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KYSE150细胞(人食管鳞癌细胞)货号:STM-CL-5150 规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

KYSE150细胞(人食管鳞癌细胞)

  • 来源:食管
  • 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
  • 培养基:RPMI-1640:Ham's F-12(1:1)+10% FBS+1%P/S
  • 其他:KYSE-150 细胞携带扩增的致癌基因 c-erb-B(8x)和cyclinD1(4x)
价格:¥ 1,300.00
提供STR鉴定报告

KYSE-150细胞是一种人类食管鳞状细胞癌细胞,来源于一位49岁日本女性。该患者在接受放射治疗后,从其上食道切除的低分化鳞状细胞癌组织中分离。KYSE-150细胞成为研究食管癌及其治疗的重要模型。

KYSE150细胞特性特征

基因扩增:KYSE150细胞携带扩增的致癌基因,包括c-erb-B(8倍扩增)和cyclin D1(4倍扩增)。

肿瘤形成能力:KYSE-150细胞在裸鼠中能够产生肿瘤,证明其具有良好的肿瘤形成能力。

KYSE150细胞参数表

细胞名称KYSE150细胞(人食管鳞癌细胞)
细胞别称KYSE 150; KYSE150; Kyse150; KY150
细胞来源日本女性,49岁:低分化食管鳞状细胞癌,经过放疗后从上食道切除
细胞形态上皮样:贴壁生长
生长特性贴壁生长:适合在细胞培养中使用
培养基RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 (FBS):
传代方法1:2至1:4传代:每3-4天传代,消化时间2-3分钟
换液频率每2-3天换液一次:即使培养基未变色也需定期更换
冻存液配方基础培养基 + 10% DMSO + 20% FBS:用于细胞冻存
细胞密度1 x 10^5 - 2 x 10^5 cells/mL:推荐的接种密度
培养温度37°C:适合的培养温度
气体环境95%空气 + 5%二氧化碳:适合的培养气体环境
肿瘤形成能力能在裸鼠中产生肿瘤:证明其具有良好的肿瘤形成能力
基因特征c-erb-B (8倍扩增) 和 cyclin D1 (4倍扩增)
细胞周期G1/S期调控异常:由于基因扩增,细胞周期调控可能受到影响
分子标志物表达p53、Ki-67等肿瘤标志物:相关于细胞增殖和凋亡的标志物
传代周期每3-4天:根据细胞生长状态适时调整
应用领域癌症研究、药物筛选、基因编辑:主要用于食管癌的研究和新药开发
细胞敏感性对氧气、密度和养分敏感:需定期换液和传代,避免细胞死亡
培养技巧建议平躺培养,液体高度不超过3mm:以增大空气交换面积,避免细胞沉淀

培养教程

KYSE150人食管鳞癌细胞培养教程

KYSE150细胞培养步骤

  • 将冻存的KYSE150细胞从-80°C或液氮中取出后,立即放入37°C水浴中解冻,持续1-2分钟,直到完全解冻。

  • 解冻后迅速将KYSE150细胞转移到含10% FBS的RPMI-1640培养基中,并轻轻混匀。

  • 将解冻后的KYSE150细胞悬液接种到T25培养瓶中,接种密度为1 x 10^5 - 2 x 10^5细胞/mL。

  • 将培养瓶放入37°C、5% CO₂培养箱中静置培养。

KYSE150细胞换液与传代

  • 每2-3天换液一次,即使培养基未变黄也要及时换液。

  • 在换液时,轻轻倾斜培养瓶,使用巴氏吸管吸取上清液,避免KYSE150细胞脱落。

  • 补充等体积的新鲜培养基以维持适宜的培养条件。

  • 当KYSE150细胞生长至80%-90%汇合时,应进行传代,一般每3-4天进行一次。

  • 用PBS缓冲液清洗KYSE150细胞,去除残留的培养基。

  • 加入0.25%胰蛋白酶消化KYSE150细胞2-3分钟,观察细胞是否开始脱落。

  • 加入等体积的培养基终止消化,轻轻吹打使KYSE150细胞充分分散。

  • 将KYSE150细胞悬液转移到离心管中,1000rpm离心5分钟,弃去上清液。

  • 重悬KYSE150细胞于新鲜培养基中,并按照1:4的比例接种到新培养瓶中。

注意事项

  • 细胞敏感性:KYSE150细胞对氧气、细胞密度及营养条件极为敏感,需定期换液和传代,以避免细胞应激和死亡。

  • 建议平放培养瓶,以增大空气交换面积,确保液体高度不超过3mm。

  • 当KYSE150细胞碎片较多时,才进行离心清洗,避免过度吹打和离心对细胞造成损伤。

  • 监测细胞状态:定期显微镜下观察KYSE150细胞的形态和生长情况,确保细胞维持在健康状态。

传代频率的调整

  • 根据KYSE150细胞的生长状态和密度,传代频率可以适当调整:

  • 正常生长:KYSE150细胞达到80%-90%汇合时进行传代,通常每3-4天传代一次。

  • 快速生长:如果KYSE150细胞增殖较快,可缩短传代间隔至每2-3天一次。

  • 慢生长:若KYSE150细胞生长缓慢,可延长传代时间,但不宜超过5天,以免KYSE150细胞过度密集导致死亡。

相关资料

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STR鉴定及相关

AmelogeninX
CSF1PO12,13
D2S133825
D3S135815,16
D5S81812,13
D7S82010,11
D8S117910,15 (PubMed=25877200)
15 (DSMZ=ACC-375)
D13S3178,11
D16S5399,11
D18S5114
D19S43315
D21S1130,31
FGA21,24
Penta D10
Penta E12,18
TH017,9
TPOX8
vWA16,17

参考文献

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