
Hcc1569细胞(人乳腺癌细胞)
- 来源:胸部; 乳腺组织
- 细胞特征:贴壁和悬浮生长 , 上皮细胞样
- 培养基:1640+10% FBS+1% P/S
- 其他:HCC1569细胞系HER2-neu表达呈阳性;雌激素受体 (ER) 表达为阴性、 孕激素受体 (PR) 表达为阴性
HCC1569是一种来源于70岁黑人女性乳腺化生性癌患者的上皮细胞系。该患者的FHIT基因携带种系突变,其女儿也具有相同的突变,患者曾接受过化疗,并且没有乳腺癌的家族遗传史。肿瘤被诊断为TNM IV期3级化生性癌,在18个淋巴结中检测到4个转移,病理分类为分化不良。
HCC1569细胞系建立于1995年,历时19个月完成。HCC1569细胞系具有多倍体特性,是研究Her2/neu阳性的乳腺癌提供了重要的实验模型。
Hcc1569细胞特性特征
癌症基因:HER2/neu:表达阳性;p53:表达阴性,Hcc1569细胞存在p53基因突变;FHIT基因:存在种系突变,患者及其女儿均携带该突变。
表达特征:上皮糖蛋白2 (EGP2):呈阳性;细胞角蛋白19:呈阳性,进一步确认其上皮性质。
受体表达:雌激素受体 (ER):阴性,Hcc1569细胞系不依赖于雌激素生长;孕激素受体 (PR):阴性,通过细胞质蛋白测定,PR的表达水平较低。
肿瘤特征:分化程度:细胞分化较差,通常与肿瘤的侵袭性和预后不良相关;肿瘤分期:被分类为TNM IV期3级化生癌,在18个淋巴结中发现4个转移。
Hcc1569细胞参数表
细胞名称 | Hcc1569细胞(人乳腺癌细胞) |
别名 | HCC-1569 |
来源 | 70岁黑人女性化生性乳腺癌患者的乳腺组织 |
建立时间 | 1995年,历时19个月 |
肿瘤分期 | TNM IV期3级 |
淋巴结转移 | 18个淋巴结中有4个转移 |
FHIT基因状态 | 存在种系突变,患者女儿也携带该突变 |
化疗历史 | 患者之前接受过化疗,且没有乳腺癌家族史 |
细胞特型 | 上皮细胞系,多倍体,分化较差 |
分子特征 | HER2/neu阳性,p53阴性 |
基因表达 | 上皮糖蛋白2阳性,细胞角蛋白19阳性 |
受体表达 | ER阴性,PR阴性,但可检测到低水平的PR表达 |
培养基 | RPMI 1640,通常添加10%-20%胎牛血清 |
培养条件 | 37°C,5% CO₂环境下培养,使用0.25%胰酶消化后进行传代 |
传代频率 | 每3-4天进行一次传代 |
生长速度 | 生长良好,形成致密单层;通常在70%-80%融合度时进行传代 |
常见应用 | 药物筛选、机制研究、HER2靶向治疗研究 |
培养教程
Hcc1569人乳腺癌细胞培养教程
HCC1569细胞复苏
从液氮罐中取出HCC1569细胞冻存管,立即置于37°C水浴中解冻,时间控制在1-2分钟内,避免长时间暴露于高温中。
解冻后,将HCC1569细胞转移至含有10ml RPMI 1640培养基和10% FBS的培养瓶中,轻轻混匀。
将培养瓶置于37°C、5% CO₂培养箱中静置4小时,等待HCC1569细胞适应新的培养环境。
培养基更换
4小时后,弃去含有冻存保护剂的旧培养基,注意操作时避免损伤HCC1569细胞。
加入新鲜的RPMI 1640培养基(含10% FBS),然后继续在37°C、5% CO₂环境下培养HCC1569细胞。
HCC1569细胞观察
每天使用倒置显微镜观察HCC1569细胞的生长状态,检查其形态和附壁情况。通常在24小时内,HCC1569细胞开始附壁并增殖。
确保HCC1569细胞形态正常,避免出现细胞漂浮或生长缓慢的现象。
HCC1569细胞传代操作
当HCC1569细胞生长到70%-80%融合时,进行传代操作:
弃去旧培养基。
加入适量0.25%胰酶溶液,确保HCC1569细胞层完全浸泡。
将培养瓶置于37°C孵育1-3分钟,观察到HCC1569细胞变得半透明并逐渐脱落。
弃去胰酶溶液,用含有10% FBS的RPMI 1640培养基中止消化。
使用移液器轻轻吹打HCC1569细胞,使其均匀分散后,以1:2至1:4的比例转移至新的培养瓶中。
HCC1569细胞冻存
对数生长期的HCC1569细胞可以进行冻存:
收集HCC1569细胞并用含10% DMSO的冻存液重悬。
将HCC1569细胞分装到冻存管中,并逐步降温,最后存入液氮中进行长期保存。
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STR鉴定及相关
Amelogenin | X |
CSF1PO | 10,11,12 (Cosmic-CLP=907046; PubMed=25877200) |
11,12 (ATCC=CRL-2330; PubMed=20679594) | |
D3S1358 | 15,16 |
D5S818 | 11,12 |
D7S820 | 8,8.3,9 (ATCC=CRL-2330) |
8,9 (Cosmic-CLP=907046; PubMed=20679594; PubMed=25877200) | |
D8S1179 | 12,14,15 |
D13S317 | 12 |
D16S539 | 11,12 (PubMed=20679594) |
11,12,13 (ATCC=CRL-2330; PubMed=25877200) | |
12,13 (Cosmic-CLP=907046) | |
D18S51 | 17,18,19 |
D21S11 | 28 |
FGA | 19.2,24 |
Penta D | 8 |
Penta E | 16,17 |
TH01 | 7 |
TPOX | 6,11 |
vWA | 17 |
参考文献
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