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货号：STM-CL-6106 规格：1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管
Hepa 16细胞（小鼠肝癌细胞）
- 来源：肝癌
- 细胞特征：贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基：DMEM+10% FBS+1mM Sodium Pyruvate+1% P/S
- 其他：表达多种肝脏相关蛋白质,如甲胎蛋白（AFP）、α1抗胰蛋白酶和淀粉酶
Hepa 1-6小鼠肝癌细胞系源自C57L/J小鼠自发产生的BW7756肝癌，属于C57/L小鼠肝癌细胞系Hepa-1的衍生系。与通过化学转化或诱导产生的肝癌模型（如BNL、MH-129、MH134和MH-22A）不同，Hepa 1-6细胞代表了一种更接近人类肝癌发病机制的自发性模型。
Hepa 16细胞特性特征
hepa16细胞是一种自发性肝癌模型,更接近人类肝癌的发病机制
hepa16细胞表达多种肝脏相关蛋白质,如甲胎蛋白（AFP）、α1抗胰蛋白酶和淀粉酶
经检测,hepa16细胞鼠痘病毒（ectromelia virus）呈阴性
hepa16细胞可以在无血清的培养基中繁殖
hepa16细胞可用于构建小鼠肝癌模型,研究肝癌发病机制和治疗方法；可用于3D细胞培养和癌症研究；是一种合适的转染宿主
Hepa 16细胞参数表
| 细胞名称 | Hepa 16细胞（小鼠肝癌细胞） |
| 细胞别称 | HEPA 1-6; Hepa-1-6; Hepa1-6 |
| 来源 | C57L/J小鼠自发产生的BW7756肝癌 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样，贴壁生长 |
| 细胞生长特性 | 贴壁生长，低密度时形态各异，高密度时形态均一 |
| 培养基 | 90% DMEM高糖 + 10% 胎牛血清 (FBS) + 1mM Sodium Pyruvate + 1% P/S |
| 培养环境 | 95% 空气，5% CO₂； 温度：37°C |
| 传代比例 | 1:2至1:3 |
| 换液频率 | 每周2-3次 |
| 培养时间 | 24-48小时 |
| 倍增时间 | 26.99 +- 1.93 hours (PubMed=28152020); ~30 hours (DSMZ=ACC-175) |
| 细胞复苏存活率 | >90% |
| 检测项目 | 细菌、真菌、支原体、内毒素检测 |
| 基因表达特征 | 表达白蛋白、甲胎蛋白（AFP）、α1抗胰蛋白酶、淀粉酶 |
| 病毒检测 | 鼠痘病毒阴性 |
| 细胞冻存条件 | 液氮（-196℃） |
| 应用领域 | 肝癌研究、3D细胞培养、转染宿主 |
| 细胞包装形式 | 鲜活细胞：T25培养瓶；冻存细胞：1ml冻存管 |
| 细胞密度 | 适合的细胞密度在传代时应根据细胞形态调整 |
| 培养注意事项 | 细胞贴壁较弱，消化时间偏短，注意控制消化时间 |
培养教程
Hepa 16小鼠肝癌细胞培养教程
细胞消化步骤
将培养瓶中的培养基完全抽走，用5mL PBS润洗培养瓶1-2次，以去除Hepa16细胞残留的培养基成分。
吸尽PBS后，加入1mL预热的0.25%胰酶-EDTA溶液，轻轻摇晃培养瓶使胰酶均匀覆盖瓶底，确保Hepa16细胞能够被均匀消化。
将培养瓶置于37°C培养箱中，进行消化处理，并每隔1分钟观察Hepa16细胞形态变化。
当Hepa16细胞明显回缩并有部分开始脱落时，迅速加入3-4mL含有血清的培养基以终止胰酶的消化作用。
轻柔地吹打培养瓶以使贴壁的Hepa16细胞脱落，操作时应注意避免对Hepa16细胞造成机械损伤。
细胞收集与洗涤
将消化后的Hepa16细胞悬液转移至离心管中，以1000rpm离心3分钟以收集Hepa16细胞沉淀。
小心吸去上清，加入适量预温的培养基后，轻轻重悬Hepa16细胞沉淀，确保Hepa16细胞均匀分布。
细胞接种
在新的培养瓶中加入适量新鲜预温的培养基（T25培养瓶推荐10mL，T75培养瓶推荐15mL），为Hepa16细胞提供良好的生长环境。
将重悬后的Hepa16细胞悬液均匀地接种到培养瓶中，可以使用十字法或“8”字法混匀，以确保Hepa16细胞在培养瓶中的均匀分布。
轻轻摇晃培养瓶使Hepa16细胞均匀分布，然后将其置于37°C、5% CO2培养箱中进行培养。
细胞观察与换液
在接种Hepa16细胞后24-48小时内，观察细胞的贴壁生长情况，确保Hepa16细胞正常贴壁。
每2-3天更换一次新鲜培养基，吸去旧培养基时应注意避免吸到Hepa16细胞层。
当Hepa16细胞密度达到80%左右时，开始下一轮传代培养。
注意事项
Hepa16细胞贴壁较弱，因此消化时间应控制在较短的范围内，以避免过度消化影响Hepa16细胞的活力。
如果培养瓶中出现较多Hepa16细胞碎片，可以通过PBS润洗和换液的方式清除。
低密度培养时，Hepa16细胞形态可能较为多样；而高密度培养时，Hepa16细胞形态则相对均一。
一些贴壁的Hepa16细胞可能呈现发亮的球形，这属于正常现象，不影响Hepa16细胞的整体状态。
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