
MIA PaCa2细胞(人胰腺癌细胞)
- 来源:胰腺;人胰腺导管腺癌细胞
- 细胞特征:半贴半悬 , 上皮样贴壁细胞,伴有圆形漂浮细胞
- 培养基:生长培养基:DMEM+10%FBS+2.5%HS+1%P/S
- 其他:MIA PaCa-2细胞对天冬酰胺酶表现出敏感性
MIA PaCa-2细胞系是从一名65岁的白种男性胰腺癌患者的肿瘤组织中分离并建立的上皮细胞系。MIA PaCa-2细胞系的建立始于1975年,由A. Yunis等人完成,并于1977年正式确立。
MIA PaCa-2细胞是一种低分化的二倍体人源胰腺癌细胞系,显示出近三倍体的染色体组成,模态染色体数为61,单细胞内通常存在16到20条标记染色体,同时也有少数正常染色体缺失的现象。
MIA PaCa-2细胞生物学特征:约40小时的细胞倍增时间和约19%的软琼脂集落形成效率。此外,该细胞系对天冬酰胺酶表现出敏感性。
MIA PaCa-2细胞系的基因表达特征
细胞角蛋白表达:MIA PaCa-2细胞表达细胞角蛋白5.6(Cytokeratin 5.6)和AE1/AE3。
粘附分子表达:表达E-钙粘蛋白(E-cadherin),这是一种重要的细胞粘附分子。
细胞骨架蛋白表达:表达波形蛋白(vimentin),这是一种中间丝蛋白,常见于间质细胞。
神经内分泌标志物表达:表达嗜铬粒蛋白A(chromogranin A)和突触素(synaptophysin),这些是神经内分泌细胞的标志物。
受体表达:表达生长抑素受体2(SSTR2)和神经降压素受体1(NTR1)。
不表达的蛋白:值得注意的是,MIA PaCa-2细胞不表达神经元黏附分子(neural cell adhesion molecule, NCAM)。
其他表达:MIA PaCa-2细胞还表达人集落刺激因子I(CSF-I)和纤溶酶原激活剂。
酶表达:显示出G6PD(葡萄糖-6-磷酸脱氢酶)和B同工酶类型。
MIA PaCa2细胞参数表
细胞名称 | MIA PaCa2细胞(人胰腺癌细胞) |
别名 | MIA-PaCa-2; MIA-PACA-2; MIA-Pa-Ca-2; MIA Paca2; MIA PaCa2; MiaPaCa-2; MIAPACA-2;MiaPaca.2; MiaPaCa2; Miapaca2; MIAPaCa2; MIAPACA2; Mia PACA 2; MIAPaCa-2; PaCa2 |
ATCC编号 | CRL-1420 |
细胞类型/来源 | 人胰腺导管腺癌细胞 |
患者信息 | 65岁高加索男性 |
建立信息 | 1975年由A. Yunis等人建立,1977年正式确立 |
细胞形态/生长特性 | 上皮样,圆形 / 半贴壁生长 / 低分化 |
生长参数 | 倍增时间:25.7±4.3小时(单层),40小时(软琼脂) / 饱和密度:1.5×10^5细胞/cm² / 克隆形成效率:19%(软琼脂) |
细胞周期分布 | G0/G1: 60-65%, S: 20-25%, G2/M: 10-15% |
染色体 | 近三倍体,模态数61,16-20条标记染色体/细胞 |
基因突变 | KRAS (G12C), TP53 (R248W), CDKN2A/p16 (缺失) |
培养基/添加物 | DMEM高糖 + 10%胎牛血清 + 2.5%马血清 + 1%丙酮酸钠(可选) + 1%青霉素/链霉素 |
培养环境 | 37°C, 95%空气+5% CO2, 70-80%湿度 |
传代/换液 | 传代比例1:2至1:6 / 每2-3天换液 |
表达基因/蛋白 | CSF-I, 纤溶酶原激活剂, 细胞角蛋白5.6, AE1/AE3, E-钙粘蛋白, 波形蛋白, 嗜铬粒蛋白A, 突触素, SSTR2, NTR1 |
不表达/酶活性 | 不表达NCAM / G6PD和B同工酶活性 |
信号通路/转录因子 | MAPK/ERK和PI3K/AKT通路激活 / NF-κB活性增强 |
致瘤性/转移潜能 | 在裸鼠中可形成肿瘤 / 较高转移潜能 |
药物/放射敏感性 | 对天冬酰胺酶敏感,对吉西他滨有一定耐药性 / 相对放射抗性 |
代谢特点 | 高葡萄糖消耗和乳酸产生 / 中等谷氨酰胺依赖性 |
免疫相关表达 | MHC I低表达 / PD-L1中等表达 |
冻存/复苏方法 | 10% DMSO + 90%完全培养基,液氮保存 / 37°C水浴快速解冻 |
检测与鉴定 | 无菌(细菌、真菌、支原体阴性),HIV/HBV/HCV阴性 / STR分析确认 |
研究应用 | 胰腺癌、药物筛选、信号通路、耐药机制、转移机制研究 |
相关模型 | 3D培养可形成类器官结构 / 可建立皮下和原位异种移植模型 |
应激条件耐受性 | 可耐受24-48小时血清饥饿 / 可在1% O2低氧条件下存活 |
培养教程
MIA PaCa2人胰腺癌细胞培养教程
细胞复苏
冻存管在37°C水浴中快速解冻(1-2分钟)。
将细胞悬液转移到含4-6mL预热完全培养基的离心管中。
以1000rpm离心3-5分钟,去除上清。
用完全培养基重悬细胞,并接种到含6-8mL完全培养基的T25培养瓶中。
传代
传代时机: 当细胞密度达到70-90%时进行传代。
传代步骤: a. 收集培养基中的悬浮细胞。 b. 用PBS洗涤贴壁细胞。 c. 加入0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液,在37°C下消化1-2分钟。 d. 加入完全培养基终止消化。 e. 轻轻吹打混合细胞。 f. 以1000rpm离心3-5分钟,去除上清。 g. 用新鲜完全培养基重悬细胞。 h. 按1:3到1:8的比例接种到新的培养瓶中。
冻存
冻存液配制: 使用55%基础培养基 + 40%FBS + 5% DMSO的冻存液。
细胞密度调整: 调整细胞密度至1-2 × 10^6 cells/mL。
冻存过程: 缓慢降温后转入液氮保存。
注意事项
首次传代建议使用1:2的比例。
注意收集和保留悬浮细胞。
消化时间不要过长,避免损伤细胞。
定期进行细菌、真菌和支原体检测。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10 |
D1S1656 | 15,17.3 |
D2S441 | 14 |
D2S1338 | 25 |
D3S1358 | 16 |
D5S818 | 12,13 (AddexBio=C0018002/59; ATCC=CRL-1420; CCRID; Cosmic-CLP=724870; DSMZ=ACC-733; ECACC=85062806; Technion Genomics Center BCF; JCRB=JCRB0070; PubMed=25877200; RCB=RCB2094; TKG=TKG 0227) |
13 (PubMed=17254797) | |
D6S1043 | 12 |
D7S820 | 12 (KCLB=21420) |
12,13 (AddexBio=C0018002/59; ATCC=CRL-1420; CCRID; Cosmic-CLP=724870; DSMZ=ACC-733; ECACC=85062806; Technion Genomics Center BCF; JCRB=JCRB0070; PubMed=17254797; PubMed=25877200; RCB=RCB2094; TKG=TKG 0227) | |
D8S1179 | 16 |
D10S1248 | 14,15 |
D12S391 | 19 |
D13S317 | 12,13 |
D16S539 | 10,13 (AddexBio=C0018002/59; ATCC=CRL-1420; CCRID; Cosmic-CLP=724870; DSMZ=ACC-733; ECACC=85062806; Technion Genomics Center BCF; JCRB=JCRB0070; PubMed=25877200; RCB=RCB2094; TKG=TKG 0227) |
11,13 (PubMed=17254797) | |
D18S51 | 12 |
D19S433 | 15 |
D21S11 | 29,31 (PubMed=17254797) |
29,31.2 (ATCC=CRL-1420; CCRID; DSMZ=ACC-733; Technion Genomics Center BCF; PubMed=25877200) | |
D22S1045 | 16 |
FGA | 22 |
Penta D | 12,16 |
Penta E | 13,18 |
TH01 | 9,10 |
TPOX | 9 |
vWA | 15 |
参考文献
- 靶向Neuropilin-2单克隆抗体对胰腺癌细胞株PANC-1生物学功能的影响及其分子机制的探究 《安徽医科大学》 2021年
- 摘要:...验室制备的靶向NRP-2单克隆抗体(NRP-2 mAb)观察其对胰腺癌细胞增殖、迁移...
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