
kyse510细胞系(人食管癌细胞)
- 来源:食管鳞癌
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮样细胞生长为具有多层病灶的单层细胞
- 培养基:生长培养基:RPMI-1640:Ham's F-12 (1:1)+10%FBS+1%P/S
- 其他:kyse510细胞携带p53基因突变,表现MYC、HST1和CYCLIN D1基因。
kyse510细胞系源自一位67岁女性患者的颈段食管,该患者曾因高度分化的食管鳞状细胞癌接受顺铂和放疗治疗后进行手术切除。
kyse510细胞系具有中度侵袭性,仅轻微侵入食管的外膜。
kyse510细胞携带p53基因的突变,并表现出MYC、HST1和CYCLIN D1基因的正常表达,而非扩增。
kyse510细胞在裸鼠模型中具有适度分化的肿瘤特征,但未能完全诱导高分化肿瘤形成。
kyse510细胞系特性
kyse510细胞携带p53基因突变,表现MYC、HST1和CYCLIN D1基因。
kyse510细胞形态为上皮样细胞,生长方式为贴壁生长。
kyse510细胞在裸鼠体内可形成适度分化的肿瘤特征。
kyse510细胞系参数表
细胞名称 | kyse510细胞系(人食管癌细胞) |
细胞别称 | Kyse-510, KYSE510 |
组织来源 | 食管鳞癌 |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
细胞类型 | 食管鳞状细胞癌 |
细胞来源 | 日本女性,67岁 |
分离建系 | 从颈部食管组织中分离建立,该患者接受了顺铂和放疗治疗 |
细胞形态 | 高度分化的嗜酸性粒细胞鳞状细胞癌,具有中度外膜侵袭 |
细胞形态 | 上皮样细胞,生长为具有多层病灶的单层细胞 |
生长特性 | 贴壁生长 |
分子特征 | 携带p53基因突变 |
基因扩增 | MYC、HST1、CYCLIN D1 |
裸鼠体内实验 | 在裸鼠体内形成适度分化的肿瘤组织 |
细胞生长特性 | 粘附性细胞,需要在含有适当培养基的培养皿中培养 |
完全培养基 | 45% RPMI-1640 + 45% Ham's F-12 + 10% FBS + 1% P/S |
培养环境 | 37°C,5% CO2 |
冻存条件 | 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO,液氮保存 |
消化时间 | 3-5分钟 |
传代比例(密度) | 1:3-1:5 |
换液频次 | 2-3次/周 |
倍增时间 | 24-30小时 |
生物安全等级 | 1 |
细胞保藏中心 | DSMZ: ACC-374; JCRB: JCRB1436 |
应用领域 | 癌症研究,特别是食管鳞状细胞癌的分子机制研究和药物治疗测试 |
培养教程
kyse510人食管癌细胞贴壁培养教程
细胞复苏
从液氮罐中取出KYSE-510细胞冻存管,快速置于37°C水浴中,直至完全解冻,避免结晶残留。
外部清洁:使用75%酒精擦拭冻存管表面,确保无外部污染。
将解冻的细胞悬液转移到含有5ml预热完全培养基的15ml离心管中。
以1000rpm离心5分钟,弃去上清液。
重悬细胞:加入3-5ml预热的完全培养基,轻轻吹匀,确保细胞均匀悬浮。
将细胞悬液均匀分配到预热的T25培养瓶中,添加适量的完全培养基使细胞密度适宜。
将培养瓶放入37°C、5% CO2的细胞培养箱中培养过夜。
第二天,检查细胞生长情况和密度,根据需要换液或进行下一步操作。
细胞传代
当细胞密度达到80%-90%时,即可进行传代培养。
弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
加入适量的0.25%胰蛋白酶-0.53mM EDTA消化液至培养瓶中,置于37°C培养箱中消化1-2分钟,观察细胞变圆脱落情况。
细胞大部分变圆并脱落后,立即添加5ml以上含10% FBS的完全培养基终止消化。
轻轻吹打细胞使之完全脱落,收集细胞悬液至新的15ml离心管中。
以1000rpm离心5分钟,弃去上清液,补充1-2ml完全培养基,轻轻吹匀。
将细胞悬液按1:2的比例分配到预热的新T25培养瓶中,补充适量的完全培养基。
放回37°C、5% CO2的细胞培养箱中培养。
细胞冻存
在细胞生长至80%面积时,收集细胞悬液至离心管中,留5ml完全培养基。
加入适量的0.25%胰蛋白酶消化液,观察细胞变圆脱落情况。
轻轻吹打细胞使之完全脱落,转移至新的15ml离心管中。
以1000rpm离心5分钟,弃去上清液,加入1ml雅吉生物无血清冻存液(C7001)混匀。
直接将冻存管置于-80°C冰箱中过夜,确保冻存过程安全无误。
长期储存:24小时后,转移到液氮罐中进行长期保存。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11 (DSMZ=ACC-374) |
11,13 (Cosmic-CLP=907321; JCRB=JCRB1436; PubMed=25877200) | |
D2S1338 | 20,23 |
D3S1358 | 17 |
D5S818 | 11 |
D7S820 | 11,12 |
D8S1179 | 10 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 9 |
D18S51 | 15 |
D19S433 | 15 |
D21S11 | 31 |
FGA | 22 |
Penta D | 12 |
Penta E | 16 |
TH01 | 9 |
TPOX | 8 |
vWA | 14 |
参考文献
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