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货号：STM-CL-5205 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
KYSE410细胞 (人食管鳞癌细胞)
- 来源：食管鳞癌
- 细胞特征：贴壁细胞，上皮细胞样
- 培养基：生长培养基：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
- 其他：KYSE410细胞过表达肝素结合生长因子（hst-1）和细胞周期蛋白D1
KYSE410细胞系是从一名51岁日本男性在治疗前因颈部食管切除的低分化侵袭性食管鳞状细胞癌（肿瘤明显侵入外膜）中建立。
KYSE410细胞系特征
过表达基因：过表达肝素结合生长因子（hst-1）和细胞周期蛋白D1。
Y染色体：通过短串联重复序列（STR）-PCR分析，无法检测到Y染色体。这可能是SSC细胞系丢失Y染色体的已知现象。
细胞倍增时间：KYSE-410细胞的倍增时间为32-45小时。
支原体检测：初始污染通过环丙沙星（Ciprobay）消除，并在DAPI、微生物培养、RNA杂交和PCR检测中连续呈阴性。
病毒检测：ELISA检测逆转录酶为阴性，PCR检测结果均为阴性，包括EBV、HBV、HCV、HHV-8、HIV-1、HIV-2、HPV、HTLV-1/2、MLV、SMRV。
文献描述：KYSE410细胞系携带TP53和KRAS突变。
KYSE410细胞参数表
| 细胞系名称 | KYSE410细胞 (人食管鳞癌细胞) |
| 中文名称 | 人食管鳞癌细胞 |
| 细胞别称 | KYSE 410, KYSE410, KYSE0410 |
| 种属 | 人 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 肿瘤类型 | 食管癌细胞 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 来源 | 51岁日本男性 |
| 组织来源 | 食管鳞癌 |
| 建立时间 | 颈部食管切除手术前 |
| 分化状态 | 低分化侵袭性 |
| 倍增时间 | 32-45小时 |
| 过表达基因 | 肝素结合生长因子（hst-1）、细胞周期蛋白D1（cyclin D1） |
| 基因突变 | TP53、KRAS |
| Y染色体检测 | 未检测到Y染色体（STR-PCR分析） |
| Y染色体丢失现象 | SSC细胞系可能丢失Y染色体 |
| 支原体检测 | 阴性 |
| 支原体处理方法 | 使用Ciprobay（环丙沙星）消除支原体 |
| 支原体检测方法 | DAPI染色、微生物培养、RNA杂交和PCR检测 |
| 文献描述 | KYSE410细胞系携带TP53和KRAS突变，过表达hst-1和细胞周期蛋白D1 |
| 完全培养基 | RPMI-1640(PM150110)＋10%FBS(164210-50)＋1%P/S(PB180120) |
| 培养环境 | 气相：空气，95%；CO2，5%；温度：37℃ |
| 推荐传代比例 | 1:4-1:6 |
| 推荐换液频率 | 2-3次/周 |
| 冻存条件 | 55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO，液氮储存 |
| 生物安全等级 | 1 |
| 细胞保藏中心 | DSMZ: ACC-381, ECACC: 94072023, JCRB: JCRB1419 |
| 应用领域 | 肿瘤学研究、基因表达研究、药物筛选等 |
培养教程
KYSE410人食管鳞癌细胞培养教程
KYSE-410细胞复苏
将含有1mL KYSE-410细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻。
将解冻后的细胞悬液加入4-6mL培养基中混合均匀。
在1000RPM条件下离心3-5分钟，弃去上清液。
用1-2mL培养基重悬KYSE-410细胞，轻轻吹匀。
将细胞悬液加入培养瓶或10cm培养皿中，培养过夜。
第二天换液并检查KYSE-410细胞密度。
KYSE-410细胞传代
当KYSE-410细胞密度达80%-90%时，可进行传代培养。
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗KYSE-410细胞1-2次。
加入0.25% Trypsin-0.53mM EDTA消化液（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消化1-2分钟。
在显微镜下观察KYSE-410细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3-4mL含10% FBS的培养基终止消化。
轻轻打匀后吸出KYSE-410细胞悬液，在1000RPM条件下离心3-5分钟，弃去上清液。
用1-2mL培养基重悬KYSE-410细胞，轻轻吹匀。
按1:2至1:5的比例分装到新的培养瓶或培养皿中，加入6-8mL完全培养基以保持KYSE-410细胞的生长活力。
后续传代根据实际情况按1:2至1:5的比例进行。
KYSE-410细胞冻存
传代时按照细胞传代的过程收集消化好的KYSE-410细胞到离心管中。
使用血球计数板计数，决定KYSE-410细胞的冻存密度（推荐冻存密度为1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL）。
在1000RPM条件下离心3-5分钟，去掉上清。
用配制好的细胞冻存液（90% 完全培养基 + 10% DMSO）重悬KYSE-410细胞。
按每1mL冻存液含1×10⁶~1×10⁷个活细胞/mL分配到冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
将冻存管置于程序降温盒中，在-80℃冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。
记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
相关资料
STR鉴定及相关
| Amelogenin | X |
| CSF1PO | 12 |
| D2S1338 | 17,19 |
| D3S1358 | 15,16 |
| D5S818 | 13 |
| D7S820 | 12 |
| D8S1179 | 10 |
| D13S317 | 11 |
| D16S539 | 10,12 |
| D18S51 | 13,15 |
| D19S433 | 13 |
| D21S11 | 30 |
| FGA | 20 |
| Penta D | 11 |
| Penta E | 8,12 |
| TH01 | 8 |
| TPOX | 8,11 |
| vWA | 16,18 |
