
GS-HEPG2人肝癌细胞亚型
- 来源:肝脏
- 细胞特征:贴壁细胞,上皮细胞样
- 培养基:90% DMEM+10% FBS+10% P/S
- 其他:GS-HEPG2亚型细胞过表达谷氨酰胺合成酶基因
GS-HEPG2是一种由Omasa和Suga首次发现的人肝癌细胞亚型,来源于一名15岁男性的肝母细胞癌,是细胞Hep-G2细胞的亚型。与HepG2细胞系类似,该亚型细胞过表达谷氨酰胺合成酶基因(glutamine synthetase),因此在研究人工肝支持系统时具有潜在应用价值。
GS-HEPG2人肝癌细胞特性特征
基因表达:HepG2细胞能够表达多种与肝脏功能相关的蛋白质:白蛋白、甲胎蛋白、转铁蛋白、α2-巨球蛋白等。
GSHEPG2细胞中还表达胰岛素受体和胰岛素样生长因子II(IGF II)受体。
生物转化代谢酶:GSHEPG2细胞保留了完整的生物转化代谢酶,包括I相和II相酶,能够进行药物代谢和解毒。
GS-HEPG2人肝癌细胞参数表
细胞名称 | GS-HEPG2人肝癌细胞亚型 |
细胞别称 | HEP-G2; Hep G2; HEP G2; Hep-G2; HEPG2 |
细胞来源 | 15岁白人男性的肝母细胞癌组织 |
细胞形态 | 上皮细胞样,贴壁生长,呈片状小岛形态 |
生长特性 | 贴壁生长 |
倍增时间 | 2-3天 |
传代比例 | 1:2至1:4 |
培养基 | 90% DMEM + 10% FBS + 1% P/S(或EMEM) |
培养环境 | 37℃,5% CO₂,95%空气 |
接种密度 | 推荐接种密度:1 × 10⁴ cells/cm² |
细胞存储 | -80℃冷冻保存或液氮中长期保存 |
换液频次 | 每2-3天一次 |
细胞密度 | 80%汇合率时传代,通常在2-3天内达到 |
特征蛋白表达 | 白蛋白、甲胎蛋白、转铁蛋白、胰岛素、IGF II等 |
生物转化代谢酶 | 完整的I相和II相酶,参与药物代谢和解毒 |
基因特征 | p53无突变,表达多种与肝脏功能相关的基因 |
细胞聚团现象 | 常见,可能是尚未完全贴壁或处于分裂期的细胞 |
应用领域 | 药物代谢、肝癌模型、遗传毒性研究、肝炎病毒研 |
培养教程
GS-HEPG2人肝癌细胞亚型培养教程
细胞复苏步骤
快速解冻:将冻存的HEPG2细胞管在37°C水浴中迅速解冻,解冻时轻轻摇匀以确保均匀加热,解冻完成后应立即进行后续操作。
离心分离:解冻后的HEPG2细胞以800 rpm离心5分钟,去除上清液。
重悬细胞:使用含15%胎牛血清的DMEM培养基重悬HEPG2细胞,确保均匀分散。
细胞接种:将重悬后的HEPG2细胞接种于培养瓶或培养板中,每平方厘米接种1×10⁴个细胞。
培养条件:将HEPG2细胞置于37°C、5% CO₂培养箱中培养。
细胞传代步骤
洗涤:使用无钙镁的PBS缓冲液洗涤HEPG2细胞2-3次,去除培养基残留。
消化细胞:加入0.25%的胰蛋白酶溶液,置于37°C消化0.5-1分钟,观察HEPG2细胞开始变圆时终止消化。
终止消化:加入含有胎牛血清的培养基终止胰蛋白酶活性,并轻轻吹打HEPG2细胞,使其悬浮。
离心收集:将HEPG2细胞悬液以800 rpm离心5分钟,弃去上清液。
重悬与接种:使用新鲜的DMEM培养基重悬HEPG2细胞,并按照每平方厘米接种1×10⁴个细胞的密度接种至新培养瓶中。T25培养瓶建议接种密度为1×10⁴个细胞/cm²。
培养:将HEPG2细胞置于37°C、5% CO₂的培养箱中继续培养。
注意事项
空泡现象:HEPG2细胞在培养过程中可能会出现空泡,属于正常现象,不会影响其生长能力。
血清浓度调节:当HEPG2细胞增殖速度减慢时,可适当提高胎牛血清的浓度至15%-20%以促进生长。
培养基的pH值:若发现HEPG2细胞贴壁性较差,应检查培养基的pH值,若偏离正常范围应及时进行调整。
传代操作:在传代过程中,吹打悬浮HEPG2细胞时应尽量减少机械性损伤,控制力度和吹打次数,以减少细胞受损。
定期传代:应定期监测HEPG2细胞的生长状态,传代时机的选择对细胞状态的稳定性至关重要。
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Amelogenin | X,Y |
CSF1PO | 10,11 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 10 |
D13S317 | 9,13 |
D16S539 | 12 |
TH01 | 9 |
TPOX | 8,9 |
vWA | 17 |
参考文献
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