KYSE180细胞（人食管鳞状细胞癌细胞）

KYSE180细胞系源自一名53岁男性在治疗前从中段胸内食管切除的分化良好的食管鳞状细胞癌患者，手术切除的肿瘤为高分化的食管鳞状细胞癌，并且已侵及周围结构。KYSE180细胞系是由日本研究团队在1990年代从该患者的肿瘤组织中成功分离出来。

KYSE180细胞作为食管鳞状细胞癌研究的典型模型，具备较高的增殖率和侵袭性，能够在体外稳定生长。KYSE180细胞在多种研究领域中具有广泛应用，包括药物敏感性测试、癌症生物学和分子机制探究等。该细胞系在食管癌领域内尤其被用于新药筛选及疾病机制的深入研究。

KYSE180细胞特性特征

• 基因表达：KYSE180细胞中多种肿瘤相关基因表达上调，其中STMN1（Stathmin 1）是一个重要的标志物。研究显示STMN1在KYSE-180中的表达显著高于正常食管上皮细胞，并且在食管癌组织中普遍高表达。

• 蛋白质修饰：通过二维Western blot分析发现，STMN1在KYSE-180中以两种不同的蛋白点形式存在，表明可能存在特定的修饰状态。

• STMN1表达：STMN1在KYSE-180细胞中的强表达与肿瘤的侵袭性和增殖能力相关。STMN1蛋白含有149个氨基酸，参与微管解聚及细胞骨架的形成与维持。

• 临床相关性：STMN1的高表达与食管癌临床分级及预后密切相关，为其作为潜在治疗靶点提供了依据

KYSE180细胞参数表

KYSE180人食管鳞状细胞癌细胞培养教程

解冻KYSE180细胞

• 解冻步骤：将冻存管迅速置于37°C的水浴中，保持冻存管口高于水面，轻轻摇动，约2分钟内解冻完成。

• 消毒处理：解冻后立即用70%乙醇擦拭冻存管表面，进行无菌操作。

• 转移操作：将解冻的KYSE180细胞悬液转移至预热的含5 mL完全培养基的离心管中。

• 离心步骤：以200×g离心5-10分钟，去除上清液中的DMSO及冻存液。

• 重悬细胞：用37°C的完全培养基重新悬浮KYSE180细胞，轻轻混匀后，将细胞转移至新的培养瓶中。

培养KYSE180细胞

• 培养条件：将培养瓶置于37°C、5% CO₂培养箱中静置培养。

• 细胞观察：每天观察KYSE180细胞生长情况，确保细胞状态正常，无污染迹象。

• 当KYSE180细胞达到70%-80%汇合时，及时进行传代。
  

• 去除旧培养基后，用无钙镁的PBS清洗细胞两次。

• 加入适量胰蛋白酶（0.25%），消化2-3分钟，直到KYSE180细胞轻微变圆并脱落。

• 立即加入新鲜的完全培养基中和胰蛋白酶，并将细胞悬液转移至新的培养瓶中。

• 根据实验需求，以1:2至1:5的比例稀释传代。

冻存KYSE180细胞

• 制备冻存液：使用90%胎牛血清和10%DMSO混合成冻存液。

• 收集KYSE180细胞：在传代过程中收集KYSE180细胞，离心去除上清。

• 重悬细胞：将KYSE180细胞用冻存液重新悬浮，每个冻存管加入约1 mL细胞悬液。

• 将KYSE180细胞放入-80°C冰箱中缓慢冷冻24小时。
  

• 之后转移至液氮罐中，进行长期保存。

KYSE180细胞在不同培养基中的表现

• 常规培养基配置RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 (FBS) + 1% 青霉素/链霉素 (P/S)

• 表现：该配置是最常用的培养基，能够支持KYSE180细胞的良好生长和增殖，细胞倍增时间约为40-50小时。KYSE180细胞呈上皮样形态，贴壁生长，形态良好。

  
  

• 替代培养基Ham's F12 : RPMI-1640 (1:1) + 2% FBS

• 表现：该混合培养基可替代RPMI-1640，能够维持KYSE180细胞的正常生长和增殖，生长速度略有差异，但形态保持稳定。

  
  

• KYSE180细胞专用培养基

• 表现：由技术团队优化，经过测试能维持KYSE180细胞的最佳生长状态，细胞形态和增殖能力均达到较高水平，无需额外添加成分，操作简单。

• 储存条件：该培养基应在2-8°C下避光保存，有效期为6个月。

注意事项

• 无菌操作：所有操作应严格保持无菌，推荐在II级生物安全柜内完成。

• 培养基选择：不同培养基可能影响KYSE180细胞增殖速度和形态，需根据实验需求选择最合适的培养基。

• 支原体检测：定期进行支原体检测，确保KYSE180细胞无污染。

• 传代频率：避免过度传代，传代频率过高可能影响KYSE180细胞的特性。