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H22细胞(小鼠肝癌细胞)货号:STM-CL-6220 规格:1×10⁶cells/T25培养瓶或1mL冻存管

H22细胞(小鼠肝癌细胞)

  • 来源:肝癌;腹水
  • 细胞特征:悬浮细胞, 淋巴母细胞样
  • 培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
  • 其他:通过C3HA小鼠诱发肝癌获得,后在昆明种小鼠中转化为腹水瘤
Tags: 肝癌细胞    
价格:¥ 1,300.00
提供STR鉴定报告

H22细胞系最早由前苏联医学科学院肿瘤研究所于1952年通过在C3HA小鼠中诱导肝癌形成实体瘤后建立。随后,该瘤细胞悬液经过皮下移植至昆明种小鼠,最终转化为腹水瘤。这些细胞经过多次传代后,能够在多种小鼠品系中(如Km小鼠、615小鼠、C57BL/6小鼠和BALB/C小鼠)形成实体瘤和腹水瘤。后来,H22细胞系由大连医科大学从小鼠腹水中进一步分离并推广。

H22细胞(小鼠肝癌细胞)参数表

细胞名称H22细胞(小鼠肝癌细胞)
别称Hepatoma-22; Hepatoma22; h-22
物种小鼠(Mus musculus)
组织来源肝脏,肝癌
细胞形态淋巴母细胞样,呈圆形
生长特性悬浮生长
来源由前苏联医学科学院肿瘤研究所于1952年建立,通过C3HA小鼠诱发肝癌获得,后在昆明种小鼠中转化为腹水瘤
培养基RPMI-1640 + 10% 胎牛血清 (FBS) + 1% 青霉素-链霉素
接种密度3×10^5 - 5×10^5 cells/mL
换液频率每2-3天更换一次培养基
培养条件37°C,95% 空气 + 5% CO2
冻存液55% 基础培养基 + 40% FBS + 5% DMSO
生物安全等级BSL 1
传代次数通常在4-5代内使用,之后细胞活力可能下降
表面标志物可能表达CD44、CD24等与肿瘤相关的抗原
增殖指数高增殖能力,细胞周期调控与肿瘤发生相关
基因组特征可能包含与肝脏代谢、细胞增殖和凋亡相关的基因突变
转录组特征可能显示与肝癌相关的特定基因表达上调
研究领域肝癌基础研究、药物筛选、肿瘤生物学研究
主要用途评估抗肿瘤药物效果、探索生物标志物

培养教程

H22小鼠肝癌细胞培养教程

H22细胞复苏步骤

  • 从液氮中取出冻存的H22细胞,迅速置于37°C水浴中,轻轻摇动,直至H22细胞完全解冻(约1-2分钟)。

  • 将解冻的H22细胞悬液转移至10 mL完全培养基的离心管中,轻轻混匀。

  • 以1000 rpm离心5分钟,弃去上清液。

  • 将H22细胞重悬于5 mL完全培养基中,混匀后接种至培养瓶中,接种密度为3×10^5 - 5×10^5 cells/mL。

H22细胞的换液与传代

  • 换液频率:每2-3天更换一次培养基,以保持H22细胞的最佳生长环境。

  • 当H22细胞生长至70%-80%汇合时,开始传代。

  • 用PBS轻柔洗涤H22细胞,去除残留培养基。

  • 加入1-2 mL胰酶,消化H22细胞,持续观察H22细胞脱落情况,通常需要1-2分钟。

  • 加入等体积的完全培养基终止消化,轻轻吹打混匀。

  • 以1000 rpm离心5分钟,弃去上清液。

  • 将H22细胞重悬于适量的完全培养基中,并以接种密度为3×10^5 - 5×10^5 cells/mL接种至新的培养瓶中。

H22细胞冻存步骤

  • 选取对数生长期的H22细胞,收集后离心去除培养基。

  • 用55%基础培养基、40% FBS和5% DMSO的冻存液重悬H22细胞。

  • 将H22细胞分装入冻存管中,逐步冷冻:先置于-80°C冰箱过夜,次日转移至液氮中长期保存。

注意事项

  • 悬浮细胞处理:H22细胞为悬浮生长,收集时应注意保留所有培养液,以免损失H22细胞。

  • 传代次数控制:H22细胞在体外传代4-5代后可能活力下降,可通过腹水培养恢复其活力。

  • 无菌操作:整个操作过程应严格无菌,以避免污染。

H22细胞的收集和离心方法

  • 设备无菌:确保所有离心管、培养基和其他操作工具均为无菌状态。

  • H22细胞收集:将培养瓶中的H22细胞悬液轻轻混匀,确保H22细胞均匀分布。

  • 离心操作:将H22细胞悬液转移至无菌离心管,1000 rpm离心8-10分钟。

  • 去除上清液:小心去除上清液,保留H22细胞沉淀。

  • 重悬H22细胞:加入适量完全培养基,轻轻吹打混匀,进行接种或冻存。

通过腹水培养恢复H22细胞活力

  • 实验小鼠准备:选择健康的昆明种小鼠进行实验。

  • 腹水诱导:将H22细胞悬液注射至小鼠腹腔中,通常注射量为1×10^6 cells/mL。

  • 腹水收集:注射后3-7天,通过腹腔穿刺收集腹水液体。

  • H22细胞分离:收集的腹水液体离心1000 rpm,5-10分钟,去除上清液,保留H22细胞沉淀。

  • 重悬和培养H22细胞:用完全培养基重悬H22细胞,并接种至新的培养瓶中继续培养。

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