形性胶质母细胞瘤患者的大脑组织中分离，由GH Stein保藏。T98G细胞系在实验室条件下能够持续传代，并保持相对的遗传稳定性，是神经科学、肿瘤学和药物筛选研究中的重要模型系统。

T98G细胞的染色体数目超五倍体，通常在128至132条之间，且具有显著的染色体结构改变。大部分细胞中存在14至16条标记染色体，这些标记染色体多为复杂的染色体间易位形成，如der(1)t(1;?)(p36;?)、i(6p)、der(10)t(10;?)。其中，der(10)和der(19)标记染色体可能由平衡易位形成，即t(10;19)(q24;q13)，这些标记物以及微小稳心点在多数细胞中存在三个或更多拷贝。此外，N5、N7、N11、N13、N20、N21、N22等染色体在大部分细胞中均有六个或更多拷贝，而X和N15染色体仅有一个副本。

T98G细胞系特性特征

• 生长特性：在缺乏血清或细胞密度过高的情况下，T98G细胞会进入G1期的存活阻滞状态。表现出不依赖于锚定的特性。

• 基因表达：T98G细胞系显示出特定的基因表达模式。高度表达ACTA2基因，该基因与肌肉收缩活动相关。

• 致瘤性：T98G细胞在裸鼠体内不会引起肿瘤形成。

• 遗传稳定性：T98G细胞系在实验室条件下能够持续传代，并保持一定的遗传稳定性。

T98G细胞系参数表

T98G人脑胶质瘤细胞系培养教程

复苏T98G细胞

• 将T98G细胞冻存管从液氮中取出后，立即将其放入37℃的水浴中，轻轻摇动，直到T98G细胞完全解冻（大约1-2分钟）。

• 将解冻后的T98G细胞悬液（约1 mL）移入含有4 mL预热的培养基（DMEM + 10% FBS + 1% P/S）的无菌离心管中，轻轻混匀，以稀释DMSO。
  

• 在1000 rpm下离心T98G细胞3分钟，小心去除上清液。
  

• 加入1-2 mL新鲜培养基，轻轻吹打使T98G细胞均匀分散。
  

• 将重悬的T98G细胞转移到培养瓶中，添加适量的培养基，然后将其放置于37℃、5% CO₂培养箱中培养过夜。
  

• 第二天，检查T98G细胞密度并更换培养基，以去除残留的DMSO，确保T98G细胞处于良好状态。
  

T98G细胞传代

• 当T98G细胞达到80%-90%汇合时，可以开始传代。
  

• 小心地弃去T98G细胞培养上清，用无钙、无镁的PBS洗涤T98G细胞1-2次。
  

• 加入1 mL 0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液，确保消化液完全覆盖T98G细胞。倒掉多余的消化液后，将培养瓶置于37℃培养箱中，持续消化约1分钟，直到T98G细胞开始变圆和脱落。
  

• 轻轻拍打培养瓶，加入预热的培养基以终止T98G细胞消化过程。
  

• 将T98G细胞悬液转移至无菌离心管中，在1000 rpm下离心4分钟，弃去上清液。
  

• 加入适量培养基（1-2 mL），轻轻吹打使T98G细胞均匀分布。
  

• 将重悬后的T98G细胞按1:2或1:3的比例分配至新的培养瓶或培养皿中，补充8 mL培养基，然后置于37℃、5% CO₂的培养箱中继续培养。
  

T98G细胞冻存

• 当T98G细胞生长良好并达到适当的汇合度时，收集T98G细胞，将其与培养液一起转移至无菌离心管中，1000 rpm离心。
  

• 弃去上清液，加入适量的冻存液（如DMSO与FBS的混合物），轻轻混匀。
  

• 将T98G细胞悬液分装至冻存管中，每管不超过1 mL。
  

• 将T98G细胞冻存管先放入-80℃冰箱中冷冻24小时，随后转移至液氮罐中进行长期保存。