
KYSE150细胞(人食管鳞癌细胞)
- 来源:食管
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:RPMI-1640:Ham's F-12(1:1)+10% FBS+1%P/S
- 其他:KYSE-150 细胞携带扩增的致癌基因 c-erb-B(8x)和cyclinD1(4x)
KYSE-150细胞是一种人类食管鳞状细胞癌细胞,来源于一位49岁日本女性。该患者在接受放射治疗后,从其上食道切除的低分化鳞状细胞癌组织中分离。KYSE-150细胞成为研究食管癌及其治疗的重要模型。
KYSE150细胞特性特征
基因扩增:KYSE150细胞携带扩增的致癌基因,包括c-erb-B(8倍扩增)和cyclin D1(4倍扩增)。
肿瘤形成能力:KYSE-150细胞在裸鼠中能够产生肿瘤,证明其具有良好的肿瘤形成能力。
KYSE150细胞参数表
细胞名称 | KYSE150细胞(人食管鳞癌细胞) |
细胞别称 | KYSE 150; KYSE150; Kyse150; KY150 |
细胞来源 | 日本女性,49岁:低分化食管鳞状细胞癌,经过放疗后从上食道切除 |
细胞形态 | 上皮样:贴壁生长 |
生长特性 | 贴壁生长:适合在细胞培养中使用 |
培养基 | RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 (FBS): |
传代方法 | 1:2至1:4传代:每3-4天传代,消化时间2-3分钟 |
换液频率 | 每2-3天换液一次:即使培养基未变色也需定期更换 |
冻存液配方 | 基础培养基 + 10% DMSO + 20% FBS:用于细胞冻存 |
细胞密度 | 1 x 10^5 - 2 x 10^5 cells/mL:推荐的接种密度 |
培养温度 | 37°C:适合的培养温度 |
气体环境 | 95%空气 + 5%二氧化碳:适合的培养气体环境 |
肿瘤形成能力 | 能在裸鼠中产生肿瘤:证明其具有良好的肿瘤形成能力 |
基因特征 | c-erb-B (8倍扩增) 和 cyclin D1 (4倍扩增) |
细胞周期 | G1/S期调控异常:由于基因扩增,细胞周期调控可能受到影响 |
分子标志物 | 表达p53、Ki-67等肿瘤标志物:相关于细胞增殖和凋亡的标志物 |
传代周期 | 每3-4天:根据细胞生长状态适时调整 |
应用领域 | 癌症研究、药物筛选、基因编辑:主要用于食管癌的研究和新药开发 |
细胞敏感性 | 对氧气、密度和养分敏感:需定期换液和传代,避免细胞死亡 |
培养技巧 | 建议平躺培养,液体高度不超过3mm:以增大空气交换面积,避免细胞沉淀 |
培养教程
KYSE150人食管鳞癌细胞培养教程
KYSE150细胞培养步骤
将冻存的KYSE150细胞从-80°C或液氮中取出后,立即放入37°C水浴中解冻,持续1-2分钟,直到完全解冻。
解冻后迅速将KYSE150细胞转移到含10% FBS的RPMI-1640培养基中,并轻轻混匀。
将解冻后的KYSE150细胞悬液接种到T25培养瓶中,接种密度为1 x 10^5 - 2 x 10^5细胞/mL。
将培养瓶放入37°C、5% CO₂培养箱中静置培养。
KYSE150细胞换液与传代
每2-3天换液一次,即使培养基未变黄也要及时换液。
在换液时,轻轻倾斜培养瓶,使用巴氏吸管吸取上清液,避免KYSE150细胞脱落。
补充等体积的新鲜培养基以维持适宜的培养条件。
当KYSE150细胞生长至80%-90%汇合时,应进行传代,一般每3-4天进行一次。
用PBS缓冲液清洗KYSE150细胞,去除残留的培养基。
加入0.25%胰蛋白酶消化KYSE150细胞2-3分钟,观察细胞是否开始脱落。
加入等体积的培养基终止消化,轻轻吹打使KYSE150细胞充分分散。
将KYSE150细胞悬液转移到离心管中,1000rpm离心5分钟,弃去上清液。
重悬KYSE150细胞于新鲜培养基中,并按照1:4的比例接种到新培养瓶中。
注意事项
细胞敏感性:KYSE150细胞对氧气、细胞密度及营养条件极为敏感,需定期换液和传代,以避免细胞应激和死亡。
建议平放培养瓶,以增大空气交换面积,确保液体高度不超过3mm。
当KYSE150细胞碎片较多时,才进行离心清洗,避免过度吹打和离心对细胞造成损伤。
监测细胞状态:定期显微镜下观察KYSE150细胞的形态和生长情况,确保细胞维持在健康状态。
传代频率的调整
根据KYSE150细胞的生长状态和密度,传代频率可以适当调整:
正常生长:KYSE150细胞达到80%-90%汇合时进行传代,通常每3-4天传代一次。
快速生长:如果KYSE150细胞增殖较快,可缩短传代间隔至每2-3天一次。
慢生长:若KYSE150细胞生长缓慢,可延长传代时间,但不宜超过5天,以免KYSE150细胞过度密集导致死亡。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 12,13 |
D2S1338 | 25 |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 12,13 |
D7S820 | 10,11 |
D8S1179 | 10,15 (PubMed=25877200) |
15 (DSMZ=ACC-375) | |
D13S317 | 8,11 |
D16S539 | 9,11 |
D18S51 | 14 |
D19S433 | 15 |
D21S11 | 30,31 |
FGA | 21,24 |
Penta D | 10 |
Penta E | 12,18 |
TH01 | 7,9 |
TPOX | 8 |
vWA | 16,17 |
参考文献
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