
SK-GT-4细胞(人食道癌肿瘤细胞)
- 来源:食道
- 细胞特征:贴壁细胞 ,上皮细胞样
- 培养基:RPMI-1640+10%FBS+1%P/S
- 其他:SK-GT-4细胞携带TP53、KRAS和PIK3CA等基因突变
SK-GT-4细胞株于1989年从一名89岁男性患者的远端食管腺癌原发性肿瘤中建立。SK-GT-4细胞广泛应用于食道癌的研究,尤其是在探索其生物学特性以及针对这些基因突变的治疗策略中,具有重要的临床和研究价值。
SK-GT-4细胞特性特征
SK-GT-4细胞携带TP53、KRAS和PIK3CA基因突变
信号通路:SK-GT-4细胞可能通过PI3K/AKT信号通路调控细胞增殖和凋亡,这与其基因突变密切相关。
蛋白表达:研究表明,该细胞株中可能存在与细胞增殖、迁移和侵袭相关的蛋白质表达变化
SK-GT-4细胞参数表
细胞名称 | SK-GT-4细胞(人食道癌肿瘤细胞) |
别称 | SKGT4; SK4 |
建立年份 | 1989年 |
来源 | 89岁男性患者的食管远端腺癌原发性肿瘤 |
组织来源 | 食道(Esophagus) |
细胞类型 | 肿瘤细胞(Epithelial) |
肿瘤类型 | 食道腺癌(Esophageal adenocarcinoma) |
生长特性 | 贴壁生长(Adherent) |
形态特征 | 上皮样(Epithelial-like) |
倍增时间 | 30-35 hours (DSMZ=ACC-712) |
生物安全等级 | BSL-1 |
致瘤性 | 是,在无胸腺小鼠中致瘤 |
培养基类型 | RPMI-1640 + 10% FBS + 1% P/S |
培养条件 | 气相:5% CO2,95%空气;温度:37℃ |
冻存条件 | 55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO |
传代比例 | 1:2 至 1:6 |
换液频率 | 每2-3天更换培养液 |
消化时间 | 3-5分钟 |
基因突变 | TP53、KRAS、PIK3CA |
蛋白表达特征 | 与细胞增殖、迁移和侵袭相关的蛋白质变化 |
应用领域 | 癌症研究:用于食道癌的基础研究和药物筛选;生物标志物探索:帮助识别与食道癌相关的生物标志物。 |
培养教程
SK-GT-4人食道癌肿瘤细胞培养教程
收到细胞后的处理
检查包装:收到SKGT4细胞后,首先检查包装是否完好,确保无破损或漏液情况。
消毒处理:用75%酒精彻底擦拭SKGT4细胞培养瓶表面,以避免污染。
细胞稳定:将SKGT4细胞瓶放入37℃的培养箱静置2-4小时,使细胞逐渐恢复并适应环境。
SKGT4细胞解冻步骤
将SKGT4细胞冻存管在37℃水浴中快速解冻(约2分钟),期间轻轻晃动冻存管,但确保管口始终位于水面上以防止污染。
解冻后,用70%酒精消毒SKGT4细胞冻存管表面,将管内液体转移到装有5mL完全培养基的离心管中。
以200×g的速度离心5-10分钟,去除上清液,以减少冷冻保存液中的DMSO对SKGT4细胞的影响。
用预热至37℃的完全培养基重新悬浮SKGT4细胞,转移至新的细胞培养瓶中。
将SKGT4细胞培养瓶置于37℃、5% CO₂的培养箱中,使细胞在适宜的环境下生长。
SKGT4细胞传代步骤
用吸管吸除SKGT4细胞的旧培养基,避免细胞继续接触废物代谢产物。
用约2mL的无钙镁磷酸盐缓冲液(PBS)轻轻冲洗SKGT4细胞,随后弃去PBS。
加入1mL 0.25%胰蛋白酶(含EDTA)至培养瓶,轻轻晃动使其均匀覆盖SKGT4细胞,放置于37℃培养箱中观察3-5分钟,直到细胞变圆并开始脱附。
加入3mL含血清的培养基终止胰蛋白酶作用,轻轻吹打混匀,使SKGT4细胞完全脱壁形成单细胞悬液。
以1200rpm离心3分钟,弃去上清液,用新鲜培养基重悬SKGT4细胞。
按1:2或1:3的比例将SKGT4细胞分装至新的培养瓶中,补充适量培养基,松开瓶盖或使用透气瓶盖,置于培养箱中继续培养。
SKGT4细胞冻存步骤
配制冻存液,含55%基础培养基、40%胎牛血清(FBS)和5%二甲基亚砜(DMSO)。
在传代后的适当细胞密度下(建议≥1×10^6个SKGT4细胞),将细胞收集到离心管中。
加入适量冻存液重悬SKGT4细胞,混匀后分装入冻存管。
将SKGT4细胞冻存管放入冻存盒中,置于-80℃冷冻箱中保存24小时后,转移至液氮罐中长期保存。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 11,15 |
D2S1338 | 16,19 |
D3S1358 | 17 |
D5S818 | 12 |
D7S820 | 7,11 |
D8S1179 | 13 |
D13S317 | 9,10 |
D16S539 | 11,12,13 |
D18S51 | 14 |
D19S433 | 13,14 |
D21S11 | 31.2 |
FGA | 22,23 |
Penta D | 9 |
Penta E | 7 |
TH01 | 6,9.3 |
TPOX | 8,10 |
vWA | 17,19 |
参考文献
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