
OE19细胞(人食管癌细胞)
- 来源:食管癌
- 细胞特征:贴壁细胞 ,上皮细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:抗原表达:组成型表达HLA-A、HLA-B和HLA-C(MHC I类抗原); 用干扰素-γ处理后诱导ICAM-1(CD54)的表达
OE19细胞系(也称为JROECL19细胞)是人类食管腺癌(EAC)细胞系之一,最初由华威大学和伯明翰心脏医院的科研团队于1993年从一名72岁男性患者的III期食管腺癌肿瘤组织中建立。该肿瘤位于患者贲门及食管-胃交界处,并表现为中度分化的腺癌类型。OE19细胞系具有良好的体外培养特性,细胞在适宜条件下能快速增殖,并显示出典型的上皮细胞形态特征。OE19常用于食管鳞癌和腺癌的病理机制研究及治疗策略的开发。
在食管腺癌细胞系建立初期,五种永久性人类食管腺癌细胞系(包括SEG-1、BIC-1、SK-GT-5等)被广泛应用。然而,后续研究发现其中三种细胞系实际来源并非食管腺癌,而是其他癌种,例如SEG-1被重新鉴定为大细胞肺癌H460,BIC-1被鉴定为结直肠癌SW620,而SK-GT-5被认为是胃底腺癌SKGT-2。相较之下,OE19与OE33、FLO-1、KYAE-1、OACP4C、OACM5.1、ESO26及ESO51等细胞系的来源得到了验证,并被确认是食管腺癌细胞系。目前,所有经过验证的EAC细胞系及其基因分型信息已被存储在欧洲细胞与组织培养中心(ECACC),供全球科研人员用于基础研究和药物开发。
OE19细胞特性特征
抗原表达
组成型表达HLA-A、HLA-B和HLA-C抗原(MHC I类)。
用干扰素-γ处理后,诱导ICAM-1(CD54)的表达。
仅在OE19亚群中测量到HLA-DR(MHC II类)的表达。
细胞角蛋白:OE19细胞表达上皮细胞角蛋白,显示出其上皮来源的特性。
基因表
在不同实验条件下,OE19细胞中Gli1、Gli2、Snail、E-cadherin和Cyclin D1等基因的表达存在显著差异。这些基因与肿瘤的侵袭性和转移性相关。
Western blot分析显示,这些蛋白在不同处理组之间有统计学显著差异。
应用
致瘤性:在裸鼠模型中显示出致瘤性,为研究食管癌的生物学行为提供了理想的模型。
药物开发:用于筛选新药物及评估其对食管癌的治疗效果
OE19细胞参数表
细胞名称 | OE19细胞(人食管癌细胞) |
别称 | OE-19; JROECL 19; JROECL19; OEC19 |
性别/年龄 | 男性;72岁 |
组织来源 | 食管/胃贲门 |
肿瘤类型 | 食管腺癌 |
病理分期 | III期 (UICC) |
细胞类型 | 肿瘤细胞 |
形态学特征 | 上皮样 |
生长方式 | 贴壁生长为单层 |
倍增时间 | ~50-60小时 |
生物安全等级 | BSL-1 |
无菌检测结果 | 细菌、酵母、支原体检测均为阴性 |
病原体检测 | HIV、乙型肝炎、丙型肝炎检查均为阴性 |
培养基组成 | RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 + 1% 双抗 |
培养条件 | 温度:37℃;气相:95%空气,5%二氧化碳;湿度70%-80% |
冻存条件 | 90% 胎牛血清 + 10% DMSO |
保存条件 | 液氮存储 |
致瘤性 | 在裸鼠中具有致瘤性 |
基因表达特征 | 表达HLA-A、HLA-B和HLA-C抗原(MHC I类);ICAM-1(CD54)诱导表达;HLA-DR表达仅在特定条件下测量。 |
蛋白表达特征 | Gli1、Gli2、Snail、E-cadherin和Cyclin D1等蛋白在不同处理组间有显著差异。 |
保藏机构 | ECACC; 96071721 |
供应限制 | 仅供科研使用 |
培养教程
OE19人食管癌细胞培养教程
收到OE19细胞后的处理
收到OE19细胞后,首先检查运输瓶和培养基的完整性。如果发现培养液漏液或浑浊,需及时拍照并联系供应商。
将装有OE19细胞的T25培养瓶从包装中取出,去掉封口膜后,放入37℃培养箱中平衡2-3小时,使OE19细胞适应环境温度。
小心弃去OE19细胞培养瓶中的旧培养基,换上6ml全新的完全培养基,确保OE19细胞获得足够的营养。
观察OE19细胞的生长状态,当细胞密度达到80%-90%时,及时进行传代操作。
接收OE19细胞的次日,需对细胞进行污染检查。如果发现任何污染迹象,立即联系供应商以获得支持。
复苏OE19细胞
从冻存管取出OE19细胞后,迅速将其置于37℃水浴中晃动,直至OE19细胞完全解冻,确保无冰晶残留。
在超净工作台内,将解冻后的OE19细胞转移至含6ml完全培养基的15ml离心管,1000rpm离心4分钟。
弃去上清后,用6ml完全培养基重悬OE19细胞,然后将其接种于T25培养瓶中,在37℃、5% CO₂的培养箱中培养。次日更换培养基并检查OE19细胞的密度和生长状态。
OE19细胞传代
当OE19细胞覆盖培养瓶80%的面积时,弃去培养基,并用无钙镁的PBS清洗1-2次。
加入1ml 0.25%胰蛋白酶溶液,放入37℃培养箱中消化1-2分钟。观察OE19细胞的形态,若大多数细胞变圆并开始脱附,迅速加入少量完全培养基终止消化。
将消化后的OE19细胞悬液离心处理,1000rpm离心4分钟后弃去上清。然后将OE19细胞重悬,并按1:2或1:4比例接种到新的T25培养瓶中,补加8ml完全培养基,继续培养OE19细胞。
冻存OE19细胞
在传代过程中,收集OE19细胞并离心处理,弃去上清后用PBS清洗OE19细胞一次。
用无血清冻存液重悬OE19细胞,加入DMSO使终浓度为10%。OE19细胞悬液的密度应保持在1x10^6至1x10^7/ml,每支冻存管冻存1ml OE19细胞悬液。
将OE19细胞冻存管置于程序降温盒中,放入-80℃冰箱中过夜,随后转移至液氮罐中长期保存。冻存时应记录OE19细胞的具体位置,以便后续使用。
相关资料
- 人食管癌细胞系有哪些?
- 人食管癌细胞系是在实验室中从人类食管癌组织中分离出来的细胞系。这些细胞系被用于研究食管癌的...
- Barrett永生化食管上皮细胞
- 原代Barrett食管上皮细胞在培养中的寿命有限,并且通常不含有可导致Barrett食管癌...
- 查看完整内容 >
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,13 |
D2S1338 | 18,19 |
D3S1358 | 15,18 |
D5S818 | 11,14 |
D7S820 | 8 |
D8S1179 | 13,15 |
D13S317 | 9,11 |
D16S539 | 12,13 |
D18S51 | 12 (PubMed=25877200) |
12,13 (DSMZ=ACC-700; PubMed=20075370) | |
D19S433 | 13 |
D21S11 | 30 |
FGA | 23,26 |
Penta D | 9 |
Penta E | 5,8 |
TH01 | 8,9 |
TPOX | 8 |
vWA | 16,17 (Cosmic-CLP=910079; ECACC=96071721) |
16,17,18 (DSMZ=ACC-700; PubMed=20075370; PubMed=25877200) |