
hbl100细胞(人整合SV40基因的乳腺上皮细胞)
- 来源:乳腺
- 细胞特征:贴壁细胞 , 上皮细胞样
- 培养基:生长培养基:RPMI-1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:hbl100细胞含有整合型SV40病毒基因组序列
HBL-100细胞系源自一位没有乳腺病变或乳腺癌家族史的哺乳母亲的乳汁中建立。hbl100细胞培养至第7代时发现异常核型,但具有合成少量乳糖的能力,对催乳素/雌激素刺激/酪蛋白产生反应。
HBL-100细胞由于含有整合型SV40病毒基因组序列,与早期认为hbl100细胞系是自发永生的观点矛盾,最初认为hbl100细胞源自女性,后发现存在Y染色体,可能来源男性。
hbl100细胞特性
HBL-100细胞系具有合成少量乳糖的能力,对催乳素或雌激素刺激增加酪蛋白产生反应。
hbl100细胞表现上皮细胞特征、内有微绒毛、原纤维和桥粒。
hbl100细胞含有整合型SV40病毒基因组序列。
hbl100细胞参数表
细胞名称 | hbl100细胞(人整合SV40基因的乳腺上皮细胞) |
别称 | HBL 100; HBL100 |
细胞类型 | 转化上皮细胞系 |
细胞来源 | 人乳腺 |
供体来源 | 哺乳期妇女 |
供体特征 | 无乳腺病变和乳腺癌家族史 |
年龄(性别) | 最初认为来源于27岁女性,但检测发现Y染色体存在,可能来源于男性 |
组织来源 | 乳腺 |
细胞形态 | 上皮细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
生物安全等级 | BSL-2 |
致瘤性 | 在裸鼠中表现出致瘤性 |
培养基 | RPMI-1640 (TM175)+10%FBS(TS500) |
培养条件 | 空气,95%;CO2,5%;37℃ |
传代比例 | 1:2-1:4 |
换液频率 | 2~3次/周 |
倍增时间 | ~28-40 hours |
冻存条件 | 55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO, 液氮 |
抗原表达情况 | HLA A1 A10 A11 B7 B8 |
保藏机构 | ATCC; HTB-124RCB; RCB0460 CCTCC;GDC0195 |
特殊性 | 具有合成少量乳糖的能力 |
通过增加酪蛋白的产生对催乳素或雌激素刺激的反应 | |
显微镜分析证实存在微绒毛、原纤维和桥粒,显示上皮特征 | |
存在SV40基因组序列,并非自发永生的细胞系 | |
染色体组型在第7代时就不正常 | |
争议性 | 细胞来源存在争议,可能不是来源于女性 |
应用 | 乳腺癌研究 |
注意事项 | HBL-100细胞含有SV40病毒基因,因此在使用时应注意生物安全。 HBL-100细胞并非正常细胞,因此其研究结果应谨慎解释。 |
培养教程
HBL-100细胞培养
细胞复苏
从液氮中取出HBL-100细胞冻存管,迅速置于37℃水浴中解冻,待完全解冻后立即进行下一步操作。
将解冻后的细胞悬液转移至离心管中,加入1ml培养基,1000rpm离心3分钟,弃去上清液。
用PBS缓冲液清洗细胞2次,每次1ml,1000rpm离心3分钟,弃去上清液。
加入适量培养基重悬细胞,接种到培养瓶或培养皿中。
将培养瓶或培养皿置于37℃、5% CO2培养箱中培养。
细胞传代
当细胞生长至80%-90% confluency时,即可进行传代。
弃去培养上清液,用PBS缓冲液清洗细胞2次,每次1ml。
加入适量胰蛋白酶-EDTA消化液,使细胞完全浸润。
将培养瓶或培养皿置于37℃培养箱中消化1-2分钟,待细胞大部分变圆并脱落后,加入培养基终止消化。
用细胞计数板计数细胞,按1:2-1:4的比例将细胞悬液接种到新的培养瓶或培养皿中。
加入适量培养基,将培养瓶或培养皿置于37℃、5% CO2培养箱中培养。
细胞冻存
当细胞生长至80%-90% confluency时,即可进行冻存。
弃去培养上清液,用PBS缓冲液清洗细胞2次,每次1ml。
加入适量胰蛋白酶-EDTA消化液,使细胞完全浸润。
将培养瓶或培养皿置于37℃培养箱中消化1-2分钟,待细胞大部分变圆并脱落后,加入培养基终止消化。
用细胞计数板计数细胞,制备细胞悬液,其中DMSO的最终浓度为5%,细胞密度不低于1x10^6 cells/ml。
将细胞悬液分装到冻存管中,每管1ml。
将冻存管置于程序降温盒中,以-1℃/分钟的速度降温至-80℃,然后转入液氮中保存。
相关资料
STR鉴定及相关
Amelogenin | X (CCRID; PubMed=25877200; PubMed=28889351) |
X,Y (ATCC=HTB-124; CLS=300178; PubMed=11416159) | |
CSF1PO | 10 |
D2S1338 | 18,24 |
D3S1358 | 14,16 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 8,12 |
D8S1179 | 12,15 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 9,12 |
D18S51 | 16 |
D19S433 | 15 |
D21S11 | 28,30 |
FGA | 25 |
Penta D | 12 |
Penta E | 7 |
TH01 | 6,8 |
TPOX | 8 |
vWA | 16 |